一种永生化特络细胞系及其构建方法

    公开(公告)号:CN107034238B

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN201710272011.9

    申请日:2017-04-24

    Inventor: 王向东 宋东莉

    Abstract: 本发明涉及一种永生化特络细胞系的构建方法,包括如下步骤:(1)将剪碎的小鼠肺脏组织块于二型胶原酶中消化,过滤,离心,收集细胞沉淀,在培养基中培养,待成纤维细胞贴壁后,将上清转移至另一培养皿,培养12小时后换液,继续培养3‑5天;(2)用微量枪头作为细胞刮,刮除成纤维细胞,反复多次刮除后,进行特异性结构telopode的观察和免疫标记鉴定特络细胞;(3)以特络细胞作为宿主细胞,用含有SV‑40‑大T抗原的逆转录病毒载体感染宿主细胞,经过传代、筛选、鉴定。本发明的永生化特络细胞系培养至50代仍然保持较为稳定的状态,解决了现有技术多次分离和提取无法保证特络细胞纯度和稳定性的问题。

    一种人肺特络细胞系
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114231480A

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202111531357.9

    申请日:2021-12-15

    Inventor: 宋东莉 王向东

    Abstract: 本发明涉及一种人肺特络细胞系,属于生物医药技术领域。本发明通过将携带TERT基因和CDK4基因的慢病毒转染原代人肺特络细胞;再将经鉴定稳定转染TERT和CDK4的人肺特络细胞再连续传代培养超过50代后,得到稳定的人肺特络细胞系。通过本发明获得的特络细胞可用于对急慢性疾病、肿瘤等发病机制和干预的基础研究,可用于与自身或其他细胞类型的细胞间通讯和相互作用的研究等;为临床新药筛选及药物治疗机理研究提供细胞模型,为后续的研究做储备。

    脂质物用于制备癌症诊断试剂盒的方法及应用

    公开(公告)号:CN116448910A

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202310373328.7

    申请日:2023-04-10

    Abstract: 本发明涉及一种脂质物用于制备癌症诊断试剂盒的方法及应用,属于生物医药技术领域。脂质物包括通过对血浆脂质的脂质库进行筛选,获得与健康人外周血血浆脂质相比,在特定癌症的患者中显著升高的脂质并去除除这一特定癌症外其他癌症患者中显著升高的脂质和在特定癌症的患者中显著降低的脂质并去除除这一特定癌症外其他癌症患者中显著降低的脂质。通过本发明可以对胃癌、食管癌、前列腺癌、脑癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、卵巢癌和肾癌进行早期诊断,具有特异性高、无创、便捷和价格适中的优点。

    一种永生化特络细胞系及其构建方法

    公开(公告)号:CN107034238A

    公开(公告)日:2017-08-11

    申请号:CN201710272011.9

    申请日:2017-04-24

    Inventor: 王向东 宋东莉

    Abstract: 本发明涉及一种永生化特络细胞系的构建方法,包括如下步骤:(1)将剪碎的小鼠肺脏组织块于二型胶原酶中消化,过滤,离心,收集细胞沉淀,在培养基中培养,待成纤维细胞贴壁后,将上清转移至另一培养皿,培养12小时后换液,继续培养3‑5天;(2)用微量枪头作为细胞刮,刮除成纤维细胞,反复多次刮除后,进行特异性结构telopode的观察和免疫标记鉴定特络细胞;(3)以特络细胞作为宿主细胞,用含有SV‑40‑大T抗原的逆转录病毒载体感染宿主细胞,经过传代、筛选、鉴定。本发明的永生化特络细胞系培养至50代仍然保持较为稳定的状态,解决了现有技术多次分离和提取无法保证特络细胞纯度和稳定性的问题。

    一种人肺特络细胞系构建方法

    公开(公告)号:CN114231567B

    公开(公告)日:2023-09-26

    申请号:CN202111531041.X

    申请日:2021-12-15

    Inventor: 宋东莉 王向东

    Abstract: 本发明涉及一种人肺特络细胞系构建方法,属于生物医药技术领域。本发明通过将携带TERT基因和CDK4基因的慢病毒转染原代人肺特络细胞;再将经鉴定稳定转染TERT和CDK4的人肺特络细胞再连续传代培养超过50代后,得到稳定的人肺特络细胞系。通过本发明获得的特络细胞可用于对急慢性疾病、肿瘤等发病机制和干预的基础研究,可用于与自身或其他细胞类型的细胞间通讯和相互作用的研究等;为临床新药筛选及药物治疗机理研究提供细胞模型,为后续的研究做储备。

    一种人肺特络细胞系构建方法

    公开(公告)号:CN114231567A

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202111531041.X

    申请日:2021-12-15

    Inventor: 宋东莉 王向东

    Abstract: 本发明涉及一种人肺特络细胞系构建方法,属于生物医药技术领域。本发明通过将携带TERT基因和CDK4基因的慢病毒转染原代人肺特络细胞;再将经鉴定稳定转染TERT和CDK4的人肺特络细胞再连续传代培养超过50代后,得到稳定的人肺特络细胞系。通过本发明获得的特络细胞可用于对急慢性疾病、肿瘤等发病机制和干预的基础研究,可用于与自身或其他细胞类型的细胞间通讯和相互作用的研究等;为临床新药筛选及药物治疗机理研究提供细胞模型,为后续的研究做储备。

    一种小鼠肺特络细胞系的外泌体及其提取方法和应用

    公开(公告)号:CN113755424A

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202111169703.3

    申请日:2021-10-08

    Abstract: 本发明公开了一种小鼠肺特络细胞系的外泌体及其提取方法和应用。本发明的外泌体是从小鼠肺特络细胞系中提取而得,所述的外泌体表面表达CD9和CD63蛋白,不表达CD81蛋白。本发明的小鼠肺特络细胞系的外泌体中差异表达miRNA的靶基因涉及的信号通路包括mTOR信号通路,HIF1α信号通路,本分明通过实验表明小鼠肺特络细胞系产生的外泌体可以将相关调节信号传递给人支气管上皮细胞,并发挥了处理试剂相应的或激动或抑制的作用,从而对脂多糖诱导的人支气管上皮细胞急性肺损伤细胞模型产生保护作用。本发明的小鼠肺特络细胞系的外泌体可用于制备治疗或预防急性肺损伤的药物,具有良好的应用前景。

Patent Agency Ranking