公开(公告)号：CN106636171A

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201610888618.5

申请日：2016-10-11

申请人： 天津大学

发明人： 王智文 ,  冯丽丽 ,  陈涛 ,  赵学明

IPC分类号： C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/15

CPC分类号： C12N15/77 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/1029 ,  C12N9/88 ,  C12N2800/22 ,  C12P13/005 ,  C12Y101/01027 ,  C12Y203/01037 ,  C12Y401/01 ,  C12Y401/01031

摘要： 本发明公开了生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株及构建，构建步骤为：(1)在谷氨酸棒杆菌中敲除乳酸脱氢酶编码基因ldhA和乙酸生成基因pta‑ackA、pqo和cat，在磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc前面插入强的sod启动子，敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶编码基因pck，得到菌株CB6；(2)在菌株CB6中敲除青霉素结合蛋白编码基因pbp1a，得到菌株CB7；在菌株CB7中转入构建好的过表达5‑氨基乙酰丙酸合酶基因的质粒pXA，得到工程菌株L2；本发明的工程菌株，在添加10g/L的葡萄糖为碳源的培养基中，生产5‑氨基乙酰丙酸，比对照菌株分别提高了13.53％及以上。

公开(公告)号：CN106047916A

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201610408674.4

申请日：2016-06-03

申请人： 天津大学

发明人： 王智文 ,  冯丽丽 ,  陈涛 ,  赵学明

IPC分类号： C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/15

CPC分类号： C12N15/77 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/0008 ,  C12N9/88 ,  C12P13/00 ,  C12Y101/01027 ,  C12Y101/01028 ,  C12Y401/01032

摘要： 本发明公开了生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株及构建及应用，构建方法为：(1)在谷氨酸棒杆菌中敲除乳酸脱氢酶编码基因ldhA和乙酸生成基因pta‑ackA、pqo和cat，得到的菌株命名为CB4；在CB4菌株中的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc前面插入强的sod启动子，得到菌株CB5；在CB5菌株中敲除基因pck，得到菌株CB6；(2)将质粒pXA和质粒pEP2tuf‑rhtA转入到CB6菌株中。本发明构建的菌株在以10g/L葡萄糖为碳源的培养基中能够生产2.78g/L 5‑氨基乙酰丙酸，这为后续发酵罐连续补料提高5‑氨基乙酰丙酸的产量和产率奠定了基础。