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公开(公告)号：CN111621455B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202010350864.1
申请日：2020-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种表达天冬酰胺合成酶的重组枯草芽孢杆菌。本发明以表达载体为pMA5，枯草芽孢杆菌WB600(Bacillus subtilis WB600)为宿主，异源表达了来源于唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)的天冬酰胺合成酶，LsaAS‑A的比酶活达到6.585U/mg。以该酶或者可以表达该酶的全细胞作为催化剂，可以将L‑天冬氨酸转化为L‑天冬酰胺，相比于化学法及植物提取法生产过程副反应少，生产过程易控制，能够有效减少成本，污染小，具有很高的应用前景。
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公开(公告)号：CN111850065B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202010746696.8
申请日：2020-07-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种辅助全细胞转化合成L‑天冬酰胺的方法，本发明利用Ⅲ类多聚磷酸激酶2构建了单酶转化AMP再生ATP的系统，并将其应用于L‑天冬酰胺的生物合成。将来自Deinococcus ficus的Ⅲ类PPK2在Escherichia coli Rosetta(DE3)中表达，酶活力为13.19U·mL‑1。以E.coli Rosetta(DE3)/pET21a‑DfiPPK2‑Ⅲ和B.subtilis WB600/pMA5‑LsaAS‑A全细胞为催化剂催化L‑Asp合成L‑Asn并优化反应条件。结果显示两种重组菌湿细胞在最优反应条件下，并通过两次补料终浓度为60mmol·L‑1的六偏磷酸钠，L‑Asn的得率到达90.15％，比直接添加180mmol·L‑1的六偏磷酸钠高80％。
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公开(公告)号：CN111850065A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010746696.8
申请日：2020-07-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种辅助全细胞转化合成L-天冬酰胺的方法，本发明利用Ⅲ类多聚磷酸激酶2构建了单酶转化AMP再生ATP的系统，并将其应用于L-天冬酰胺的生物合成。将来自Deinococcus ficus的Ⅲ类PPK2在Escherichia coli Rosetta(DE3)中表达，酶活力为13.19U·mL-1。以E.coli Rosetta(DE3)/pET21a-DfiPPK2-Ⅲ和B.subtilis WB600/pMA5-LsaAS-A全细胞为催化剂催化L-Asp合成L-Asn并优化反应条件。结果显示两种重组菌湿细胞在最优反应条件下，并通过两次补料终浓度为60mmol·L-1的六偏磷酸钠，L-Asn的得率到达90.15％，比直接添加180mmol·L-1的六偏磷酸钠高80％。
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公开(公告)号：CN111621455A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010350864.1
申请日：2020-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种表达天冬酰胺合成酶的重组枯草芽孢杆菌。本发明以表达载体为pMA5，枯草芽孢杆菌WB600(Bacillus subtilis WB600)为宿主，异源表达了来源于唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)的天冬酰胺合成酶，LsaAS-A的比酶活达到6.585U/mg。以该酶或者可以表达该酶的全细胞作为催化剂，可以将L-天冬氨酸转化为L-天冬酰胺，相比于化学法及植物提取法生产过程副反应少，生产过程易控制，能够有效减少成本，污染小，具有很高的应用前景。
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