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公开(公告)号：CN107974429A
公开(公告)日：2018-05-01
申请号：CN201711223340.0
申请日：2017-11-29
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基，该优化培养基包括DMEM培养基、F-12Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂。本发明利用优化的培养基培养人气道上皮细胞的方法，不仅大大的简化了需要3T3 J2细胞为饲养层而培养上皮细胞的步骤，只需要将链霉蛋白酶消化的原代人气道上皮细胞培养于本发明优化的培养基中，且获得了快速分离且无限传代培养的人气道上皮细胞，将传代培养的人气道上皮细胞进行体外扩增培养，达到20代以上，即可获得足够量的种子细胞用于如体外细胞互作模型研究等诸多后续的体内外研究中。
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公开(公告)号：CN108342322A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201810157195.9
申请日：2018-02-24
Applicant: 宁夏医科大学总医院
Abstract: 本发明公开一种建立原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型的方法，其包括分离纯化子宫内膜腺上皮细胞、建立原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型与鉴定子宫内膜上皮细胞气液相培养模型，具体步骤：收集人子宫内膜，分离子宫内膜腺上皮细胞，收集子宫内膜上皮细胞，获得原代培养的子宫内膜腺上皮细胞，传代培养子宫内膜腺上皮细胞，人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型的建立及鉴定。通过本发明的方法建立的原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型，并对其进行鉴定，不仅可以用于其生理功能的研究，也可以用于子宫内膜异位症、功能失调性子宫出血、子宫内膜癌等多种疾病发病机制的进一步研究，对体外人子宫内膜上皮细胞的实验研究具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN106568977A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610978660.6
申请日：2016-11-08
Applicant: 宁夏医科大学总医院
CPC classification number: G01N33/6863 , C12Q1/6883 , C12Q2600/158 , G01N33/6893 , G01N2800/104
Abstract: 本发明公开了一种血清中sIL‑7R在诊断系统性红斑狼疮肾炎中的应用，其是将血清sIL‑7R蛋白作为标志物来诊断系统性红斑狼疮肾炎的。本发明通过酶联吸附法，荧光定量法通过蛋白，mRNA水平检测系统性红斑狼疮肾炎患者血清中sIL‑7R的含量，便于及时的做出诊断，极大程度上提高了就诊的准确度，使患者及时得到治疗，从而，大大提高临床诊断的准确性。
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公开(公告)号：CN106568938A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610884125.4
申请日：2016-10-11
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: G01N33/535 , G01N33/68
CPC classification number: G01N33/535 , G01N33/68 , G01N2800/347
Abstract: 本发明公开了一种血清中DKK1在诊断系统性红斑狼疮肾炎中的应用，其是将血清DKK1蛋白作为标志物来诊断系统性红斑狼疮肾炎的。本发明通过测定系统性红斑狼疮肾炎患者血清中DKK1蛋白的水平，就能及时的做出诊断，极大程度上提高了就诊的准确度，使患者及时得到治疗，从而，大大提高临床诊断的准确性。
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公开(公告)号：CN106806947A
公开(公告)日：2017-06-09
申请号：CN201710026018.2
申请日：2017-01-13
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: A61L27/60 , A61L27/38 , A61L27/24 , C12N5/0775 , C12N5/074
CPC classification number: A61L27/60 , A61L27/24 , A61L27/3804 , A61L27/3834 , A61L27/3886 , A61L27/3895 , C08L89/00 , C12N5/0625 , C12N5/0668
Abstract: 本发明公开了一种低免疫原性组织工程皮肤构建方法，属于生物工程技术领域，该方法方法采用人表皮干细胞和胎儿来源的胎盘间充质干细胞作为种子细胞，以牛I型胶原构建的3D基质作为支架，利用气液界面分离培养法复合构建为一种有活性的低免疫原性全层组织工程皮肤。该方法基于胎盘间充质干细胞的免疫抑制作用，制备低免疫原性组织工程皮肤，用于异体皮肤移植免疫排斥作用的治疗，方法简便，重复性好。组织形态学显示该组织工程表皮具有完整表皮结构，其中包括基底层、角质层和多层不同分化程度的细胞，达到组织工程表皮的形态学要求。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107974429B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201711223340.0
申请日：2017-11-29
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基，该优化培养基包括DMEM培养基、F‑12Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂。本发明利用优化的培养基培养人气道上皮细胞的方法，不仅大大的简化了需要3T3 J2细胞为饲养层而培养上皮细胞的步骤，只需要将链霉蛋白酶消化的原代人气道上皮细胞培养于本发明优化的培养基中，且获得了快速分离且无限传代培养的人气道上皮细胞，将传代培养的人气道上皮细胞进行体外扩增培养，达到20代以上，即可获得足够量的种子细胞用于如体外细胞互作模型研究等诸多后续的体内外研究中。
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公开(公告)号：CN108118026A
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201711223818.X
申请日：2017-11-29
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开一种人子宫内膜腺上皮细胞的分离培养方法及优化培养基，该优化培养基包括DMEM培养基、F-12 Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂、10mM的WNT拮抗剂。本发明分离培养人子宫内膜腺上皮细胞的方法，通过将胶原酶IV和Accumax细胞分散液联合消化获得的腺上皮细胞培养于本发明优化的培养基中，使分离得到的人子宫内膜腺上皮细胞传代培养至P1代呈克隆增值，可以有效地将人的子宫内膜腺上皮细胞在体外培养2代，为人子宫内膜腺上皮细胞进行体外细胞互作模型研究提供了一定量的种子细胞。
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公开(公告)号：CN106636305A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611008608.4
申请日：2016-11-16
Applicant: 宁夏医科大学总医院
CPC classification number: C12Q1/28 , C12Q1/26 , G01N21/31 , G01N21/78 , G01N2333/90283 , G01N2333/908
Abstract: 本发明属于间充质干细胞技术领域，具体涉及一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法，其是从胎盘中提取人胎盘胎儿侧间充质干细胞得原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞；将原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞进行培养得第一代间充质干细胞，并进行冻存；收集不同个体的第一代间充质干细胞，复苏后进行体外培养至第六代，收集第二代到第六代无血清培养上清，检测其总抗氧化能力、清除自由基能力以及抗氧化酶类物质活性。本发明通过测定人胎盘间充质干细胞培养上清的抗氧化能力，进而推断间充质干细胞的总体抗氧化能力，不仅拓展了间充质干细胞在临床治疗方面的应用，且为临床上间充质干细胞的无细胞治疗提供了依据。
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公开(公告)号：CN106544353A
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201610978586.8
申请日：2016-11-08
Applicant: 宁夏医科大学总医院
CPC classification number: C12N15/74 , C07K14/212 , C12N2810/10
Abstract: 本发明公开一种利用CRISPR-Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法，该方法是先从临床收集鲍曼不动杆菌，采用药敏纸片法对鲍曼不动杆菌进行耐药测定处理后，进行耐药分析及统计；将多重耐药的鲍曼不动杆菌，用裂解煮沸法将其进行DNA的提取，然后利用其设计好的耐药基因引物进行扩增分析；根据上一步耐药基因的检测，挑选出含有OXA-23基因的鲍曼不动杆菌，构建CRISPR/Cas9和sgRNA的质粒，将其导入到含有OXA-23基因的鲍曼不动杆菌中，构建OXA-23基因缺失鲍曼不动杆菌突变菌株，对其进行耐药性分析。该方法操作简单、敲除效率高，为阻止耐药基因的传播和治疗耐药细菌提供新的方法和思路。
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公开(公告)号：CN105963795A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610380784.4
申请日：2016-06-02
Applicant: 宁夏医科大学总医院
CPC classification number: A61L27/60 , A61L27/24 , A61L27/3804 , A61L27/3895 , A61L2430/34
Abstract: 本发明公开了一种基于胶原制备组织工程表皮的方法，采用人表皮干细胞作为种子细胞，以经过牛胎盘I型胶原构建的3D无细胞基质作为支架，利用添加MMPs抑制剂的CELLnTEC培养系统，气液界面分离法构建为一种有活性的全层组织工程表皮。与现有技术相比，本发明本发明利用通过分化培养基中添加MMPs抑制剂marimastat 5nM，有效减少了支架和人工表皮产品的收缩。利用I型牛胶原3D支架结合CELLnTEC培养系统，能够维持表皮干细胞的增殖和分化，不使用成纤维细胞，有效减少了人工表皮产品制备过程中的工作量和操作步骤。
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