公开(公告)号：CN116926041A

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202310946829.X

申请日：2023-07-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘展志 ,  吴敬 ,  刘一迪

IPC: C12N9/18 ,  C12N1/21 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  B09B3/60 ,  C12R1/19 ,  B09B101/75

Abstract: 本发明公开了PET聚酯塑料解聚酶突变体及其应用，属于分子生物学与酶工程领域。本发明结对Ideonella sakaiensis来源的PET解聚酶进行了突变和高通量筛选，获得了催化能力提高的PET解聚酶突变体，使突变体对底物的水解效率较突变前具有显著提升，以对硝基苯酚丁酸酯底物的水解活力可达野生型的1.72倍，产物释放速率较野生型提升2.4倍；以高结晶度商业化PET塑料为底物的产物释放速率达野生型的1.8倍。本发明构建的PET解聚酶突变体在PET塑料的处理能力上展现出了显著的优势，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN117904075A

公开(公告)日：2024-04-19

申请号：CN202211272144.3

申请日：2022-10-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  刘展志 ,  刘一迪

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C08J11/10 ,  C08L67/02 ,  B09B3/60 ,  C12R1/19 ,  B09B101/75

Abstract: 本发明公开了一种聚对苯二甲酸乙二醇酯聚酯水解酶突变体及其应用，属于生物技术领域。为了解决聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)聚酯水解酶主要水解产物(TPA和MHET)检测手段匮乏，现有检测手段费时费力的问题，本发明公开了一种筛选PET塑料水解酶的方法。随后以DuraPETase‑4M作为起始突变体进行筛选。结果显示，在PET塑料水解酶反应过程中随着水解产物的积累，pH值随之显著下降，添加终浓度10μM的pH敏感荧光探针可将水解产物浓度与荧光强度形成偶联。筛选得到的A89S/R90T突变体的蛋白表达量为突变前的1.5倍，A89P/R90P/S92K突变体PET水解能力为突变前的1.3倍。使用pH敏感荧光探针作为筛选标记，简化了PET聚酯塑料水解过程中产物的检测流程，使检测过程快速且高效。

公开(公告)号：CN117174182A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202311078324.2

申请日：2023-08-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  王蕾 ,  未志胜 ,  陈晟 ,  邓赵红 ,  孔德民 ,  杨卫康 ,  刘一迪 ,  杨海涛

IPC: G16B50/00 ,  G16B50/10 ,  G16B30/10 ,  G06F16/22 ,  G06F16/2458

Abstract: 本发明公开了一种兼顾基因序列进化重排的序列搜索工具CircBLAST的应用方法，属于生物信息学技术领域。方法流程包括：首先，根据需要word_size的长度切分所有的蛋白序列，结合序列的注释数据构建数据集并写入数据库；然后准备请求序列，并将其切分成word_size的一个个小片段；进一步，通过搜索匹配、构建环形序列、序列比对完成检索过程；最后生成包含匹配片段、相似度得分等信息的比对结果，用于呈现给用户查看并判断匹配的可靠性。本发明考虑了基因序列的进化重排情况，显著提高了序列比对的准确性，并且可以发现更多的重排序列。