一种表达GLP-1类似物的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN113249288B9

    公开(公告)日:2021-11-09

    申请号:CN202110786966.2

    申请日:2021-07-13

    摘要: 本发明公开了一种高效表达胰高血糖素样肽1(GLP-1)或其类似物的重组菌。本发明的重组菌包括表达GLP-1或其类似物的载体以及干扰重组菌中蛋白酶表达的载体。其中干扰重组菌中蛋白酶表达的载体为通过RNA干扰的方法设计的干扰ClpA、ClpP、ClpQ、ClpX、ClpY、Dcp、PepD、HflB蛋白酶表达的表达载体。本发明通过对重组菌中蛋白酶的表达进行抑制干扰,可以有效解决GLP-1类似物发酵过程中被宿主菌的蛋白酶降解的问题,同时构建时加入亲水性氨基酸可显著增加蛋白可溶性,减少包涵体产生,可溶部分占比80%,从而将GLP-1类似物的表达量提高到2g/L以上。本发明的重组菌可高效表达GLP-1类似物融合蛋白,进而高效制备GLP-1类似物。

    一种表达GLP-1类似物的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN113249288B

    公开(公告)日:2021-09-28

    申请号:CN202110786966.2

    申请日:2021-07-13

    摘要: 本发明公开了一种高效表达胰高血糖素样肽1(GLP‑1)或其类似物的重组菌。本发明的重组菌包括表达GLP‑1或其类似物的载体以及干扰重组菌中蛋白酶表达的载体。其中干扰重组菌中蛋白酶表达的载体为通过RNA干扰的方法设计的干扰ClpA、ClpP、ClpQ、ClpX、ClpY、Dcp、PepD、HflB蛋白酶表达的表达载体。本发明通过对重组菌中蛋白酶的表达进行抑制干扰,可以有效解决GLP‑1类似物发酵过程中被宿主菌的蛋白酶降解的问题,同时构建时加入亲水性氨基酸可显著增加蛋白可溶性,减少包涵体产生,可溶部分占比80%,从而将GLP‑1类似物的表达量提高到2g/L以上。本发明的重组菌可高效表达GLP‑1类似物融合蛋白,进而高效制备GLP‑1类似物。

    一种高效表达GLP-1类似物的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN113249288A

    公开(公告)日:2021-08-13

    申请号:CN202110786966.2

    申请日:2021-07-13

    摘要: 本发明公开了一种高效表达胰高血糖素样肽1(GLP‑1)或其类似物的重组菌。本发明的重组菌包括表达GLP‑1或其类似物的载体以及干扰重组菌中蛋白酶表达的载体。其中干扰重组菌中蛋白酶表达的载体为通过RNA干扰的方法设计的干扰ClpA、ClpP、ClpQ、ClpX、ClpY、Dcp、PepD、HflB蛋白酶表达的表达载体。本发明通过对重组菌中蛋白酶的表达进行抑制干扰,可以有效解决GLP‑1类似物发酵过程中被宿主菌的蛋白酶降解的问题,同时构建时加入亲水性氨基酸可显著增加蛋白可溶性,减少包涵体产生,可溶部分占比80%,从而将GLP‑1类似物的表达量提高到2g/L以上。本发明的重组菌可高效表达GLP‑1类似物融合蛋白,进而高效制备GLP‑1类似物。