公开(公告)号：CN113881648A

公开(公告)日：2022-01-04

申请号：CN202111219980.0

申请日：2021-10-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 班宵逢 ,  范文娟 ,  李兆丰 ,  李才明 ,  顾正彪 ,  程力 ,  洪雁

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/04 ,  C12P19/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种提高淀粉分支酶催化活力的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过将淀粉分支酶中的氨基酸残基突变为与内源性氨基酸残基带相反电荷的氨基酸残基，与附近内源性、带相反电荷的氨基酸残基形成盐桥，得到催化活力提高的淀粉分支酶突变体。本发明所得的淀粉分支酶突变体L25R的比酶活比野生型淀粉分支酶提高了约1.28倍；淀粉分支酶突变体L25A的比酶活比野生型淀粉分支酶提高了约1.23倍。

公开(公告)号：CN114181919B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202210019805.5

申请日：2022-01-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李兆丰 ,  范文娟 ,  班宵逢 ,  顾正彪 ,  李才明 ,  程力 ,  洪雁

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种提高淀粉分支酶热稳定性的方法，属于酶工程技术领域。为了得到一种较高温度下保持较高的活力，及在高盐、高温条件下保持较高活力的淀粉分支酶，本发明提供了一种淀粉分支酶突变体，所述淀粉分支酶突变体是将来源于热葡糖苷酶地衣芽孢杆菌的淀粉分支酶的第137位或第123位的氨基酸进行突变得到的。与野生型淀粉分支酶相比，本发明所得的淀粉分支酶突变体K137E在60℃的半衰期比野生型提高了71％。在高盐条件下，本发明所得的淀粉分支酶突变体D123E和D123R在55℃时保温120min分别保持80％和65％左右的活力，在60℃下的半衰期分别延长了接近3.3和2.1倍。

公开(公告)号：CN114181919A

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202210019805.5

申请日：2022-01-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李兆丰 ,  范文娟 ,  班宵逢 ,  顾正彪 ,  李才明 ,  程力 ,  洪雁

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种提高淀粉分支酶热稳定性的方法，属于酶工程技术领域。为了得到一种较高温度下保持较高的活力，及在高盐、高温条件下保持较高活力的淀粉分支酶，本发明提供了一种淀粉分支酶突变体，所述淀粉分支酶突变体是将来源于热葡糖苷酶地衣芽孢杆菌的淀粉分支酶的第137位或第123位的氨基酸进行突变得到的。与野生型淀粉分支酶相比，本发明所得的淀粉分支酶突变体K137E在60℃的半衰期比野生型提高了71％。在高盐条件下，本发明所得的淀粉分支酶突变体D123E和D123R在55℃时保温120min分别保持80％和65％左右的活力，在60℃下的半衰期分别延长了接近3.3和2.1倍。

公开(公告)号：CN113881648B

公开(公告)日：2022-12-13

申请号：CN202111219980.0

申请日：2021-10-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 班宵逢 ,  范文娟 ,  李兆丰 ,  李才明 ,  顾正彪 ,  程力 ,  洪雁

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/04 ,  C12P19/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种提高淀粉分支酶催化活力的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过将淀粉分支酶中的氨基酸残基突变为与内源性氨基酸残基带相反电荷的氨基酸残基，与附近内源性、带相反电荷的氨基酸残基形成盐桥，得到催化活力提高的淀粉分支酶突变体。本发明所得的淀粉分支酶突变体L25R的比酶活比野生型淀粉分支酶提高了约1.28倍；淀粉分支酶突变体L25A的比酶活比野生型淀粉分支酶提高了约1.23倍。