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公开(公告)号:CN102590376B
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201210022570.1
申请日:2012-02-01
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种糖蛋白组定量方法,具体步骤为:将来自不同疾病或者相同疾病不同阶段患者的血清样本分为两组,除去高丰度蛋白,测定蛋白浓度,取等蛋白量样本进行除盐和酶解;将所得的酶解产物进行凝集素亲和层析以得到相应的亚糖蛋白组,冻干;分别以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合固化胰酶进行C端标记,冻干后,再以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合N-糖酰胺酶进行N糖基化位点标记,冻干;将两组样本混合上样进行液相色谱-质谱检测,建立基于Mascot Distiller的自定义算法进行定量数据处理。本发明拥有足够的精确性和可重复性,在1∶10~10∶1的范围之内能够保持线性,可精确的反应样本中不同N-糖链结构糖型的糖蛋白变化。
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公开(公告)号:CN102590376A
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201210022570.1
申请日:2012-02-01
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种糖蛋白组定量方法,具体步骤为:将来自不同疾病或者相同疾病不同阶段患者的血清样本分为两组,除去高丰度蛋白,测定蛋白浓度,取等蛋白量样本进行除盐和酶解;将所得的酶解产物进行凝集素亲和层析以得到相应的亚糖蛋白组,冻干;分别以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合固化胰酶进行C端标记,冻干后,再以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合N-糖酰胺酶进行N糖基化位点标记,冻干;将两组样本混合上样进行液相色谱-质谱检测,建立基于Mascot Distiller的自定义算法进行定量数据处理。本发明拥有足够的精确性和可重复性,在1∶10~10∶1的范围之内能够保持线性,可精确的反应样本中不同N-糖链结构糖型的糖蛋白变化。
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公开(公告)号:CN102191323A
公开(公告)日:2011-09-21
申请号:CN201110091077.0
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明涉及一种预测肝癌术后生存的实时定量PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括IL6基因扩增引物及荧光标记探针、HLA_DRA基因扩增引物及荧光标记探针、CSF1基因扩增引物及荧光标记探针、SPP1基因扩增引物及荧光标记探针以及TNF基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了IL6基因、HLA_DRA基因、CSF1基因、SPP1基因以及TNF基因可以作为标志物来预测肝癌术后生存率,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对原发性肝癌病人术后的组织mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。
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公开(公告)号:CN102191323B
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201110091077.0
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明涉及一种预测肝癌术后生存的实时定量PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括IL6基因扩增引物及荧光标记探针、HLA_DRA基因扩增引物及荧光标记探针、CSF1基因扩增引物及荧光标记探针、SPP1基因扩增引物及荧光标记探针以及TNF基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了IL6基因、HLA_DRA基因、CSF1基因、SPP1基因以及TNF基因可以作为标志物来预测肝癌术后生存率,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对原发性肝癌病人术后的组织mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。
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公开(公告)号:CN102206710B
公开(公告)日:2013-01-23
申请号:CN201110091076.6
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种预测肝癌术后转移与复发的实时PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括CXCL10基因扩增引物及荧光标记探针、FKBP10基因扩增引物及荧光标记探针、ASPH基因扩增引物及荧光标记探针、SPP2基因扩增引物及荧光标记探针和ENO2基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了CXCL10基因、FKBP10基因、ASPH基因、SPP2基因和ENO2基因可以作为预测肝癌术后转移与复发的标志物,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对肝癌患者术中切除的癌组织进行mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。相对于芯片技术或者分子杂交,该方法简便、快速且经济实用。
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公开(公告)号:CN102206710A
公开(公告)日:2011-10-05
申请号:CN201110091076.6
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种预测肝癌术后转移与复发的实时PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括CXCL10基因扩增引物及荧光标记探针、FKBP10基因扩增引物及荧光标记探针、ASPH基因扩增引物及荧光标记探针、SPP2基因扩增引物及荧光标记探针和ENO2基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了CXCL10基因、FKBP10基因、ASPH基因、SPP2基因和ENO2基因可以作为预测肝癌术后转移与复发的标志物,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对肝癌患者术中切除的癌组织进行mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。相对于芯片技术或者分子杂交,该方法简便、快速且经济实用。
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