一种热稳定型阿拉伯呋喃糖苷酶及其应用

    公开(公告)号:CN109402089B

    公开(公告)日:2021-10-12

    申请号:CN201811311227.2

    申请日:2018-11-06

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,本发明涉及一种热稳定型阿拉伯呋喃糖苷酶及其应用;本发明涉及的阿拉伯呋喃糖苷酶Abf51最适反应条件为60℃ pH6.5,可高效地水解C2与C3位置的单取代阿拉伯糖残基,同时也对双取代阿拉伯糖残基表现出一定的水解能力;Abf51对阿拉伯木寡糖侧链阿拉伯糖残基的水解度可达97%以上;Abf51热稳定性强,在最适反应温度下;保温2天残余活力仍高达90%,保温6天残余活力仍可达68%;Abf51对产物阿拉伯糖也表现出相当的耐受性,IC50大约为200mM;这些优良特性表明Abf51作为一种新型的酶制剂具有良好的应用潜力与价值。

    一种协同降解发酵玉米秸秆转化成高品质生物饲料原料的方法

    公开(公告)号:CN111909954A

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN202010668698.X

    申请日:2020-07-13

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明属于生物饲料领域,涉及一种协同降解发酵玉米秸秆转化成高品质生物饲料原料的方法;首先将来源于Irpex lacteus的锰过氧化物酶基因序列进行偏爱性优化,以优化的基因为模板进行PCR扩增,与pREP连接后转化到大肠杆菌感受态细胞中,获得重组穿梭质粒并导入缺陷型粟酒裂殖酵母感受态细胞中,得到重组锰过氧化物酶酵母工程菌;然后与粗糙脉胞菌、重组S.pombe-man和产阮假丝酵母混合,添加氮源、氯化钙、硫酸锰、漆酶、葡萄糖氧化酶和小分子物质激活剂进行菌酶协同混菌发酵玉米秸秆;本发明合理利用农业废弃物,能够有效促进秸秆中木质纤维素的转化,在短时间内显著提高发酵饲料的品质,获得高品质生物饲料。

    一种热稳定型阿拉伯呋喃糖苷酶及其应用

    公开(公告)号:CN109402089A

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201811311227.2

    申请日:2018-11-06

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,本发明涉及一种热稳定型阿拉伯呋喃糖苷酶及其应用;本发明涉及的阿拉伯呋喃糖苷酶Abf51最适反应条件为60℃ pH6.5,可高效地水解C2与C3位置的单取代阿拉伯糖残基,同时也对双取代阿拉伯糖残基表现出一定的水解能力;Abf51对阿拉伯木寡糖侧链阿拉伯糖残基的水解度可达97%以上;Abf51热稳定性强,在最适反应温度下;保温2天残余活力仍高达90%,保温6天残余活力仍可达68%;Abf51对产物阿拉伯糖也表现出相当的耐受性,IC50大约为200mM;这些优良特性表明Abf51作为一种新型的酶制剂具有良好的应用潜力与价值。

    纤维酶体基因的改建方法及获得的新型纤维素酶

    公开(公告)号:CN103923933A

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201410173567.9

    申请日:2014-04-28

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明涉及一种纤维酶体基因的改建方法及通过基因改建获得的新酶,具体涉及一种以热纤梭菌的纤维酶体和它的单体酶为基础的基因改建方法,及基因改建产生的新型木质纤维水解酶,属于基因工程和酶工程领域。本发明是通过基因重组技术,切除纤维酶体的单体酶肽链中的锚定域以减少冗余部件、用1个短链将支架蛋白上的CBD嫁接到单体酶的分子上,获得具有不同分子结构、能够独立结合底物、比单体酶活性高的新型独立酶;本发明还建立了这种新酶的超量表达技术。本发明成功获得了不依赖于纤维酶体结构的新型纤维素酶NcelD;并且该新型酶NcelD水解CMC的活性、酶的稳定性比自然单体酶CelD有明显的提高;基因改建获得的NcelD编码基因在pHsh系统中得到可溶性超量表达。

    一种协同降解发酵玉米秸秆转化成高品质生物饲料原料的方法

    公开(公告)号:CN111909954B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202010668698.X

    申请日:2020-07-13

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明属于生物饲料领域,涉及一种协同降解发酵玉米秸秆转化成高品质生物饲料原料的方法;首先将来源于Irpex lacteus的锰过氧化物酶基因序列进行偏爱性优化,以优化的基因为模板进行PCR扩增,与pREP连接后转化到大肠杆菌感受态细胞中,获得重组穿梭质粒并导入缺陷型粟酒裂殖酵母感受态细胞中,得到重组锰过氧化物酶酵母工程菌;然后与粗糙脉胞菌、重组S.pombe‑man和产阮假丝酵母混合,添加氮源、氯化钙、硫酸锰、漆酶、葡萄糖氧化酶和小分子物质激活剂进行菌酶协同混菌发酵玉米秸秆;本发明合理利用农业废弃物,能够有效促进秸秆中木质纤维素的转化,在短时间内显著提高发酵饲料的品质,获得高品质生物饲料。

    一种协同发酵小麦秸秆制备高品质生物饲料的方法

    公开(公告)号:CN113416663B

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202110627093.0

    申请日:2021-06-04

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明属于生物饲料领域,具体涉及一种协同降解发酵小麦秸秆转化成高品质生物饲料的方法。首先将来源于白囊耙齿菌的木质素过氧化物酶基因优化后导入缺陷型粟酒裂殖酵母中,得到木质素过氧化物酶‑粟酒裂殖酵母重组工程菌;然后以重组工程菌联合粗糙脉孢菌、发酵乳杆菌、产阮假丝酵母以及产锰过氧化物酶的S.pombe‑pREP‑mnp发酵菌种,并添加葡萄糖、氮源、漆酶和葡萄糖氧化酶以及小分子物质进行菌酶协同混菌发酵秸秆,得到高品质生物饲料。本发明合理利用农业废弃物,促进秸秆中木质纤维素转化,提高秸秆饲料中真蛋白含量、降解其中木质纤维素含量,短时间内显著提升发酵饲料的品质和营养价值,获得优质秸秆发酵饲料。