公开(公告)号：CN105671045A

公开(公告)日：2016-06-15

申请号：CN201610104796.4

申请日：2016-02-25

申请人： 新疆农垦科学院

发明人： 皮文辉 ,  周平 ,  郭延华 ,  王伟 ,  黄兰兰 ,  韩猛立 ,  简子健 ,  王新华 ,  刘守仁

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/87

CPC分类号： C12N15/1137 ,  C12N15/85 ,  C12N15/902 ,  C12N2310/141 ,  C12N2800/107

摘要： 本发明公开了一种提高基因编辑后绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复频率的方法。本发明提供了抑制含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞中Lig4基因表达的物质在制备促进含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复产品中的应用。本发明的实验证明，本发明筛选到抑制绵羊Lig4基因表达的siRNA，通过siRNA抑制绵羊Lig4基因表达,抑制绵羊胚胎成纤维细胞的NHEJ修复途径从而刺激细胞内HR修复途径，提高了细胞采用HR修复的频率，为提高绵羊胚胎成纤维细胞基因打靶效率和研究绵羊基因组精确编辑提供基础。

公开(公告)号：CN105671045B

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201610104796.4

申请日：2016-02-25

申请人： 新疆农垦科学院

发明人： 皮文辉 ,  周平 ,  郭延华 ,  王伟 ,  黄兰兰 ,  韩猛立 ,  简子健 ,  王新华 ,  刘守仁

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/87

摘要： 本发明公开了一种提高基因编辑后绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复频率的方法。本发明提供了抑制含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞中Lig4基因表达的物质在制备促进含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复产品中的应用。本发明的实验证明，本发明筛选到抑制绵羊Lig4基因表达的siRNA，通过siRNA抑制绵羊Lig4基因表达,抑制绵羊胚胎成纤维细胞的NHEJ修复途径从而刺激细胞内HR修复途径，提高了细胞采用HR修复的频率，为提高绵羊胚胎成纤维细胞基因打靶效率和研究绵羊基因组精确编辑提供基础。