一种与拟南芥抗逆基因表达调控相关的内参基因及其应用

    公开(公告)号:CN119432872B

    公开(公告)日:2025-05-16

    申请号:CN202411481891.7

    申请日:2024-10-23

    Abstract: 本发明公开了一种与拟南芥抗逆基因表达调控相关的内参基因及其应用,涉及基因工程技术领域,所述内参基因为LHCB5和/或LHCB4.1,所述LHCB5的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述LHCB4.1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过多种分析方法分析发现内参基因LHCB5、LHCB4.1在拟南芥高温胁迫条件下均表现出一致的稳定性,以LHCB5、LHCB4.1单独及其组合作为内参基因进行相对定量时,HSFA2基因在高温胁迫条件下的相对表达量上升且趋势较为一致,验证了LHCB5、LHCB4.1单独及其组合均可以作为拟南芥在高温胁迫下的qPCR分析的内参基因,为未来拟南芥在高温胁迫下的基因表达研究提供可靠的参考标准,有助于提高实验数据的准确性和可比性。

    一种重叠PCR酶切联用的鉴定方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN118599973A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410874931.8

    申请日:2024-07-02

    Abstract: 本发明涉及一种重叠PCR酶切联用的鉴定方法及试剂盒,所述方法包括以N4N5X或N4N5Y作为引入的酶切位点的后三碱基,选择对应的限制性内切酶,若无对应的限制性内切酶可选时,再以N5X或N5Y作为引入的酶切位点的后二碱基,选择对应的限制性内切酶;X/Y为SNP位点碱基或InDel差异的第一个碱基,N4/N5为X/Y位的前两个碱基,对应酶切位点的第4/5位碱基;扩增获得通用片段初次PCR产物;根据限制内切酶和通用引物设计PCR扩增引物并获得待测模板初次PCR产物;对两者重叠PCR扩增的终产物进行酶切基因分型。本发明利用DOPCR法鉴定SNP/InDel,与现有创造酶切位点方法相比,增加了重叠PCR的步骤,酶切片段差异显著,无需PAGE电泳,普通电泳便可完成检测,成本低且快速。

    一种与拟南芥抗逆基因表达调控相关的内参基因及其应用

    公开(公告)号:CN119432872A

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202411481891.7

    申请日:2024-10-23

    Abstract: 本发明公开了一种与拟南芥抗逆基因表达调控相关的内参基因及其应用,涉及基因工程技术领域,所述内参基因为LHCB5和/或LHCB4.1,所述LHCB5的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述LHCB4.1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过多种分析方法分析发现内参基因LHCB5、LHCB4.1在拟南芥高温胁迫条件下均表现出一致的稳定性,以LHCB5、LHCB4.1单独及其组合作为内参基因进行相对定量时,HSFA2基因在高温胁迫条件下的相对表达量上升且趋势较为一致,验证了LHCB5、LHCB4.1单独及其组合均可以作为拟南芥在高温胁迫下的qPCR分析的内参基因,为未来拟南芥在高温胁迫下的基因表达研究提供可靠的参考标准,有助于提高实验数据的准确性和可比性。

    一种Easy Way通用载体系统、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN118562840A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410791894.4

    申请日:2024-06-19

    Abstract: 本发明公开了一种Easy Way通用载体系统、试剂盒及其应用,涉及基因工程技术领域,所述Easy Way通用载体系统包括载体骨架和连接在载体骨架上的LMR1序列,所述LMR1序列包括依次连接的上游同源臂LFRS、多克隆位点MCS和下游同源臂RFRS;所述载体骨架上不含有与多克隆位点MCS相同的酶切位点。本发明利用Easy Way通用载体系统进行目的基因片段的重组载体构建时,仅需对目的基因进行一次引物设计便可通过一对相同的酶切位点将PCR扩增产物构建至EasyWay载体系统的任意载体骨架中,简单、省时、省力、省钱。

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