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公开(公告)号：CN103589680B
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201310528391.X
申请日：2013-10-30
Applicant: 山东大学 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明涉及一种海洋弹性蛋白酶myroilysin在制备无细胞真皮基质中的应用，包括如下步骤：（1）将经过活化的深海细菌D25菌株发酵培养后，离心，取上清液，加入硫酸铵，收集沉淀，经重溶、透析后离心，再经离子交换层析分离纯化，制得弹性蛋白酶myroilysin；（2）将弹性蛋白酶myroilysin溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶液；（3）将去除脂肪层和表皮的猪皮浸入酶液中，处理后取出，洗涤，制得猪皮无细胞真皮基质。本发明所述的海洋来源弹性蛋白酶myroilysin脱细胞和去除弹性蛋白的效率高，速度快，用量小；制备获得的无细胞真皮基质的孔径大，空隙率高，有利于组织工程中细胞的进入和增殖，在组织工程中具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN103589680A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310528391.X
申请日：2013-10-30
Applicant: 山东大学 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明涉及一种海洋弹性蛋白酶myroilysin在制备无细胞真皮基质中的应用，包括如下步骤：（1）将经过活化的深海细菌D25菌株发酵培养后，离心，取上清液，加入硫酸铵，收集沉淀，经重溶、透析后离心，再经离子交换层析分离纯化，制得弹性蛋白酶myroilysin；（2）将弹性蛋白酶myroilysin溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶液；（3）将去除脂肪层和表皮的猪皮浸入酶液中，处理后取出，洗涤，制得猪皮无细胞真皮基质。本发明所述的海洋来源弹性蛋白酶myroilysin脱细胞和去除弹性蛋白的效率高，速度快，用量小；制备获得的无细胞真皮基质的孔径大，空隙率高，有利于组织工程中细胞的进入和增殖，在组织工程中具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN102994601B
公开(公告)日：2014-01-29
申请号：CN201210540438.X
申请日：2012-12-13
Applicant: 山东大学
IPC: C12P21/06
Abstract: 本发明涉及一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法，包括如下步骤：（1）将海洋胶原蛋白酶MCP-01溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶浓度为0.3～0.5mg/mL的酶液；（2）将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中，在水浴锅中反应，在4℃条件下，离心后超滤，制得胶原蛋白小肽。本发明根据海洋细菌胶原蛋白酶MCP-01催化结构域的特点，设计最佳降解条件，使海洋胶原蛋白酶MCP-01高效降解胶原蛋白，产生的胶原蛋白小肽分子量小于1000Da的肽段占85%以上，从而使其降解产物在医药、食品、化妆品等高附加值领域中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN102994601A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210540438.X
申请日：2012-12-13
Applicant: 山东大学
IPC: C12P21/06
Abstract: 本发明涉及一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法，包括如下步骤：（1）将海洋胶原蛋白酶MCP-01溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶浓度为0.3～0.5mg/mL的酶液；（2）将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中，在水浴锅中反应，在4℃条件下，离心后超滤，制得胶原蛋白小肽。本发明根据海洋细菌胶原蛋白酶MCP-01催化结构域的特点，设计最佳降解条件，使海洋胶原蛋白酶MCP-01高效降解胶原蛋白，产生的胶原蛋白小肽分子量小于1000Da的肽段占85%以上，从而使其降解产物在医药、食品、化妆品等高附加值领域中具有巨大的应用潜力。
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