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公开(公告)号:CN106497971A
公开(公告)日:2017-03-15
申请号:CN201710025503.8
申请日:2017-01-13
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/8205 , A01H4/00
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种快速高效的甘蓝型油菜毛状根诱导及培养方法。该方法使用农杆菌重悬液重悬活化后的发根农杆菌;在生长2周的无菌甘蓝型油菜幼苗的近子叶端下胚轴处制造伤口;用发根农杆菌重悬液侵染伤口处;继续无菌培养侵染后的幼苗,在伤口处产生毛状根;将带有毛状根的下胚轴切下后,培养获得无菌的毛状根;将毛状根的根尖切下在继代培养基中培养可获得大量毛状根。本发明中使用的发根农杆菌可为野生型发根农杆菌,也可以为转入带有目的基因的发根农杆菌。野生型发根农杆菌诱导产生的毛状根可以用于根生理研究或次级代谢物的生产,而带有目的基因的农杆菌诱导产生的毛状根可以用于特定基因或启动子等组件的功能研究。
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公开(公告)号:CN117965561A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410186690.8
申请日:2024-02-20
Applicant: 扬州大学 , 中国农业科学院油料作物研究所
Abstract: 本发明公开了一种甘蓝型油菜BnaWRKY40基因及其在抗菌核病中的应用。所述BnaWRKY40基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:1所示。所述BnaWRKY40基因、包含所述BnaWRKY40基因的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系在(a1)或(a2)中的应用:(a1)调控甘蓝型油菜抗菌核病;(a2)甘蓝型油菜抗菌核病品系的选育和抗病分子育种方面。其中所述应用通过BnaWRKY40基因的过表达实现。甘蓝型油菜遗传转化的功能分析表明,过表达BnaWRKY40能够提高甘蓝型油菜对菌核病的抗性,在油菜抗菌核病材料的选育和抗病分子育种方面具有重要价值。
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公开(公告)号:CN114369639A
公开(公告)日:2022-04-19
申请号:CN202111579396.6
申请日:2021-12-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种高效筛选具有植物茉莉素途径抑制功能的病原效应因子的方法,包括以下步骤:构建双荧光素酶报告载体pVSP1‑DL,并转入农杆菌中;将待筛选的效应因子基因片段构建到植物双元超表达载体,并转入农杆菌中;将含有报告载体的农杆菌与含有效应因子超表达载体的农杆菌混合,并注射烟草叶片;使用LUC荧光素酶的底物喷施注射的烟草叶片,进行荧光成像;对烟草注射部位取样,进行LUC和REN双荧光素酶酶活测定。本发明方法可以用简单快速的操作过程和低成本的仪器实现高效率、大批量的筛选抑制茉莉素途径的病原效应因子。
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公开(公告)号:CN109652419A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201811570132.2
申请日:2018-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜(Brassica napus)中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明,该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应,但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低,仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导,仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达,仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达,增强油菜对核盘菌的抵抗能力。
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公开(公告)号:CN107604001A
公开(公告)日:2018-01-19
申请号:CN201710832330.0
申请日:2017-09-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于真空渗入的甘蓝和甘蓝型油菜叶片瞬时表达的方法。该方法包括用农杆菌侵染液悬浮活化后的农杆菌;将甘蓝或甘蓝型油菜幼苗叶片切割成小块;将叶片小块置于农杆菌侵染液中,抽真空处理促进农杆菌对植物组织的渗入;将农杆菌侵染后的叶片小块暗培养的步骤。本发明结合叶片预处理和真空处理实现农杆菌渗入甘蓝或甘蓝型油菜叶片组织中从而实现农杆菌高效浸染甘蓝或甘蓝型油菜细胞,并且可以实现高效率的甘蓝和甘蓝型油菜中外源基因瞬时表达。
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公开(公告)号:CN119265198A
公开(公告)日:2025-01-07
申请号:CN202411655593.5
申请日:2024-11-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/66 , C12N15/55 , C12N15/56 , C12N9/22 , C12N9/24 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种植物中高表达启动子PETS3及其应用,该高表达启动子PETS3序列如SEQ ID NO.1所示。本发明成功从甘蓝型油菜中克隆了一种分生组织高表达水平启动子PETS3,该启动子驱动异源基因Cas9在甘蓝型油菜茎分生组织中表达水平是pro35S驱动下表达的18倍以上,另外,该启动子也可驱动基因在根和愈伤组织中高水平表达。本发明解决了现有技术中油菜基因编辑应用中缺少分生组织强启动子的问题,在基因编辑实践中使用本启动子具有周期短,工作量低、效率高的效果,在植物遗传育种和基因工程领域具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN116640764A
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202310489413.X
申请日:2023-05-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/66 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明属于植物生物技术及基因工程领域,具体涉及一种油菜内源的具启动子功能的DNA分子及其应用。本发明成功克隆了一种愈伤组织强启动子Pmt222,解决了现有技术中油菜转基因应用中缺少愈伤组织强启动子的问题,在基因编辑研究中使用本启动子具有成本低,效率高,周期短的效果,在植物遗传转化和基因工程领域具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN109652419B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN201811570132.2
申请日:2018-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , A01H6/20 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜(Brassica napus)中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明,该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应,但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低,仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导,仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达,仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达,增强油菜对核盘菌的抵抗能力。
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公开(公告)号:CN106497971B
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201710025503.8
申请日:2017-01-13
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种快速高效的甘蓝型油菜毛状根诱导及培养方法。该方法使用农杆菌重悬液重悬活化后的发根农杆菌;在生长2周的无菌甘蓝型油菜幼苗的近子叶端下胚轴处制造伤口;用发根农杆菌重悬液侵染伤口处;继续无菌培养侵染后的幼苗,在伤口处产生毛状根;将带有毛状根的下胚轴切下后,培养获得无菌的毛状根;将毛状根的根尖切下在继代培养基中培养可获得大量毛状根。本发明中使用的发根农杆菌可为野生型发根农杆菌,也可以为转入带有目的基因的发根农杆菌。野生型发根农杆菌诱导产生的毛状根可以用于根生理研究或次级代谢物的生产,而带有目的基因的农杆菌诱导产生的毛状根可以用于特定基因或启动子等组件的功能研究。
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公开(公告)号:CN214071056U
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN202023002789.4
申请日:2020-12-15
Applicant: 扬州大学
IPC: A01G31/02
Abstract: 本实用新型公开了一种植物水培装置,包括水箱、盖板和种植杯,所述盖板与水箱相互扣合,所述盖板上分布有放置种植杯的通孔;所述种植杯上下贯通,上部设有杯沿以悬挂在通孔上;所述种植杯内放置有海绵,所述海绵内夹有两张吸水纸,植物种子置于两张吸水纸中间。本实用新型操作方便、成本低、通用性好,可随时观察植株根系或移栽植株。本水培装置适用于各种常见的单子叶或双子叶农作物如小麦、玉米、白菜、油菜、甘蓝、黄瓜、葫芦、大豆等。
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