一种基于数字PCR方法检测肉制品中牛源性成分含量的方法

    公开(公告)号:CN108504747A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810285792.X

    申请日:2018-04-03

    IPC分类号: C12Q1/6888 C12Q1/6851

    摘要: 本发明公开了一种基于数字PCR方法检测肉制品中牛源性成分含量的方法。该方法应用生物信息学手段,从15种动物基因组序列中筛选单拷贝基因序列,设计内参引物和牛源种属特异性引物。该方法基于微滴数字PCR技术对肉制品中的牛源性成分含量进行绝对定量分析,无需标准品,无需构建标准曲线,弥补了部分标准品不易获取的缺陷,同时也有效避免了标准品与样品之间的工艺差异产生的量值偏差,进而应用内参基因校正牛源种属特异性基因的百分含量,获得真实可信的食品掺假数值。本发明的检测方法在3h之内即可完成牛源性成分含量鉴定工作,具有简单易行、高效灵敏等特点,为动物源成分量化掺伪鉴定开辟了广阔前景。

    一种基于数字PCR方法检测肉制品中羊源性成分含量的方法

    公开(公告)号:CN108467894A

    公开(公告)日:2018-08-31

    申请号:CN201810285794.9

    申请日:2018-04-03

    摘要: 本发明公开了一种基于数字PCR方法检测肉制品中羊源性成分含量的方法。该方法应用生物信息学手段,从15种动物基因组序列中筛选单拷贝基因序列,设计内参引物和羊源种属特异性引物。该方法基于微滴数字PCR技术对肉制品中的羊源性成分含量进行绝对定量分析,无需标准品,无需构建标准曲线,弥补了部分标准品不易获取的缺陷,同时也有效避免了标准品与样品之间的工艺差异产生的量值偏差,进而应用内参基因校正羊源种属特异性基因的百分含量,获得真实可信的食品掺假数值。本发明的检测方法在3h之内即可完成羊源性成分含量鉴定工作,具有简单易行、高效灵敏等特点,为动物源成分量化掺伪鉴定开辟了广阔前景。

    一种高效安全提取动物肌肉组织DNA的方法

    公开(公告)号:CN105985948A

    公开(公告)日:2016-10-05

    申请号:CN201510090584.0

    申请日:2015-02-28

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种简便、安全、快速提取动物肌肉组织DNA的方法,它是将猪肉、羊肉、牛肉和鸡肉等,清水洗净后,剔去动物组织中的结缔组织和脂肪,剪成约200mg的小块,放入液氮,迅速研磨,直至粉末状,取100mg放入2mL离心管,通过SDS裂解、异丙醇沉淀、吸附柱纯化提取得到DNA,可直接用于PCR扩增。本发明采用的DNA提取方法,2小时内即可完成样品DNA提取的全过程。所提取的DNA质量标准满足了后续PCR扩增的要求,同时避免了传统SDS法或异硫酸氰胍法提取过程中各种有机试剂对实验人员的危害,而且时间上也得到了很大的提升,更适合于动物源性成分鉴定过程中高效快速提取样品DNA的目的,具有高效、快速、低成本、操作简便、无毒安全等优势。