公开(公告)号：CN118028202A

公开(公告)日：2024-05-14

申请号：CN202410169332.6

申请日：2024-02-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 沐万孟 ,  朱莺莺 ,  陶梦婷 ,  杨龙浩

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12N15/56 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高效合成乳酰‑N‑二糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。公开了一种新的、更简单的微生物合成乳酰‑N‑二糖的策略，通过引入双歧杆菌LnbB基因，对产生LNT的大肠杆菌BL21(DE3)基因工程菌株进行改造，构建高产乳酰‑N‑二糖的工程菌株。乳酰‑N‑二糖产生的同时伴随着乳糖的再生，对乳酰‑N‑三糖II和乳酰‑N‑四糖合成相关的关键途径基因进行基因组整合，以提高乳酰‑N‑二糖的产量。最终的工程菌株通过摇瓶和补料分批培养分别产生3.54和26.88g/L的乳酰‑N‑二糖，具有良好的产业化前景。

公开(公告)号：CN120060103A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510222455.6

申请日：2025-02-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 朱莺莺 ,  陈静 ,  杨龙浩 ,  赵春华 ,  张文立 ,  沐万孟

IPC: C12N1/21 ,  C12N9/38 ,  C12N9/12 ,  C12N9/90 ,  C12N9/78 ,  C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/56 ,  C12N15/61 ,  C12N15/31 ,  C12N15/113 ,  C07K14/245 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种提高乳酰‑N‑四糖产量的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明利用转录组技术筛选的3个基因tauB、nikD和livM被证明能够促进LNT和LNTri II的产生。以工程菌株MG‑LNT‑09为出发菌株，通过单独质粒过表达来源于大肠杆菌K‑12衍生菌MG1655的内源性转运基因tauB、nikD、livM，LNT和LNTri II的生物合成效率显著提高，摇瓶培养中LNT的产量高达7.77g/L，LNTri II的产量高达3.03g/L。不使用任何抗生素或质粒，将tauB基因整合到hlyE位点的优化菌株MG3WB在5L生物反应器中获得了最大LNT滴度40.35g/L，具有良好的产业化前景，为进一步工业化生产与合成其他复杂母乳寡糖奠定了基础。

公开(公告)号：CN118028129A

公开(公告)日：2024-05-14

申请号：CN202410213996.8

申请日：2024-02-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 沐万孟 ,  朱莺莺 ,  陶梦婷 ,  杨龙浩

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/56 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种合成乳酰‑N‑新四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明以工程菌株MGC02为出发菌株，通过引入β‑1,3‑N‑乙酰葡糖胺基转移酶LgtA和β‑1,4‑半乳糖基转移酶CpsIaJ，使用各种启动子优化酶表达水平，提高前体供应，引入lux型群体感应系统并优化QS启动子，最后，LNnT的细胞外滴度为20.33g/L，生产力为0.41g/L/h，具有良好的产业化前景。