一种表达人源乙醛脱氢酶基因的基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN107815458B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201711261238.X

    申请日:2017-12-04

    摘要: 本发明公开了一种表达人源乙醛脱氢酶基因的基因工程菌及其应用,属于基因工程和酶技术领域。本发明的ALDH2基因高效表达组件Trp1L‑URA3‑TPIp‑ALDH2‑TPIt‑Trp1R是整合到了酿酒酵母W303‑1A的基因组上,与游离质粒表达相比,提高了基因表达的稳定性,并且采用的组成型启动子,在发酵过程中没有诱导剂的加入,产物相对来说比较安全。在发酵96h时,产乙醛脱氢酶的比活达到0.97U/mg。在250mg/100mL浓度的乙醇中,产乙醛脱氢酶的比酶活达到6.256U/mg,在pH 3缓冲液中,产乙醛脱氢酶的比活达到0.301U/mg。本发明选用酿酒酵母作为宿主菌,一方面保持了酶的活性,另一方面提高了产品的安全性,为解酒药的研发提供了一条新的途径和理论基础。

    一株产人胃乙醇脱氢酶的工程菌及其酶的制备方法

    公开(公告)号:CN106544312B

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201610980083.4

    申请日:2016-11-08

    摘要: 本发明公开了一株产人胃乙醇脱氢酶的工程菌及其酶的制备方法,属于生物技术领域。本发明根据GeneBank中人胃乙醇脱氢酶δδ‑ADH的基因序列合成目的基因,将其与表达载体pET‑32a(+)连接并转化E.coli BL21(DE3)。E.coli BL21(DE3)经异丙基硫化‑β‑D‑半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,目的蛋白以包涵体形式存在。收集并破碎菌体后离心,取沉淀获得包涵体,用低浓度尿素溶液或其缓冲液溶解包涵体获得有活性的δδ‑ADH粗酶液。经HisTrapTM excel亲和层析柱纯化获得目的蛋白,活性在2.085U/mg以上。本发明提供的工程菌所产生的δδ‑ADH可氧化高浓度的乙醇,其在大肠杆菌中以包涵体形式存在;有活性的δδ‑ADH粗酶液只需经包涵体溶解液溶解即可获得,不需要复性操作,可节约成本、简化操作步骤,提高效率。

    一种表达人源乙醛脱氢酶基因的基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN107815458A

    公开(公告)日:2018-03-20

    申请号:CN201711261238.X

    申请日:2017-12-04

    摘要: 本发明公开了一种表达人源乙醛脱氢酶基因的基因工程菌及其应用,属于基因工程和酶技术领域。本发明的ALDH2基因高效表达组件Trp1L-URA3-TPIp-ALDH2-TPIt-Trp1R是整合到了酿酒酵母W303-1A的基因组上,与游离质粒表达相比,提高了基因表达的稳定性,并且采用的组成型启动子,在发酵过程中没有诱导剂的加入,产物相对来说比较安全。在发酵96h时,产乙醛脱氢酶的比活达到0.97U/mg。在250mg/100mL浓度的乙醇中,产乙醛脱氢酶的比酶活达到6.256U/mg,在pH 3缓冲液中,产乙醛脱氢酶的比活达到0.301U/mg。本发明选用酿酒酵母作为宿主菌,一方面保持了酶的活性,另一方面提高了产品的安全性,为解酒药的研发提供了一条新的途径和理论基础。

    一种橘皮红啤酒的制备方法

    公开(公告)号:CN107881048A

    公开(公告)日:2018-04-06

    申请号:CN201711367854.3

    申请日:2017-12-18

    IPC分类号: C12C12/00 C12C5/00

    CPC分类号: C12C12/00 C12C5/00

    摘要: 本发明公开了一种橘皮红啤酒的制备方法,属于红啤酒酿造技术领域。本发明以大麦麦芽、酒花、鲜橘皮或陈皮、红曲米为主要原料,经发酵而得。本发明提供的橘皮红啤酒的制备工艺是:大麦麦芽经过糖化、加入酒花煮沸,再加入啤酒上面酵母进行主发酵,而后经过后发酵制得成品,红曲米和鲜橘皮(陈皮)在糖化或煮沸时加入。所得橘皮红啤酒气味浓郁,具有全麦啤酒特有香气和橘子香气;亦具有红啤酒的典型特征,色泽鲜红清亮,泡沫丰富细腻;营养丰富,具有促进肠胃蠕动、促进消化液分泌、抗氧化之功效。