一种降低芽孢杆菌发酵液粘度的方法

    公开(公告)号:CN107779465B

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN201711034848.6

    申请日:2017-10-30

    IPC分类号: C12N15/75 C12P13/02

    摘要: 本发明属于发酵工程领域,具体涉及一种降低芽孢杆菌发酵液粘度的方法,通过直接敲除枯草芽孢杆菌合成γ‑PGA的基因——pgs,包括将pgs‑F插入到pBTS质粒的KpnI和BamHI之间,将pgs‑R插入到BamHI和XhoI之间,构建新的质粒pBTS‑pgs,转化质粒进入待敲除菌株,进行第一次重组,以及进行第二次重组等步骤,获得不具有抗性标记的敲除pgs基因的菌株,阻碍芽孢杆菌合成γ‑PGA,进而降低发酵液的粘度,促进菌体生长,提高发酵产物浓度。

    一种基于芽孢杆菌的无抗表达系统及构建方法

    公开(公告)号:CN106434730B

    公开(公告)日:2019-08-02

    申请号:CN201611082702.4

    申请日:2016-11-30

    IPC分类号: C12N15/75

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种利用枯草芽孢杆菌进行表达的无抗表达系统及构建方法。其将利用低背景的木糖操纵子诱导表达的T7 RNA聚合酶,T7 RNA聚合酶再专一性转录T7启动子后目的基因的级联放大表达系统转入芽孢杆菌基因组中,并且删除了中间使用的筛选标记基因。其克服了抗生素筛选标记基因易发生漂移,质粒表达系统不稳定,表达不可诱导表达量不高的缺点,建立了一种低背景可控诱导且高效表达的无抗表达系统。结合枯草芽孢杆菌表达系统本身发酵成本低,可规模化生产,发酵产物可分泌到发酵液中,不含有内毒素等优点,给表达目的蛋白提供了一种全新的表达系统。

    一种基于芽孢杆菌的无抗表达系统及构建方法

    公开(公告)号:CN106434730A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201611082702.4

    申请日:2016-11-30

    IPC分类号: C12N15/75

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种利用枯草芽孢杆菌进行表达的无抗表达系统及构建方法。其将利用低背景的木糖操纵子诱导表达的T7 RNA聚合酶,T7 RNA聚合酶再专一性转录T7启动子后目的基因的级联放大表达系统转入芽孢杆菌基因组中,并且删除了中间使用的筛选标记基因。其克服了抗生素筛选标记基因易发生漂移,质粒表达系统不稳定,表达不可诱导表达量不高的缺点,建立了一种低背景可控诱导且高效表达的无抗表达系统。结合枯草芽孢杆菌表达系统本身发酵成本低,可规模化生产,发酵产物可分泌到发酵液中,不含有内毒素等优点,给表达目的蛋白提供了一种全新的表达系统。