公开(公告)号：CN117264917A

公开(公告)日：2023-12-22

申请号：CN202311135974.6

申请日：2023-09-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  王玥 ,  乔郅钠 ,  杨菲 ,  徐美娟 ,  杨套伟

IPC: C12N9/06 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P11/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种利用微生物高效制备酮蛋氨酸的方法，属于分子生物技术与酶工程技术领域。本发明的改造方法通过phLAAD的蛋白质改造，通过分析phLAAD产物结合位点周围柔性Loop环结构，突变得到酶活提高至0.564±0.009U/mL，摇瓶发酵α‑酮蛋氨酸产量达到71.08±2.67g/L的突变体I60V/K104R/E243A/A337S，克服了之前野生型酶催化效率低的问题证。本发明对转化体系的催化剂浓度、缓冲液种类、pH和温度行了优化，实现了发酵48h时酮蛋氨酸的产量达到93.15g/L，转化率>90％。本发明的方法可以大大降低成本，加快了酶转化法生产酮蛋氨酸的工业化进程。