一种猪流行性腹泻病毒抗体检测试纸条

    公开(公告)号:CN109856405A

    公开(公告)日:2019-06-07

    申请号:CN201811573199.1

    申请日:2018-12-21

    摘要: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒抗体检测试纸条,所述试剂盒含有氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的重组PEDV S蛋白和抗SPA抗体。本发明通过优选PEDV S重组蛋白的片段,大幅度提高了构建的猪流行性腹泻病毒抗体的胶体金检测试剂盒检测的检测灵敏度,使得其检测的灵敏度达到ELISA检测试剂盒的水平。同时,本检测试剂盒特异性高,并具有良好的重复性,检测时间短,能同时检测大量的样品。本发明对解决大批量样品猪血清的猪流行性腹泻抗体检测具有重要的现实意义,通过对猪群抗体水平的检测,可以实时监控猪群的整体免疫效果,为该病的诊断、检测和监测等提供了有力的工具。

    一种蛋白印迹法检测试剂盒的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114578049A

    公开(公告)日:2022-06-03

    申请号:CN202210081268.7

    申请日:2022-01-24

    摘要: 本发明提供一种蛋白印迹法检测试剂盒的制备方法和应用,该试剂盒至少包括:包埋重组抗原的硝酸纤维素膜和碱性磷酸酶标记的鼠抗猪IgG。试剂盒制备方法包括:将重组抗原于电压100V、电流1~2A的条件下在聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,通电时间为45min;将步骤1获得的产物采用转膜液进行转膜处理;将转膜处理后的膜浸泡在封闭液内进行封闭处理;之后将膜风干得到包埋重组抗原的硝酸纤维素膜;采用过碘酸钠法将活化的碱性磷酸酶对鼠抗猪IgG进行标记,之后透析去除未结合的碱性磷酸酶,得到碱性磷酸酶标记的鼠抗猪IgG,再将碱性磷酸酶标记的鼠抗猪IgG用含0.12‰绿色素的酶标稀释液稀释,并与包埋重组抗原的硝酸纤维素膜一起于2~8℃避光封闭保存。