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公开(公告)号：CN118547118A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410654353.7
申请日：2024-05-24
摘要： 本发明属于基因工程技术领域。本发明提供一种硫氧还原蛋白在促进角蛋白的酶解中的应用，还提供了一种促进角蛋白的酶解的方法。本发明将上述硫氧还原蛋白应用于角蛋白酶解体系中，明显提高了酶解效果，经过测试，硫氧还原蛋白配合蛋白酶对角蛋白的酶解效果不但明显高于使用单一蛋白酶的酶解效果，且优于同浓度的化学还原剂对角蛋白的水解，本发明保留了酶法“绿色化学”的优点，对环境友好。
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公开(公告)号：CN118497015A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410961323.0
申请日：2024-07-18
申请人： 天津科技大学 , 惠农达生物技术(江苏)有限公司
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，公开了一种耐温红法夫酵母及其在生产虾青素中的应用，所述红法夫酵母为红法夫酵母TK1201；所述红法夫酵母TK1201已在2023年12月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.29217，微生物分类命名为红法夫酵母菌Phaffia rhodozyma。本发明的红法夫酵母能在发酵温度为16℃‑28℃下产生虾青素，克服了红法夫酵母低温生长的技术难题，获得能在相对较高温度生长且合成虾青素的红法夫酵母菌株及工艺。此外，本发明的红法夫酵母还可以产生β‑烟酰胺单核苷酸。
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公开(公告)号：CN116855476A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310956133.5
申请日：2023-08-01
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种酶活和最适温度提高的脂肪酶融合蛋白，所述脂肪酶融合蛋白是在SEQ ID NO.2所示的野生型脂肪酶酶基础上，将RZⅠ蛋白添加到脂肪酶N端获得的，所述脂肪酶融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用蛋白质融合技术，在体外对扩展青霉来源的脂肪酶进行蛋白质融合，获得酶活和最适温度提高的脂肪酶融合蛋白。在国标法的反应条件下，RZⅠ‑WT的比酶活为188U/G，野生型脂肪酶WT的比酶活为138U/g，提高了36％。RZⅠ‑WT最适反应温度提高了5℃，最高比酶活为206U/g。
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公开(公告)号：CN116515713A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310660086.X
申请日：2023-06-06
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明公开了一种生产菌种培养方法，包括以下步骤：S1、对孢子进行制备；S1‑1、对放线菌孢子进行制备；S1‑2、对霉菌孢子进行制备；S1‑3、对细菌孢子进行制备；S1‑4、对于不产孢子的细菌进行制备；S2、对种子进行制备；S2‑1、摇瓶种子制备，指的是某些孢子发芽和菌丝繁殖速度缓慢的菌种，需将孢子经摇瓶培养成菌丝后再进入种子罐，这就是摇瓶种子；S2‑2、种子罐种子制备，从第一级种子罐开始计算发酵级数，种子罐的级数越少，越有利于简化工艺和控制，并可减少由于多次移种带来的染菌的机会，但也必须考虑要尽量延长发酵罐生产产物的时间，缩短由于种子发芽、生长而占用的非生产时间，以提高发酵罐的生产率。
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公开(公告)号：CN111153968B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202010074806.0
申请日：2020-01-22
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高外源碱性蛋白酶表达量的信号肽突变体及其构建方法与用途，属于基因工程技术领域。所述突变体是将来源于芽孢杆菌的Sec途径的信号肽的C端第‑1位和/或第‑3位氨基酸突变为丙氨酸,即将C端的最后三位氨基酸序列突变为AXA或者在信号肽C端后增加氨基酸序列AXA，所述X为任意氨基酸。本发明构建方法简单易行，适用于枯草芽孢杆菌系统，信号肽突变后的碱性蛋白酶表达量均高于未突变体。本发明为介导枯草芽孢杆菌表达系统中异源碱性蛋白酶基因的表达奠定基础，有效推动了碱性蛋白酶的高效表达及工业化生产。
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公开(公告)号：CN113897342A
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN202111107706.4
申请日：2021-09-22
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明公开了一种基于分子对接的3’,5’‑二磷酸腺苷的高特异性的偶联酶YND突变体，所述YND突变体的基因序列为SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4，所述YND突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8。本发明以晶体结构已知的酵母3’,5’‑二磷酸腺苷酶为出发点设计并改造了一种PAP特异性强的偶联酶。本发明改造的酶由大肠杆菌表达系统诱导表达，储存于储存液中，‑80℃条件下，能维持活性3个月，用相应的缓冲体系稀释使用，方便且可更换反应体系，解决了体系缓冲物质对ST活性检测局限性的问题。
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公开(公告)号：CN112501149A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011513325.1
申请日：2020-12-21
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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公开(公告)号：CN110144319B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201910332253.1
申请日：2019-04-24
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供了一种高效异源表达碱性蛋白酶的基因工程菌，是利用核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的启动子与信号肽组合与克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶基因aprE构建重组表达载体，并转入枯草芽孢杆菌宿主WB600中，最终电转到解淀粉芽孢杆菌CGMCC No.11218中，获得重组基因工程菌。利用该基因工程菌发酵生产的重组碱性蛋白酶的摇瓶发酵活力达到20000U/mL，是原始启动子P43和信号肽SPSacB组合的2.8倍，在5L罐放大实验，该重组菌株酶活达到60000U/mL，为实现碱性蛋白酶的工业化生产奠定了基础。
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