胱硫醚β裂解酶及其在硫代亚磺酸酯类化合物合成中的应用

    公开(公告)号:CN118638765A

    公开(公告)日:2024-09-13

    申请号:CN202410656493.8

    申请日:2024-05-24

    申请人: 山东大学

    发明人: 杨春玉 刘远翔

    IPC分类号: C12N9/88 C12N15/60 C12P11/00

    摘要: 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及胱硫醚β裂解酶及其在硫代亚磺酸酯类化合物合成中的应用。本发明针对高活性细菌源酶资源的分离筛选展开,采用传统的从野生菌中分离纯化得到对L‑(±)‑S‑烯丙基半胱氨酸亚砜具有高催化活性的酶LY‑1和LY‑2、以及对L‑(+)‑S‑烯丙基半胱氨酸亚砜也具有高催化活性的酶LY‑3。进一步实现了这两种酶的高效异源表达,发现酶具有底物谱宽、催化活性高的特点。尤其是LY‑3酶与底物原位反应的产物具有很强的抑菌及抗虫活性,在作为生物农药产品防治植物病虫害、绿色天然抗生素开发产品预防治疗动物和人类疾病方面显示出重要的应用前景。

    一种二鸟苷酸环化酶及其应用
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118460502A

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202410688853.2

    申请日:2024-05-30

    申请人: 山东大学

    发明人: 杨春玉 张烨

    摘要: 本发明属于酶工程和分子生物学技术领域,具体涉及一种二鸟苷酸环化酶及其应用。具体的,本发明通过对Halomonas hydrothermalis Y2中的二鸟苷酸环化酶进行研究,首次报道了其在调控细菌对外界盐离子导致的高渗环境耐受性中的功能及应用,从而为提高菌株耐高渗环境抗逆性,实现菌株在高盐环境下生长提供可能,因此具有良好的实际应用之价值。

    一种动物诱食、替抗用饲料添加剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN115029370B

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202210592867.5

    申请日:2022-05-27

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种动物诱食、替抗用饲料添加剂及其制备方法。利用细菌源S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜裂解酶LCC1,通过毕赤酵母多拷贝过表达,发酵获得高产。可直接利用含酶发酵液上清催化底物S‑烯丙基‑L‑半胱氨酸亚砜S‑烯丙基‑L‑半胱氨酸合成高浓度杀菌物质二烷基硫代亚磺酸酯和具有诱食性作用的化合物烯丙基硫醇,也可将发酵液喷雾干燥形成可溶性酶粉固体产品。通过生物催化的原位催化方式实现了高转化率合成抑菌物质二烷基硫代亚磺酸酯和诱食性化合物烯丙基硫醇,不仅安全简便,易于实现产业化,而且解决了产品的不稳定缺陷,在动物养殖尤其是抗生素替代方面具有良好的应用前景。

    一种动物诱食、替抗用饲料添加剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN115029370A

    公开(公告)日:2022-09-09

    申请号:CN202210592867.5

    申请日:2022-05-27

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种动物诱食、替抗用饲料添加剂及其制备方法。利用细菌源S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜裂解酶LCC1,通过毕赤酵母多拷贝过表达,发酵获得高产。可直接利用含酶发酵液上清催化底物S‑烯丙基‑L‑半胱氨酸亚砜S‑烯丙基‑L‑半胱氨酸合成高浓度杀菌物质二烷基硫代亚磺酸酯和具有诱食性作用的化合物烯丙基硫醇,也可将发酵液喷雾干燥形成可溶性酶粉固体产品。通过生物催化的原位催化方式实现了高转化率合成抑菌物质二烷基硫代亚磺酸酯和诱食性化合物烯丙基硫醇,不仅安全简便,易于实现产业化,而且解决了产品的不稳定缺陷,在动物养殖尤其是抗生素替代方面具有良好的应用前景。

    一株具有高发酵密度的芽孢杆菌及其发酵生产方法

    公开(公告)号:CN110616177B

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN201911039740.5

    申请日:2019-10-29

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: C12N1/20 C12R1/07

    摘要: 本发明公开了一株具有高发酵密度的芽孢杆菌,所述菌株命名为芽孢杆菌(Bacillus sp.)19‑B,其确定为具芽孢形态小且高发酵密度的巨大芽孢杆菌,该菌株已于2008年10月29日保藏在“中国典型培养物保藏中心”,保藏号为CGTCC No.M208187。本发明还公开了一种适于所述芽孢杆菌高密度发酵培养的培养基及发酵控制方式。实验证实,本发明的芽孢杆菌有效解决了目前芽孢杆菌发酵密度较低,发酵周期长的问题,同时利用本发明的发酵培养基使得芽孢杆菌19‑B的生物量在20小时内提高4‑5倍,最高生物量达到150亿/ml。预示该菌株在制备微生物菌剂及其生产方面具有广泛的应用前景。

    一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌

    公开(公告)号:CN1710066A

    公开(公告)日:2005-12-21

    申请号:CN200510043704.8

    申请日:2005-06-07

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: C12N1/20 C12P13/14

    摘要: 本发明公开了一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌,该菌名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32,已于2005年4月14日保藏在“中国典型培养物保藏中心”,保藏号为CCTCC NO.M205028。该菌株幼时培养物呈现短杆状,单个或成对存在,有“V”字形排列,不形成菌丝体,革兰氏染色阳性,但容易褪色,不运动,不生孢,不抗酸,兼性厌氧,需要营养丰富的培养基,其上的菌落呈凸起,半透明,毛玻璃状表面;该菌的16S rDNA序列具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列。该菌发酵液中积累的谷氨酰氨量达75-80g/L,并且该菌可耐受高达8%~10%硫酸铵的盐浓度。

    一种高纯度高转化率的S-烷基-L-半胱氨酸亚砜制备方法

    公开(公告)号:CN114874113A

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN202210592783.1

    申请日:2022-05-27

    申请人: 山东大学

    发明人: 杨春玉 刘远翔

    摘要: 本发明涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种高纯度高转化率的S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜制备方法。包括第一步取代反应和第二步氧化反应,取代反应的步骤包括:碱性物质溶解、硫醚物质固体溶解等。氧化反应的步骤包括:溶入过氧化氢溶液、冷乙醇沉淀等。S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜是植物源半胱氨酸亚砜裂解酶的天然底物,此酶与底物作用之后将形成二烷基硫代亚磺酸酯,产物具有广谱抑菌性能,是一种天然的抗生素。利用本发明方法制备底物S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜,不仅大大缩短了制备时间,而且转化率高于以往的方法。经过HPLC‑MS质谱检测,所制备的底物S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜分子量正确,峰图为单一峰,无明显杂峰,纯度高。

    一种细菌源S-烷基-L-半胱氨酸亚砜裂解酶的筛选及其应用

    公开(公告)号:CN114672479A

    公开(公告)日:2022-06-28

    申请号:CN202210584886.3

    申请日:2022-05-27

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种细菌源S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜裂解酶的筛选及其应用。将油气田含硫污水进行微生物富集,通过宏基因组及宏蛋白质组质谱鉴定,发现一种来源于细菌的硒代半胱氨酸裂解酶具有β位裂解S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜的新功能,其产物为抑菌活性物质二烷基硫代亚磺酸酯。对其进行酶学性质测定,发现此酶为高催化活性的S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜裂解酶,并且可以在大肠杆菌中实现高表达,仅需一步镍柱纯化即可得到较高纯度的酶。以S‑烷基‑L‑半胱氨酸亚砜类物质为底物,该酶在高效催化合成抑菌活性物质方面具有很大的应用价值和开发潜力。