-
公开(公告)号：CN105112437A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510529068.3
申请日：2015-08-25
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
摘要： 通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19，将来源于Bacillus cereus的精氨酸酶成功在精氨酸高产菌株C.crenatum SDNN403中表达。酶活测定结果表明，原始菌不具有精氨酸酶的活性，而重组工程菌的精氨酸酶酶活达到24.3U/mg。基于此工程菌株具有高产精氨酸和精氨酸酶的特性，研究了其以葡萄糖为底物，采用一步发酵法生产L-鸟氨酸。采用了发酵过程双阶段pH调控的策略，重组菌在第一阶段的在96h发酵过程中，共积累25.05g/L的L-精氨酸和9.86g/L的L-鸟氨酸。经过第二个阶段的发酵后，最终在108h内，共积累27.91g/L的L-鸟氨酸，而精氨酸的含量仅为0.95g/L。本发明方法生产L-鸟氨酸具有效率高，L-精氨酸和其他杂酸余量低，对于后期产物L-鸟氨酸的分离纯化更加容易。
-
公开(公告)号：CN105062997A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510526470.6
申请日：2015-08-25
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
摘要： 本发明公开了一种酶活提高的L-天冬酰胺酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的氨基酸的基础上，将第107位甘氨酸突变成天冬氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达，摇瓶发酵24h后酶活为961U/mL，突变酶活提高了80％，底物亲和力较原始酶降低50％，催化效率提高84％，同时比酶活提高83％。本发明表明107位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。
-
公开(公告)号：CN105062941A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510526416.1
申请日：2015-08-25
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
摘要： 本发明公开了一种利用重组枯草芽孢杆菌全细胞转化生产L-鸟氨酸的方法，属于生物工程和生物技术领域。本发明将来源于Bacillus cereus的精氨酸酶成功在Bacillus subtilis 168中表达。酶活测定结果表明，重组工程菌的精氨酸酶酶活比原始菌提高了近27倍。以此工程菌作为生物催化剂，以L-精氨酸作为底物，进行转化法生产L-鸟氨酸，采用分批补加底物L-精氨酸的方法在5-L发酵中进行转化法生产L-鸟氨酸。12h后可以得到378.9g/L的L-鸟氨酸，底物L-精氨酸的摩尔转化率达到99.9％。本发明方法生产L-鸟氨酸具有效率高，专一性强，能耗低等优点。
-
公开(公告)号：CN105154456B
公开(公告)日：2018-05-01
申请号：CN201510524310.8
申请日：2015-08-24
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所
摘要： 2,3‑丁二醇的合成最后一步是乙偶姻还原酶催化还原乙偶姻合成2,3‑丁二醇，此反应需要还原型辅酶NADH的参与，因此，胞内辅酶NADH水平的高低是影响乙偶姻向2,3‑丁二醇转化程度的一个重要因素。为进一步提高该菌株2,3‑丁二醇合成能力，并减少副产物乙偶姻的积累，发明人将HpaII‑fdh片段插入到基因nox内部，获得片段nox::HpaII‑fdh，并将该片段导入解淀粉芽孢杆菌B10‑127中，通过同源重组原理获得染色体组上基因nox内部被fdh基因插入的重组解淀粉芽孢杆菌(重新命名为N△F)。并对原始菌及重组菌N△F进行2,3‑丁二醇发酵性能检测，结果表明，与原始菌株相比，重组菌2,3‑丁二醇产量提高了18.9％，副产物乙偶姻产量降低70.8％。说明该策略能够提高2,3‑丁二醇产量，降低副产物乙偶姻的积累。
-
公开(公告)号：CN105154456A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510524310.8
申请日：2015-08-24
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
摘要： 2,3-丁二醇的合成最后一步是乙偶姻还原酶催化还原乙偶姻合成2,3-丁二醇，此反应需要还原型辅酶NADH的参与，因此，胞内辅酶NADH水平的高低是影响乙偶姻向2,3-丁二醇转化程度的一个重要因素。为进一步提高该菌株2,3-丁二醇合成能力，并减少副产物乙偶姻的积累，发明人将HpaII-fdh片段插入到基因nox内部，获得片段nox::HpaII-fdh，并将该片段导入解淀粉芽孢杆菌B10-127中，通过同源重组原理获得染色体组上基因nox内部被fdh基因插入的重组解淀粉芽孢杆菌(重新命名为N△F)。并对原始菌及重组菌N△F进行2,3-丁二醇发酵性能检测，结果表明，与原始菌株相比，重组菌2,3-丁二醇产量提高了18.9％，副产物乙偶姻产量降低70.8％。说明该策略能够提高2,3-丁二醇产量，降低副产物乙偶姻的积累。
-
公开(公告)号：CN105087628A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510526225.5
申请日：2015-08-25
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
摘要： 通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19，将来源于Bacillus cereus的精氨酸酶成功在C.crenatum SDNN403中表达。酶活测定结果表明，原始菌不具有精氨酸酶的活性，而重组工程菌的精氨酸酶酶活达到24.3U/mg。以此工程菌全细胞菌体作为生物催化剂，以L-精氨酸作为底物，同时基于精氨酸酶酶学性质，确定了最佳的反应温度为40℃和pH为9.0。将200ml LBG培养的重组菌菌体重新悬浮于200ml的底物缓冲液中，在最佳的转化条件下进行转化法生产L-鸟氨酸。8h后可以得到149.2g/L的L-鸟氨酸，底物L-精氨酸的摩尔转化率达到99.5％。本发明方法生产L-鸟氨酸具有效率高，专一性强，能耗低等优点。
-
公开(公告)号：CN105176941A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510522272.2
申请日：2015-08-24
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
CPC分类号： C12N9/0006
摘要： 一种来源于钝齿棒杆菌中的2,3-丁二醇脱氢酶(乙偶姻还原酶)的鉴定，属于基因工程和酶工程领域。本发明提供了一种2,3-丁二醇脱氢酶，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1，本发明通过表达载体pET-28a(+)，实现2,3-丁二醇脱氢酶基因在大肠杆菌E.coli BL21中进行表达，结果表明重组大肠杆菌中2,3-丁二醇脱氢酶还原方向的比酶活为0.44U/mg，氧化方向的比酶活为0.07U/mg。
-
公开(公告)号：CN105062998A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510528335.5
申请日：2015-08-25
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
CPC分类号： C12N9/82 , C12Y305/01001
摘要： 本发明公开了一种酶活提高的L-天冬酰胺酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的氨基酸的基础上，将第166位丝氨酸突变成丙氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达，摇瓶发酵24h后酶活为657.1U/mL，突变酶活提高了23％，底物亲和力较原始酶降低20％，催化效率提高8.4％，同时比酶活提高25％。本发明表明166位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。
-
公开(公告)号：CN105177034A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510522274.1
申请日：2015-08-24
申请人： 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
摘要： 本发明从Bacillus subtilis CTCC M2009200中克隆出参与2,3-丁二醇合成途径中辅酶循环再生的关键酶基因甘油脱氢酶(gdh)和乙偶姻还原酶(acr)以及调控2,3-丁二醇支路关键酶酶活的调控因子aslR，并将该基因与穿梭表达质粒pMA5-HpaII连接，成功构建了携带基因gdh,acr和aslR基因的穿梭表达质粒pMA5-HpaII-acr-HapII-gdh-PbdhA-alsR，并转入Bacillus subtilis CTCC M2009200中，获得加强gdh,acr和alsR基因表达的重组枯草芽孢杆菌(命名为GAR)。对原始菌以及重组菌GAR进行利用甘油发酵生产2,3-丁二醇实验，结果表明，与原始菌株相比，重组菌2,3-丁二醇产量提高了17.2％，副产物如乙偶姻、乳酸和丁二酸的积累分别降低69.2％、45.2％和47.4％，且发酵周期有所缩短。通过补料流加甘油，发酵48h，发酵液中2,3-丁二醇积累量达到102.6g/L，这是现有技术所不能达到的结果。
-
公开(公告)号：CN118086268A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410140885.9
申请日：2024-02-01
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一步法高效催化乳糖生产塔格糖工程菌株的构建及其应用，属于基因工程技术和合成生物学领域。本发明提供的谷氨酸棒杆菌含催化乳糖生成葡萄糖和D‑半乳糖的β‑半乳糖苷酶和催化D‑半乳糖生成D‑塔格糖的阿拉伯糖异构酶的最优突变体。以本发明提供的重组谷氨酸棒杆菌全细胞作为催化剂，在5L发酵罐水平优化发酵及转化条件，以15mM CaCl2作为反应液，添加0.5mM Mn2+，投加500g/L乳糖，48h后可得到110g/L的D‑塔格糖，转化率达到22％，全程无需控制pH，为D‑塔格糖的工业化生产提供了一种安全高效且经济的方法。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
402 条记录 (耗时 0.026 秒)
