公开(公告)号：CN117659157A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311815760.3

申请日：2023-12-27

申请人： 江苏华控生物科技有限公司

发明人： 许行尚 ,  杰弗瑞·陈 ,  朱道云 ,  王鹏

IPC分类号： C07K14/47 ,  C07K1/22 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  G01N33/82 ,  G01N33/68 ,  G01N33/543 ,  G01N21/76

摘要： 本发明涉及一种人胃内因子蛋白的表达方法及应用，表达方法步骤为：S1：选用上游引物和下游引物，以已保存有IF基因片段的T载体重组质粒为模板，通过PCR反应扩增IF目的基因；S2：将IF基因片段克隆到表达载体pCDNA3.1(+)上，构建IF基因的表达载体pCDNA3.1(+)‑IF；S3：将表达载体pCDNA3.1(+)‑IF转染至HEK293细胞株：用去内毒素试剂盒抽提质粒，将表达载体pCDNA3.1(+)‑IF线性化后转染至HEK293细胞中；再筛选出单克隆扩大培养；S4确验证并确定重组表达IF蛋白是否成功表达，再纯化表达成功的重组表达IF蛋白并测试蛋白活性。获得的重组IF蛋白的活性高。

公开(公告)号：CN115925837A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202211734034.4

申请日：2022-12-30

申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 ,  江苏华控生物科技有限公司

发明人： 许行尚 ,  杰弗瑞·陈 ,  王鹏

IPC分类号： C07K14/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22 ,  C07K1/36

摘要： 本发明公开了一种该SA重组蛋白的纯化方法，具体包括以下步骤：S1：采用纯水将SA重组蛋白粗品进行稀释，获得SA稀释样品；S2：使用透析袋装入步骤S1的SA稀释样品，放入纯水中进行透析，获得透析后的样品；S3：在步骤S2中透析后的样品中加入碳酸钠和氯化钠，搅拌溶解；S4：使用层析填料进行亲和纯化，获得洗脱产物；S5：将步骤S4获得的洗脱产物进行透析，并保存。