公开(公告)号：CN102020717A

公开(公告)日：2011-04-20

申请号：CN201010533669.9

申请日：2010-11-05

申请人： 扬州大学

发明人： 龚卫娟 ,  杨悌 ,  潘兴元 ,  季明春

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63

摘要： 本发明涉及一种增强淋巴细胞靶向杀伤肿瘤的活性因子及其制备方法，所说的活性因子的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。它通过以下方法制得：利用PCR分别扩增出SEQIDNO：2-4的片段，将这三个片段串联插入pQ31载体，各片段中间接上柔性片段；得到融合蛋白表达载体；再将融合蛋白表达载体转化入M15大场杆菌菌株，经IPTG诱导表达，然后洗涤包涵体，变性条件下用Ni+-ITA树脂纯化，进一步复性后得到dsNKg2D-IL-15蛋白。本发明能在体外大量表达dsNKg2D-IL-15蛋白，并且表达的蛋白在生理环境下稳定而不降解，具备使肿瘤细胞反式递呈IL-15激活NK细胞的活性。

公开(公告)号：CN102020717B

公开(公告)日：2012-09-26

申请号：CN201010533669.9

申请日：2010-11-05

申请人： 扬州大学

发明人： 龚卫娟 ,  杨悌 ,  潘兴元 ,  季明春

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63

摘要： 本发明涉及一种增强淋巴细胞靶向杀伤肿瘤的活性因子及其制备方法，所说的活性因子的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。它通过以下方法制得：利用PCR分别扩增出SEQIDNO：2-4的片段，将这三个片段串联插入pQ31载体，各片段中间接上柔性片段；得到融合蛋白表达载体；再将融合蛋白表达载体转化入M15大场杆菌菌株，经IPTG诱导表达，然后洗涤包涵体，变性条件下用Ni+-ITA树脂纯化，进一步复性后得到dsNKg2D-IL-15蛋白。本发明能在体外大量表达dsNKg2D-IL-15蛋白，并且表达的蛋白在生理环境下稳定而不降解，具备使肿瘤细胞反式递呈IL-15激活NK细胞的活性。