公开(公告)号：CN102337233B

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201110116234.9

申请日：2011-05-06

申请人： 江南大学 ,  江西省德兴市百勤异VC钠有限公司

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  朱小燕 ,  龚劲松 ,  陆震鸣 ,  孙文敬 ,  周强

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P17/12 ,  C12R1/40

摘要： 公开了一株新菌株恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonasputida)及应用该菌株催化生产烟酸、异烟酸的方法。本发明以3-氰基吡啶、4-氰基吡啶为原料，以发酵培养获得的具有高腈水解酶活性的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonasputida)为催化剂进行水解反应，得到产物烟酸、异烟酸。采用流加的方式加入底物于反应器中,反应6-10h，可得到147g/L-221g/L的烟酸或异烟酸。恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonasputida)具有生长周期短、生命力强、转化效率高、转化周期短等特点，能大大降低了烟酸、异烟酸的生产成本；本工艺具有反应条件温和、能耗低、产率高、环境友好等特点。

公开(公告)号：CN102936590B

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201210433096.1

申请日：2012-11-05

申请人： 江南大学 ,  江西省德兴市百勤异VC钠有限公司

发明人： 许正宏 ,  朱小燕 ,  李恒 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  钱建瑛 ,  孙文敬 ,  周强

IPC分类号： C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12R1/40

摘要： 本发明涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）XY4（编号CGMCC 3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQIDNO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQIDNO:2。本发明还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coli Rosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN102492750B

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201110438755.6

申请日：2011-12-26

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  吴燕 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  李恒 ,  李会 ,  陆震鸣 ,  朱小燕

IPC分类号： C12P17/12 ,  C12R1/645

摘要： 本发明属生物技术领域，具体涉及利用赤霉菌(Gibberella intermedia)CA3-1转化3-氰基吡啶为烟酸的方法，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC No.4903。该菌株能在底物浓度为5.2g/L(50mM)的条件下转化3-氰基吡啶为烟酸，底物转化率高达98％；在最适反应温度30℃条件下，半衰期长达231.1h；菌株CA3-1的腈水解酶有广域的底物谱，能转化多种单腈和双腈类化合物。

公开(公告)号：CN102936590A

公开(公告)日：2013-02-20

申请号：CN201210433096.1

申请日：2012-11-05

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  朱小燕 ,  李恒 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  钱建瑛

IPC分类号： C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12R1/40

摘要： 本发明涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）XY4（编号CGMCC No.3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQ ID NO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQ ID NO:2。本发明还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coliRosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN102492750A

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201110438755.6

申请日：2011-12-26

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  吴燕 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  李恒 ,  李会 ,  陆震鸣 ,  朱小燕

IPC分类号： C12P17/12 ,  C12R1/645

摘要： 本发明属生物技术领域，具体涉及利用赤霉菌(Gibberella intermedia)CA3-1转化3-氰基吡啶为烟酸的方法，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC No.4903。该菌株能在底物浓度为5.2g/L(50mM)的条件下转化3-氰基吡啶为烟酸，底物转化率高达98％；在最适反应温度30℃条件下，半衰期长达231.1h；菌株CA3-1的腈水解酶有广域的底物谱，能转化多种单腈和双腈类化合物。

公开(公告)号：CN102337233A

公开(公告)日：2012-02-01

申请号：CN201110116234.9

申请日：2011-05-06

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  朱小燕 ,  龚劲松 ,  陆震鸣

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P17/12 ,  C12R1/40

摘要： 公开了一株新菌株恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)及应用该菌株催化生产烟酸、异烟酸的方法。本发明以3-氰基吡啶、4-氰基吡啶为原料，以发酵培养获得的具有高腈水解酶活性的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)为催化剂进行水解反应，得到产物烟酸、异烟酸。采用流加的方式加入底物于反应器中，反应6-10h，可得到147g/L-221g/L的烟酸或异烟酸。恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonas putida)具有生长周期短、生命力强、转化效率高、转化周期短等特点，能大大降低了烟酸、异烟酸的生产成本；本工艺具有反应条件温和、能耗低、产率高、环境友好等特点。