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公开(公告)号：CN111778234B
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202010676098.8
申请日：2020-07-14
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种乙酰氨基葡萄糖水解酶突变体及其应用，通过对现有的N‑乙酰氨基葡萄糖水解酶进行定点突变得到的一种酶活明显提高的N‑乙酰氨基葡萄糖水解酶，所述N‑乙酰氨基葡萄糖水解酶可以高效的水解N‑乙酰氨基葡萄糖，显著提高酶转化过程中氨基葡萄糖的产生效率，从而在提高酶水解法的工业价值的同时还能减少环境污染。
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公开(公告)号：CN103122355B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201210535657.9
申请日：2012-12-12
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种重组耐热醛酮还原酶基因、基因编码酶、重组载体、工程菌及基因编码酶在制备光学手性醇中的应用，所述重组耐热醛酮还原酶基因具有与SEQ ID No.1所示核苷酸序列90%以上同源性；本发明所涉及的重组耐热醛酮还原酶具有高活性、热稳定性好，60℃处理 15小时后仍较为稳定，残余相对酶活高达99%；本发明的重组耐热醛酮还原酶高效高选择性地制备手性醇类化合物；由于本发明的重组耐热醛酮还原酶具有较高的热稳定性，可以回收利用，并且反应体系中只需要额外添加少量的辅酶，极大地降低了生产的成本，且反应条件温和，对环境友好，操作简便，在合成药物手性中间体方面具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN105154424A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510626188.5
申请日：2015-09-28
申请人： 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 , 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法。环脂肽脱酰酶溶液不经纯化，直接与多孔亲水性酶载体混合，并加入一种或多种有机溶液和无机盐，得到固定化环脂肽脱酰酶；同时公开了这一方法可用于工业化生产米卡芬净母核和阿尼芬净母核。本发明公开的制备方法工艺简单，不仅节省了酶纯化设备，而且固定化过程中酶活回收率明显提高，固定化酶可多次重复使用。酶法转化米卡芬净和阿尼芬净中间体，相比发酵转化法反应底物浓度高，产物杂质少，转化效率高。
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公开(公告)号：CN103898072A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410067936.6
申请日：2014-02-26
申请人： 杭州师范大学
CPC分类号： C12N9/0006 , C12P7/62 , C12Y101/01184
摘要： 本发明公开了一种酮还原酶突变体及其应用，所述突变体酮还原酶是将SEQ？ID？NO：7所示氨基酸序列的第21位的色氨酸残基突变为谷氨酰胺或丝氨酸，同时将第86位的色氨酸残基突变成谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺或缬氨酸；本发明突变体酮还原酶改变了野生型酮还原酶对酮酯类化合物（如：2-氧代-4-苯基丁酸乙酯或2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯）催化的立体倾向性，生成的主要产物（如：2-羟基-4-苯基丁酸乙酯或2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸乙酯）由（S-）构象变成了（R-）构象，并且对映体过量值（ee值）由76.7%（S-）转变为99.4%（R-）。
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公开(公告)号：CN101457217A
公开(公告)日：2009-06-17
申请号：CN200810163776.X
申请日：2008-12-31
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明提供了一种在高温条件下显示活性的嗜热脂肪酶及其编码基因，同时提供了由重组菌株制备脂肪酶的方法，以及纯化的脂肪酶在苯乙醇的手性拆分的应用。所述嗜热脂肪酶的氨基酸序列与SEQID No.2所示氨基酸序列具有90％以上同源性。本发明的有益效果主要体现在：提供了一种具有立体选择性的嗜热脂肪酶及其编码基因，该脂肪酶对有机溶剂具备良好的耐受性，并具有高选择性，可用于选择性水解外消旋苯乙酯制备光学纯的R－苯乙醇，产率大于45％，e.e.P约为99％。
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公开(公告)号：CN105154424B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201510626188.5
申请日：2015-09-28
申请人： 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 , 杭州师范大学
摘要： 本发明公开了一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法。环脂肽脱酰酶溶液不经纯化，直接与多孔亲水性酶载体混合，并加入一种或多种有机溶液和无机盐，得到固定化环脂肽脱酰酶；同时公开了这一方法可用于工业化生产米卡芬净母核和阿尼芬净母核。本发明公开的制备方法工艺简单，不仅节省了酶纯化设备，而且固定化过程中酶活回收率明显提高，固定化酶可多次重复使用。酶法转化米卡芬净和阿尼芬净中间体，相比发酵转化法反应底物浓度高，产物杂质少，转化效率高。
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公开(公告)号：CN101457217B
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN200810163776.X
申请日：2008-12-31
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明提供了一种在高温条件下显示活性的嗜热脂肪酶及其编码基因，同时提供了由重组菌株制备脂肪酶的方法，以及纯化的脂肪酶在苯乙醇的手性拆分的应用。所述嗜热脂肪酶的氨基酸序列与SEQID No.2所示氨基酸序列具有90％以上同源性。本发明的有益效果主要体现在：提供了一种具有立体选择性的嗜热脂肪酶及其编码基因，该脂肪酶对有机溶剂具备良好的耐受性，并具有高选择性，可用于选择性水解外消旋苯乙酯制备光学纯的R-苯乙醇，产率大于45％，e.e.P约为99％。
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公开(公告)号：CN106834262A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710092983.X
申请日：2017-02-21
申请人： 杭州师范大学
CPC分类号： C12N9/90 , C12P7/6427 , C12Y502/01005
摘要： 本发明公开了一种亚油酸异构酶突变体及其应用，所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的亚油酸异构酶第62位蛋氨酸突变为丙氨酸或甘氨酸，和/或第295位丝氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸或缬氨酸得到。本发明亚油酸异构酶突变体与野生型酶相比，催化亚油酸获得反‑10,顺‑12共轭亚油酸的酶活力得到了大大的提高，特别是双突变时，如M62A/S295L，M62A/S295A，M62A/S295V，M62G/S295L，M62G/S295A，M62G/S295V，能够提高10倍左右，具备良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN103757068B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201410012864.5
申请日：2014-01-10
申请人： 江苏清泉化学股份有限公司 , 杭州师范大学
摘要： 本发明提供一种苯甲酸衍生物的制备方法，包括在包含腈水解酶的酶催化剂作用下，含水反应混合物中的苯甲腈衍生物水解生成所述苯甲酸衍生物。优选所述苯甲腈衍生物选自对氨甲基苯甲腈和对氯甲基苯甲腈。优选本发明所述腈水解酶为GenBank中编号为ABD98457.1的氨基酸序列。本发明可以高效地生产对氨甲基苯甲酸和对氯甲基苯甲酸，而且反应条件温和，对环境友好，操作简便。本发明提供的生物催化生产苯甲酸衍生物的方法具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN103614347B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201310454764.3
申请日：2013-09-27
申请人： 杭州师范大学
摘要： 本发明提供了一种嗜热酮还原酶突变体、编码基因、重组载体及其应用。所述突变体由SEQ ID No.1所示氨基酸序列经点突变得到，所述点突变为：第21位突变为亮氨酸，和/或第118位突变为组氨酸或谷氨酸。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一种嗜热酮还原酶突变体，突变特定位置的氨基酸生成的突变体同野生型酶相比，在热稳定性和催化活性相当的前提下，提高了反应产物的旋光选择性。
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