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公开(公告)号:CN111896652A
公开(公告)日:2020-11-06
申请号:CN202010753044.7
申请日:2020-07-30
申请人: 山东省食品药品检验研究院 , 山东大学 , 锦州奥鸿药业有限责任公司
摘要: 本发明涉及化学分析定量检测技术领域,特别涉及一种蛇毒类凝血酶的定量检测方法。上述蛇毒类凝血酶的定量检测方法为:取氨基酸序列为LDSPVSNSAHPLSLPSSAPSVGSVCR的白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽对照品,制成系列浓度对照品溶液;分别加入上述供试品溶液,酶解,取酶解后的上清液作为系列待测溶液;待测溶液分别注入液相色谱-质谱仪,选择定性离子对和定量离子对对待测溶液中的特征多肽含量进行检测。本发明采用标准加入法测定白眉蝮蛇蛇毒及其提取物中类凝血酶的含量,方法简便快捷,基质干扰少,灵敏度高,定量准确,填补了白眉蝮蛇蛇毒及其提取物质量标准的空白,提高了质量控制水平。
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公开(公告)号:CN111896651A
公开(公告)日:2020-11-06
申请号:CN202010752988.2
申请日:2020-07-30
申请人: 山东大学 , 山东省食品药品检验研究院 , 锦州奥鸿药业有限责任公司
摘要: 本发明涉及化学分析检测及应用领域,特别涉及一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽及其应用。一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽,氨基酸序列为TLCAGVMEGGIDTCNR。使用上述特征多肽表征待测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含量采用以下步骤:取待测样品经过胰蛋白酶酶解预处理,取酶解液上清作为供试品溶液;将上述供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱-质谱仪,选择定性离子对和定量离子对,对待测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含量进行检测;该方法简便快捷,定量准确,填补了白眉蝮蛇蛇毒的质量标准的空白,提高了质量控制水平。
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公开(公告)号:CN111896651B
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN202010752988.2
申请日:2020-07-30
申请人: 山东大学 , 山东省食品药品检验研究院 , 锦州奥鸿药业有限责任公司
IPC分类号: C07K14/52
摘要: 本发明涉及化学分析检测及应用领域,特别涉及一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽及其应用。一种白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽,氨基酸序列为TLCAGVMEGGIDTCNR。使用上述特征多肽表征待测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含量采用以下步骤:取待测样品经过胰蛋白酶酶解预处理,取酶解液上清作为供试品溶液;将上述供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱‑质谱仪,选择定性离子对和定量离子对,对待测样品中蛇毒类凝血酶的种属来源和含量进行检测;该方法简便快捷,定量准确,填补了白眉蝮蛇蛇毒的质量标准的空白,提高了质量控制水平。
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公开(公告)号:CN111893110A
公开(公告)日:2020-11-06
申请号:CN202010754240.6
申请日:2020-07-30
申请人: 山东省食品药品检验研究院 , 山东大学 , 锦州奥鸿药业有限责任公司
摘要: 本发明提供了一种白眉蛇毒血凝酶特征多肽及其在注射用蛇毒血凝酶种属鉴别中的应用,待测样品及特征肽对照品分别溶解制成供试品及对照品溶液,经二硫苏糖醇及碘乙酰胺还原烷基化处理;碳酸氢氨溶液稀释后,加入酶进行水解;酶解结束后,高速离心,取上清液注入液相色谱-质谱仪进行分析。采用酶解结合液相色谱-串联质谱-多反应监测(LC-MS/MS-MRM)方法,以三电荷935.8→861.4和三电荷935.8→602.3作为检测离子对提取离子流色谱图,对注射用白眉蛇毒血凝酶进行种属鉴别。该方法简便快捷,专属性强,填补了注射用白眉蛇毒血凝酶种属来源鉴定的空白,提高了质量控制水平。
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公开(公告)号:CN111896652B
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202010753044.7
申请日:2020-07-30
申请人: 山东省食品药品检验研究院 , 山东大学 , 锦州奥鸿药业有限责任公司
摘要: 本发明涉及化学分析定量检测技术领域,特别涉及一种蛇毒类凝血酶的定量检测方法。上述蛇毒类凝血酶的定量检测方法为:取氨基酸序列为LDSPVSNSAHIAPLSLPSSAPSVGSVCR的白眉蝮蛇蛇毒类凝血酶特征多肽对照品,制成系列浓度对照品溶液;分别加入上述供试品溶液,酶解,取酶解后的上清液作为系列待测溶液;待测溶液分别注入液相色谱‑质谱仪,选择定性离子对和定量离子对对待测溶液中的特征多肽含量进行检测。本发明采用标准加入法测定白眉蝮蛇蛇毒及其提取物中类凝血酶的含量,方法简便快捷,基质干扰少,灵敏度高,定量准确,填补了白眉蝮蛇蛇毒及其提取物质量标准的空白,提高了质量控制水平。
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公开(公告)号:CN111893110B
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN202010754240.6
申请日:2020-07-30
申请人: 山东省食品药品检验研究院 , 山东大学 , 锦州奥鸿药业有限责任公司
摘要: 本发明提供了一种白眉蛇毒血凝酶特征多肽及其在注射用蛇毒血凝酶种属鉴别中的应用,待测样品及特征肽对照品分别溶解制成供试品及对照品溶液,经二硫苏糖醇及碘乙酰胺还原烷基化处理;碳酸氢氨溶液稀释后,加入酶进行水解;酶解结束后,高速离心,取上清液注入液相色谱‑质谱仪进行分析。采用酶解结合液相色谱‑串联质谱‑多反应监测(LC‑MS/MS‑MRM)方法,以三电荷935.8→861.4和三电荷935.8→602.3作为检测离子对提取离子流色谱图,对注射用白眉蛇毒血凝酶进行种属鉴别。该方法简便快捷,专属性强,填补了注射用白眉蛇毒血凝酶种属来源鉴定的空白,提高了质量控制水平。
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公开(公告)号:CN110396549A
公开(公告)日:2019-11-01
申请号:CN201810379375.1
申请日:2018-04-25
申请人: 锦州奥鸿药业有限责任公司
IPC分类号: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12R1/93
摘要: 本发明涉及生物领域,提供一种利用特异性分子遗传标记检测蛇毒种属来源的方法,本发明方法包括:1)设计引物;2)PCR扩增及含特异性DNA质粒的制备;3)蛇种特异性DNA标记物的制备;4)琼脂糖凝胶电泳分析。本发明方法具有检测时用料少、耗时短、准确度高、成本低、操作性强,能够同时用于多种不同种属来源蛇毒的检测。
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公开(公告)号:CN110396549B
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN201810379375.1
申请日:2018-04-25
申请人: 锦州奥鸿药业有限责任公司
IPC分类号: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12R1/93
摘要: 本发明涉及生物领域,提供一种利用特异性分子遗传标记检测蛇毒种属来源的方法,本发明方法包括:1)设计引物;2)PCR扩增及含特异性DNA质粒的制备;3)蛇种特异性DNA标记物的制备;4)琼脂糖凝胶电泳分析。本发明方法具有检测时用料少、耗时短、准确度高、成本低、操作性强,能够同时用于多种不同种属来源蛇毒的检测。
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公开(公告)号:CN110396550A
公开(公告)日:2019-11-01
申请号:CN201810381094.X
申请日:2018-04-25
申请人: 锦州奥鸿药业有限责任公司
IPC分类号: C12Q1/6888 , C12Q1/6869
摘要: 本发明涉及生物领域,具体提供了一种利用细胞色素基因检测蛇毒种属来源的方法。本发明所述方法包括1)引物设计:以NCBI数据库中记载的蛇细胞色素B基因为参考序列并进行同源性分析;在相对保守区设计引物。2)PCR扩增:以从蛇毒样品中提取的DNA为模板进行扩增,对PCR产物进行测序;3)BLAST对比:将获得的序列去除两端引物,然后进行BLAST对比找出NCBI数据库中与扩增部分Cytb序列相同的序列,从而确定出蛇毒种属。本发明具有耗时短、准确度高、成本低、操作性强的优点,有效解决本领域蛇毒种属检测来源的技术难题。
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公开(公告)号:CN116068098A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202111285211.0
申请日:2021-11-01
申请人: 锦州奥鸿药业有限责任公司
摘要: 本发明提供一种小牛血清中的5‑羟色胺含量的检测方法,所述方法包括:(1)小牛血清供试品溶液制备:将待测样品小牛血清进行离心超滤处理,即得小牛血清供试品溶液;(2)分别取5‑羟色胺盐酸盐对照品溶液、步骤(1)所得小牛血清供试品溶液,采用液相色谱法检测供试品溶液中5‑羟色胺的含量。本发明的方法能够准确分离和测定小牛血清中的5‑羟色胺含量,具有检测成本较低、快速、准确、灵敏度高的特点。
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