公开(公告)号：CN117661124A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311638841.0

申请日：2023-11-30

申请人： 武汉大学

发明人： 殷雷 ,  孙再桥 ,  雷骏 ,  何柏晓 ,  陈鹏

IPC分类号： C40B50/08 ,  C40B40/06 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11

摘要： 本发明提供了一种构建RNA文库的方法，所述方法包括：从RNA样品中富集获得mRNA，所述富集过程中将所述mRNA打断成mRNA小片段；采用第一引物对所述mRNA小片段进行逆转录并纯化，获得第一链cDNA；采用第二引物扩增所述第一链cDNA并纯化，获得第二链cDNA；采用第三引物扩增所述二链cDNA，获得RNA文库；该方法能够简化建库的过程并有效降低建库成本，通过两轮带有接头序列的cDNA的合成，同步完成模板的逆转录和双端接头序列的引入，并完成模板的富集，实现了低成本且快速高效的建库。

公开(公告)号：CN116042574A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211589505.7

申请日：2022-12-09

申请人： 武汉大学

发明人： 殷雷 ,  刘欢 ,  周进 ,  陈鹏 ,  王宏健 ,  孙再桥

IPC分类号： C12N9/22 ,  C12N15/63

摘要： 本发明公开了一种新型编辑工具CeCas12a‑A169R‑F843L在基因编辑中的应用，属于生物医学领域。所述CeCas12a‑A169R‑F843L为CeCas12a的突变体，其氨基酸序列如SED IDNO.1所示。本发明首次通过蛋白改造，使变体CeCas12a‑A169R‑F843L的基因编辑效率相比较野生型CeCas12a更高，从而更加有利于基因编辑的应用；所述CeCas12a‑A169R‑F843L能够在crRNA的介导下定点对真核生物基因组进行基因编辑且具有更高的基因编辑效率，CeCas12a‑A169R‑F843L的出现进一步扩充了基因编辑工具箱，对基础科研和临床治疗具有十分重要的作用。