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公开(公告)号：CN116790395B
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202310773671.0
申请日：2023-06-28
Applicant: 江南大学 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
IPC: C12N1/19 , C12N15/52 , C12N15/81 , C12N9/02 , C07K14/805 , C07K14/80 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12P17/18 , C12P21/02 , C12R1/84 , C12R1/85
Abstract: 本发明提供了一种合成高活性血红素类蛋白毕赤酵母底盘菌株的构建及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过增强珠蛋白基因转录以及优化血红素辅基供应，提高了血红素类蛋白的合成能力。使构建的毕赤酵母菌株在摇瓶水平，猪肌红蛋白(P‑Mb)、大豆血红蛋白(S‑Hb)、透明颤菌血红蛋白(V‑Hb)与P450‑BM3mut的滴度分别达到了246.95、286.53、66.30与57.27mg/L，并使生产的血红素类蛋白P‑Mb、S‑Hb、V‑Hb和P450‑BM3mut的功能活性分别提高了38.10％、29.31％、85.24％和7.47倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114874929B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202210656237.X
申请日：2022-06-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成血红素的毕赤酵母重组菌株的构建，属于基因工程技术领域。本发明实现了血红素在毕赤酵母中的高效合成，首先构建得到血红素合成关键酶双截短菌株X33‑pGAPZA‑△ku70‑△70aaHem14‑△70aaHem15‑mScarlet，菌株在最优发酵时间48h2+下，添加终浓度为150mg/LALA和20mg/LFe 发酵培养基中，血红素产量达到0.352mg/L，较对照提高了41.9％，说明将hem14与hem15基因截短后定位于细胞质，可以提高血红素合成下游途径的酶促反应速率，本发明有利于解除血红素合成空间隔离障碍，提高血红素产量，为促进肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等食品加工领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116790395A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310773671.0
申请日：2023-06-28
Applicant: 江南大学 , 泰兴市东圣生物科技有限公司
IPC: C12N1/19 , C12N15/52 , C12N15/81 , C12N9/02 , C07K14/805 , C07K14/80 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12P17/18 , C12P21/02 , C12R1/84 , C12R1/85
Abstract: 本发明提供了一种合成高活性血红素类蛋白毕赤酵母底盘菌株的构建及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过增强珠蛋白基因转录以及优化血红素辅基供应，提高了血红素类蛋白的合成能力。使构建的毕赤酵母菌株在摇瓶水平，猪肌红蛋白(P‑Mb)、大豆血红蛋白(S‑Hb)、透明颤菌血红蛋白(V‑Hb)与P450‑BM3mut的滴度分别达到了246.95、286.53、66.30与57.27mg/L，并使生产的血红素类蛋白P‑Mb、S‑Hb、V‑Hb和P450‑BM3mut的功能活性分别提高了38.10％、29.31％、85.24％和7.47倍。
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公开(公告)号：CN114874929A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210656237.X
申请日：2022-06-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成血红素的毕赤酵母重组菌株的构建，属于基因工程技术领域。本发明实现了血红素在毕赤酵母中的高效合成，首先构建得到血红素合成关键酶双截短菌株X33‑pGAPZA‑△ku70‑△70aaHem14‑△70aaHem15‑mScarlet，菌株在最优发酵时间48h下，添加终浓度为150mg/LALA和20mg/LFe2+发酵培养基中，血红素产量达到0.352mg/L，较对照提高了41.9％，说明将hem14与hem15基因截短后定位于细胞质，可以提高血红素合成下游途径的酶促反应速率，本发明有利于解除血红素合成空间隔离障碍，提高血红素产量，为促进肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等食品加工领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113136349B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202110607028.1
申请日：2021-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达不同来源肌红蛋白/血红蛋白毕赤酵母重组菌株的构建，属于基因工程技术领域。本发明首先实现了不同动植物来源的肌红蛋白/血红蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达，构建得到表达猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、三叶草血红蛋白、大豆血红蛋白以及猪血红蛋白β单亚基的重组菌，在摇瓶条件下产量分别达到42.0mg/L、20.0mg/L、5.0mg/L、100.0mg/L与1.0mg/L；并进一步优化猪肌红蛋白在毕赤酵母中的分泌表达体系，最终构建得到的重组菌株X33‑△ku70‑△yps1‑1‑MB菌株48h摇瓶发酵产量达到69.0mg/L，较对照提高了59.4％。本发明有利于不同来源肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等在食品加工领域的应用及进一步发展。
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公开(公告)号：CN113136349A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202110607028.1
申请日：2021-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达不同来源肌红蛋白/血红蛋白毕赤酵母重组菌株的构建，属于基因工程技术领域。本发明首先实现了不同动植物来源的肌红蛋白/血红蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达，构建得到表达猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、三叶草血红蛋白、大豆血红蛋白以及猪血红蛋白β单亚基的重组菌，在摇瓶条件下产量分别达到42.0mg/L、20.0mg/L、5.0mg/L、100.0mg/L与1.0mg/L；并进一步优化猪肌红蛋白在毕赤酵母中的分泌表达体系，最终构建得到的重组菌株X33‑△ku70‑△yps1‑1‑MB菌株48h摇瓶发酵产量达到69.0mg/L，较对照提高了59.4％。本发明有利于不同来源肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等在食品加工领域的应用及进一步发展。
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