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公开(公告)号：CN106834161A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201611085518.5
申请日：2016-11-30
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种可用于进行蛋白表达的枯草芽孢杆菌及应用，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌Z12(Bacillus subtilis Z12)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏号为12750。本发明中的菌株为可被高效转化并且蛋白分泌量大的枯草芽孢杆菌，可以作为枯草芽孢杆菌表达系统的原始菌株。其转化效率可达1.8×106cfu/ug，单次电击可得到约2×105个单菌落，转化效率非常高，可以满足建库等苛刻实验的需要。通过生化鉴定和分子鉴定确认该菌属于生物安全的枯草芽孢杆菌。并且该菌分泌能力强，是模式菌168的3倍以上。
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公开(公告)号：CN106434730B
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201611082702.4
申请日：2016-11-30
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
IPC分类号： C12N15/75
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用枯草芽孢杆菌进行表达的无抗表达系统及构建方法。其将利用低背景的木糖操纵子诱导表达的T7 RNA聚合酶，T7 RNA聚合酶再专一性转录T7启动子后目的基因的级联放大表达系统转入芽孢杆菌基因组中，并且删除了中间使用的筛选标记基因。其克服了抗生素筛选标记基因易发生漂移，质粒表达系统不稳定，表达不可诱导表达量不高的缺点，建立了一种低背景可控诱导且高效表达的无抗表达系统。结合枯草芽孢杆菌表达系统本身发酵成本低，可规模化生产，发酵产物可分泌到发酵液中，不含有内毒素等优点，给表达目的蛋白提供了一种全新的表达系统。
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公开(公告)号：CN106434730A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201611082702.4
申请日：2016-11-30
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
IPC分类号： C12N15/75
CPC分类号： C12N15/75 , C12N2800/101 , C12N2800/24
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用枯草芽孢杆菌进行表达的无抗表达系统及构建方法。其将利用低背景的木糖操纵子诱导表达的T7 RNA聚合酶，T7 RNA聚合酶再专一性转录T7启动子后目的基因的级联放大表达系统转入芽孢杆菌基因组中，并且删除了中间使用的筛选标记基因。其克服了抗生素筛选标记基因易发生漂移，质粒表达系统不稳定，表达不可诱导表达量不高的缺点，建立了一种低背景可控诱导且高效表达的无抗表达系统。结合枯草芽孢杆菌表达系统本身发酵成本低，可规模化生产，发酵产物可分泌到发酵液中，不含有内毒素等优点，给表达目的蛋白提供了一种全新的表达系统。
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公开(公告)号：CN106834161B
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201611085518.5
申请日：2016-11-30
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种可用于进行蛋白表达的枯草芽孢杆菌及应用，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌Z12(Bacillus subtilis Z12)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏号为12750。本发明中的菌株为可被高效转化并且蛋白分泌量大的枯草芽孢杆菌，可以作为枯草芽孢杆菌表达系统的原始菌株。其转化效率可达1.8×106cfu/ug，单次电击可得到约2×105个单菌落，转化效率非常高，可以满足建库等苛刻实验的需要。通过生化鉴定和分子鉴定确认该菌属于生物安全的枯草芽孢杆菌。并且该菌分泌能力强，是模式菌168的3倍以上。
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公开(公告)号：CN107287229A
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201710522101.9
申请日：2017-06-30
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用芽孢杆菌高效分泌表达外源蛋白的方法，其特征在于：所述目的蛋白在胞内大量积累，其就被大量分泌到发酵液中。其不依赖于信号肽或者特征结构，与现有的Sec途径、Tat途径、Com系统和ABC转运途径有本质上差异。当任一目的蛋白在细胞内大量表达，就可以通过这一途径大量分泌到细胞外，最大分泌量可以达到g/L级别。不仅克服了现有分泌途径分泌量低，通用性差的特点，还可以无选择性地将目的蛋白分泌到发酵液中，降低后期分离纯化的难度。
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公开(公告)号：CN106755046A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611081187.8
申请日：2016-11-30
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种改造芽孢杆菌基因组的方法。本发明具有适应性广(质粒转化难度低，pBTS质粒可以在多种革兰氏阳性菌中进行复制，改造多种菌的基因组)，可以反复多次改造同一菌株(重组质粒具有两个同源重组片段，依次发生两次同源重组，第二次同源重组后可能恢复到野生型，也可以得到改造菌株，但是不残留任何影响继续改造的片段，如抗性标记、质粒复制元件等)，并且可以改造对细菌生长影响较大的基因(引入cre重组酶和第二种抗性标记系统，可依靠抗性筛选第二次重组得到的改造菌株，杀死生存能力强的野生型菌株，之后表达cre重组酶，切割掉第二种抗性标记，残留的片段不会影响再次对菌株进行改造)。
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公开(公告)号：CN106701876A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201710009603.1
申请日：2017-01-06
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
IPC分类号： C12P21/06 , C07K1/107 , A23K20/147
摘要： 本发明公开了一种蛋白盐的高效清洁生产方法，包括以下步骤：步骤A，将植物蛋白原料进行水解；步骤B，所述步骤A完成后，将水解液的pH值调至5～9，将水解液的温度调至40～80℃；步骤C，所述步骤B完成后，向水解液中加入可溶性金属盐，进行螯合反应；步骤D，将步骤C所得反应产物进行烘干；步骤E，将步骤D所得烘干产物进行粉碎处理，最终制得蛋白盐产品。本发明方法操作简便，设备投资少，生产周期短，且没有固体和液体废弃物产生，对环境影响小。通过本发明生产方法制备得到的蛋白盐可作为饲料添加剂应用。
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公开(公告)号：CN115287175A
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN202211133292.7
申请日：2022-09-17
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种新型发酵设备，包括罐体以及用于支撑罐体的底架，所述罐体上设有进出料口，在进出料口处安装可拆卸式盖板，在罐体内设有导流螺旋，所述罐体的两端通过支座固定在底架上，在罐体上固定安装齿环托，在底架上安装减速电机，减速电机的输出端安装驱动齿轮，该驱动齿轮与齿环托啮合，所述罐体尾端中间位置安装有三通道旋转接头，罐体内设夹层，在罐体外壁开设与夹层相通的进口和出口，该进口和出口通过管道连接三通道旋转接头，在罐体内壁安装有喷头，该喷头通过管路连接三通道旋转接头。本发明采用罐体旋转搅拌的方式，混合无死角且混合效果好，不仅可用于常规液态发酵，还可以用于轴搅拌效果差的固态发酵和粘稠物料的液态发酵。
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公开(公告)号：CN114568593A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202111601064.3
申请日：2021-12-24
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
IPC分类号： A23K50/10 , A23K10/37 , A23K20/147 , A23K20/142 , A23K20/163 , A23K40/10
摘要： 本发明属于动物饲料领域，具体为一种复配型反刍动物过瘤胃蛋白饲料及制作方法，植物蛋白90‑98份、饲料粘结剂1‑4份和水18‑32份；还包括氨基酸，氨基酸为赖氨酸和蛋氨酸，所述赖氨酸为2‑3份，蛋氨酸为1‑2份。本发明中粗蛋白蛋白小肠消化率高，解决了泌乳高峰期蛋白需求高，摄入的植物来源蛋白平衡性差的技术问题，生产成本低。
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公开(公告)号：CN114258986A
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202111601067.7
申请日：2021-12-24
申请人： 成都美溢德生物技术有限公司
IPC分类号： A23K50/10 , A23K20/147 , A23K20/163 , A23K10/37 , A23K40/10
摘要： 本发明属于动物饲料领域，具体为一种反刍动物过瘤胃蛋白饲料及其制备方法。所述饲料颗粒为0.8‑1.2mm*0.8‑1.2mm的圆柱形或者直径为0.8‑1.2mm圆球形颗粒。本发明采用减小微生物附着面积，降低微生物对蛋白的降解率，提高蛋白过瘤胃率，解决了热处理易导致消化率降低，及化学处理有毒且适口性较差和物理包被成本高昂的技术问题，效果好，成本低。
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