一种鳜鱼脑细胞克隆细胞株的构建方法

    公开(公告)号:CN115948335A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211064673.4

    申请日:2022-09-01

    IPC分类号: C12N5/079 C12N7/00 C12Q1/02

    摘要: 本发明公开了一种鳜鱼脑细胞克隆细胞株的构建方法。本发明利用M199培养基对翘嘴鳜脑组织进行原代培养,若干次传代后成功构建了鳜鱼脑传代细胞系,然后使用L15克隆营养液进行稀释培养,稀释培养后各孔单细胞培养成细胞群落后进行传代培养,传代过程均能维持良好的生长状态,细胞形态基本一致。经单细胞克隆后筛选得到的鳜脑克隆传代细胞株可传代50代以上,原始细胞库、基础细胞库和工作细胞库冻存的细胞经复苏均可正常传代。而且构建得到鳜脑克隆传代细胞株对SGIV、SKIV、LMBV、ISKNV、MSRV等多种水产病毒敏感,可以为水产病毒的分离、鉴定、培养和疫苗研究提供较好的细胞平台。而且本构建方法简便,重复性高。

    一种免消化的细胞传代方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118165935A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202410167646.2

    申请日:2024-02-06

    IPC分类号: C12N5/079 C12N5/00

    摘要: 本发明属于生物领域,公开了一种免消化的细胞传代方法,包括如下步骤:步骤1:贴壁细胞消化后得到细胞悬液,将细胞悬液、微载体、培养液混合后在转瓶中进行悬浮培养,获得悬浮培养混合液,所述贴壁细胞在悬浮培养混合液中的微载体的表面形成单层细胞;步骤2:将表面长满单层细胞的微载体、空的微载体、培养液混合,在转瓶中进行流动贴壁培养;该方法采用悬浮培养的方式得到具有单层细胞的微载体,然后利用流动贴壁培养的方式进行细胞的传代,通过这种方法,可以免去消化的步骤,极大的降低了生产成本,使贴壁细胞的传代扩繁变得简单高效。