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公开(公告)号：CN105296513A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510907341.1
申请日：2015-12-09
Applicant: 山东大学 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明涉及一种海洋酯酶及其编码基因E22与应用。一种海洋酯酶基因E22，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述海洋酯酶基因E22编码的海洋酯酶E22，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的海洋酯酶E22能高效选择性地降解手性酯，具有合成重要手性化合物的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN103589680B
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201310528391.X
申请日：2013-10-30
Applicant: 山东大学 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明涉及一种海洋弹性蛋白酶myroilysin在制备无细胞真皮基质中的应用，包括如下步骤：（1）将经过活化的深海细菌D25菌株发酵培养后，离心，取上清液，加入硫酸铵，收集沉淀，经重溶、透析后离心，再经离子交换层析分离纯化，制得弹性蛋白酶myroilysin；（2）将弹性蛋白酶myroilysin溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶液；（3）将去除脂肪层和表皮的猪皮浸入酶液中，处理后取出，洗涤，制得猪皮无细胞真皮基质。本发明所述的海洋来源弹性蛋白酶myroilysin脱细胞和去除弹性蛋白的效率高，速度快，用量小；制备获得的无细胞真皮基质的孔径大，空隙率高，有利于组织工程中细胞的进入和增殖，在组织工程中具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN103589680A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310528391.X
申请日：2013-10-30
Applicant: 山东大学 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明涉及一种海洋弹性蛋白酶myroilysin在制备无细胞真皮基质中的应用，包括如下步骤：（1）将经过活化的深海细菌D25菌株发酵培养后，离心，取上清液，加入硫酸铵，收集沉淀，经重溶、透析后离心，再经离子交换层析分离纯化，制得弹性蛋白酶myroilysin；（2）将弹性蛋白酶myroilysin溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶液；（3）将去除脂肪层和表皮的猪皮浸入酶液中，处理后取出，洗涤，制得猪皮无细胞真皮基质。本发明所述的海洋来源弹性蛋白酶myroilysin脱细胞和去除弹性蛋白的效率高，速度快，用量小；制备获得的无细胞真皮基质的孔径大，空隙率高，有利于组织工程中细胞的进入和增殖，在组织工程中具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN105296513B
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201510907341.1
申请日：2015-12-09
Applicant: 山东大学 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明涉及种海洋酯酶及其编码基因E22与应用。种海洋酯酶基因E22,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述海洋酯酶基因E22编码的海洋酯酶E22,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的海洋酯酶E22能高效选择性地降解手性酯,具有合成重要手性化合物的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN105647995B
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201610112458.5
申请日：2016-02-29
Applicant: 山东大学
IPC: C12P19/30 , C12P19/32 , C07K14/245 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种提取2′,3′‑环形核苷单磷酸的方法，包括如下步骤：(1)提取基因组DNA，PCR扩增，制得基因if3；(2)将基因if3与表达质粒连接，转化后，经发酵培养，制得重组菌发酵液；(3)分离重组菌发酵液中的菌体，破碎细胞，镍柱亲和层析提纯，静置，固液分离，取上清液；(4)将上清液经超滤去除蛋白杂质，经C18反向色谱柱进行高效液相分离，分别制得含四种2′,3′‑环形核苷单磷酸溶液。本发明提供的方法首次实现了从大肠杆菌中同时直接提取四种2′,3′‑环形核苷单磷酸。通过微生物生物发酵，从头合成四种2′,3′‑环形核苷单磷酸，不需要特定的前体物，无化学合成法的污染，简单方便，每升培养液可提取5mg的四种纯品2′,3′‑环形核苷单磷酸。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105349605A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510891356.3
申请日：2015-12-04
Applicant: 山东大学
IPC: C12P21/06
CPC classification number: C12P21/06
Abstract: 本发明涉及一种酶法高效制备低分子量鱼皮胶原蛋白肽的方法，包括如下步骤：(1)将预处理后的鱼皮打碎后，加入MCP-01酶液，酶解后，制得反应液；(2)将步骤(1)制得的反应液灭酶活，然后经固液分离，纯化，制得低分子量鱼皮胶原蛋白肽。本发明制得的鱼皮胶原蛋白肽具有分子量小、肽含量高、产品得率高等，因而具有更高的水溶性和组织吸收性，具有很好的商业应用前景。
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公开(公告)号：CN104561059A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510025698.7
申请日：2015-01-19
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种海洋适冷酯酶及其编码基因E40与应用。一种海洋适冷酯酶基因E40，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明所述的酯酶E40在0-20℃具有较高的催化效率，应用于在低温或常温下能水解乳脂产生短链的脂肪酸，这些物质会增强奶制品的风味，并避免长时间的高温而影响食品的质量进而影响口味和营养成分组成；同时，用适冷酯酶E40处理饮食业产生的含酯废弃物和废水时，安全、高效，对环境保护有非常积极的意义。
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公开(公告)号：CN103320417B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201310228836.2
申请日：2013-06-08
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种深海弹性蛋白酶的低成本制备方法，步骤如下：（1）将深海细菌接种于液体种子培养基，经培养，获得种子培养液；（2）将种子培养液接种于发酵培养基，经发酵培养后，离心取上清，制得发酵液；（3）将发酵液过夜透析，离心，经DEAE-Sepharose Fast Flow层析后经梯度洗脱，取第一个洗脱峰的洗脱液，制得深海细菌弹性蛋白酶。本发明用屠宰厂副产品牛心管代替弹性蛋白，进行细菌菌株CF6-2胞外弹性蛋白酶的产酶发酵，发酵成本降低70%以上，具有很好的环境效益和社会效益。
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公开(公告)号：CN103329720A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310289488.X
申请日：2013-07-10
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及拟康宁木霉SMF2菌剂在促进植物生长中的应用，属于微生物生应用技术领域。本发明通过如下技术方案促进植物的生长：（1）将拟康宁木霉SMF2菌剂配制成浓度100倍液进行浸种处理；（2）将拟康宁木霉SMF2菌剂幼苗移栽时蘸根处理；（3）将拟康宁木霉SMF2菌剂与有机肥或细沙土按照1：10的比例混匀，基施处理。该木霉菌剂可以有效的促进种子的萌发、幼苗的生长、提高作物产量和品质，在农业生产过程中具有很好的应用潜力。
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公开(公告)号：CN101914476B
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201010246786.7
申请日：2010-08-06
Applicant: 山东大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/57 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N9/66 , A01N63/02 , A01P1/00 , A61K38/48 , A61K8/66 , A61P31/00 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一种深海弹性蛋白酶基因及其制备方法与应用，属于生物技术技术领域。本发明涉及适冷菌CF6-2及由其提取出的适冷弹性蛋白酶基因和该基因表达翻译的深海弹性蛋白酶。本发明所述的适冷弹性蛋白酶来源于深海低温高盐环境，与其它的弹性蛋白酶相比，适冷弹性蛋白酶在0～30℃海水中具有很高的弹性蛋白降解效率，常温下就可以发挥作用。而且40℃以上极不稳定，中温就可以使酶失活，从而确保了其安全性；它对多种革兰氏阳性菌具有裂解活性，除了可以应用于医疗，日化等方面以外，对海洋生物医药、水产品加工等方面也具有巨大的应用潜力。
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