公开(公告)号：CN114894731A

公开(公告)日：2022-08-12

申请号：CN202210568036.4

申请日：2022-05-24

申请人： 江苏大学 ,  江苏省农业科学院

发明人： 刘贤金 ,  王少萌 ,  刘姝 ,  刘媛 ,  谢雅晶 ,  胡晓丹 ,  林曼曼 ,  张霄 ,  徐重新

IPC分类号： G01N21/31 ,  G01N21/78 ,  G01N33/535

摘要： 本发明提供了一种α型抗独特型抗体的新型微囊藻毒素免疫检测方法。本发明方法利用氨基酸序列1~3所示的抗独特型抗体采用间接竞争ELISA法建立的新型免疫检测方法有潜力用于饮用水中微囊藻毒素的快速筛查检测。

公开(公告)号：CN113912684B

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202111397024.1

申请日：2021-11-23

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 徐重新 ,  刘贤金 ,  高美静 ,  胡晓丹 ,  刘媛 ,  仲建锋 ,  谢雅晶 ,  张霄

IPC分类号： C07K14/325 ,  C12N15/32 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04

摘要： 本发明提供一种可模拟Bt Cry1Ac蛋白关键抗虫功能表位的短肽及其编码基因与应用，该短肽DNA序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；该短肽能与棉铃虫钙黏蛋白Bt Cry蛋白结合区特异性结合，且经克隆替换Bt Cry蛋白DomianⅡ‑Loop2区和‑Loop3区以及替换Bt Cry1Ac蛋白抗独特型人源重链单域抗体CDR2区，重组的Bt Cry1Ac蛋白和重组的Bt Cry1Ac蛋白抗独特型抗体均对棉铃虫和小菜蛾具有良好的杀虫活性；本发明采用抗虫蛋白靶标害虫关键受体作为靶点，通过体外高通量筛选与鉴定的方式，靶向获得具备模拟抗虫蛋白关键抗虫功能表位的短肽，目标性强，制备周期短，短肽氨基酸序列小，适合蛋白质关键表位功能替代，对Bt Cry1Ac蛋白靶标农业害虫安全性生物防控具有重要的科学意义和实用价值。

公开(公告)号：CN113512115B

公开(公告)日：2023-09-15

申请号：CN202110909528.0

申请日：2021-08-09

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 林曼曼 ,  刘媛 ,  张霄 ,  徐重新 ,  谢雅晶 ,  仲建锋 ,  胡晓丹 ,  陈蔚 ,  刘贤金

IPC分类号： C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04

摘要： 本发明涉及一种广谱识别小菜蛾中肠受体的抗Cry2Aa独特型单域抗体及其应用，该单域抗体是以胃蛋白酶酶切Bt Cry2Aa毒素兔多克隆抗体获得的抗原结合片段F(ab’)2和小菜蛾中肠受体蛋白作为包被原，对噬菌体展示单域抗体库进行生物淘选，并在大肠杆菌中进行了可溶性表达，该单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；该单域抗体对小菜蛾中肠多种受体，即类钙粘蛋白、氨肽酶N2和液泡型ATP水解酶A亚基具有广谱识别能力，并对Cry2Aa毒素与三个受体的结合具有竞争抑制作用，在Cry毒素替代材料挖掘方面及生物防治害虫方面具有良好的应用潜力。

公开(公告)号：CN114672537A

公开(公告)日：2022-06-28

申请号：CN202210269849.3

申请日：2022-03-18

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 谢雅晶 ,  刘贤金 ,  王少萌 ,  李丹地 ,  杜雪飞 ,  李彬 ,  何鑫 ,  徐重新 ,  刘媛 ,  张存政 ,  孙永刚 ,  刘敏

IPC分类号： C12Q1/24 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/70 ,  C12R1/445 ,  C12R1/42 ,  C12R1/19 ,  C12R1/01 ,  C12R1/93

摘要： 本发明提供了一种农业用水中食源性致病微生物的富集方法及应用，属于食源性致病微生物检测技术领域。所述富集方法是将预处理的农业用水经滤膜抽滤；将所述截留有微生物的滤膜进行洗脱，所得洗脱液分离，所得固相为膜细菌组分，所得液相为含膜病毒组分的溶液；将滤膜滤液经切向流过滤器处理获得切向流过滤病毒组分。本发明所述方法可对水样中多种致病细菌和食源性病毒同时进行富集、分离，缩短富集处理时间，食源性病毒回收率最高可达62.60％，致病菌回收率最高可达94.24％，可有效富集多种常见致病细菌、食源性病毒和冠状病毒，配合高通量测序技术或实时荧光定量PCR检测技术在快速检测农业用水中食源性致病微生物中的应用。

公开(公告)号：CN112779263B

公开(公告)日：2022-05-06

申请号：CN202110193524.7

申请日：2021-02-20

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 刘贤金 ,  胡晓丹 ,  张霄 ,  刘媛 ,  仲建锋 ,  谢雅晶 ,  徐重新 ,  林曼曼 ,  高美静 ,  卢莉娜 ,  朱庆 ,  陈蔚

IPC分类号： C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K16/18 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种人源抗虫基因B1F6及其编码的蛋白质和应用，属于基因工程和生物防治领域，所述人源抗虫基因B1F6的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述抗虫蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；本发明提供的人源抗虫基因B1F6编码的抗虫蛋白是从人源单域抗体库中筛选获得的具有杀虫活性的单域抗体，分子量小，制备简单，且来源于人自身抗体，用于农业虫害防治，对人体安全，对拓展丰富新型杀虫基因资源，具有重要的科学及现实意义。

公开(公告)号：CN113912684A

公开(公告)日：2022-01-11

申请号：CN202111397024.1

申请日：2021-11-23

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 刘贤金 ,  徐重新 ,  高美静 ,  胡晓丹 ,  刘媛 ,  仲建锋 ,  谢雅晶 ,  张霄

IPC分类号： C07K14/325 ,  C12N15/32 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04

摘要： 本发明提供一种可模拟Bt Cry1Ac蛋白关键抗虫功能表位的短肽及其编码基因与应用，该短肽DNA序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；该短肽能与棉铃虫钙黏蛋白Bt Cry蛋白结合区特异性结合，且经克隆替换Bt Cry蛋白DomianⅡ‑Loop2区和‑Loop3区以及替换Bt Cry1Ac蛋白抗独特型人源重链单域抗体CDR2区，重组的Bt Cry1Ac蛋白和重组的Bt Cry1Ac蛋白抗独特型抗体均对棉铃虫和小菜蛾具有良好的杀虫活性；本发明采用抗虫蛋白靶标害虫关键受体作为靶点，通过体外高通量筛选与鉴定的方式，靶向获得具备模拟抗虫蛋白关键抗虫功能表位的短肽，目标性强，制备周期短，短肽氨基酸序列小，适合蛋白质关键表位功能替代，对Bt Cry1Ac蛋白靶标农业害虫安全性生物防控具有重要的科学意义和实用价值。

公开(公告)号：CN104498501B

公开(公告)日：2017-07-18

申请号：CN201410735997.5

申请日：2014-12-05

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 刘贤金 ,  刘媛 ,  谢雅晶 ,  武爱华 ,  张霄 ,  徐重新 ,  赵岩岩 ,  仲建锋

IPC分类号： C12N15/12 ,  C07K14/47 ,  C12N15/63 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04

CPC分类号： C07K16/4233 ,  A01N47/44 ,  A01N63/02 ,  C07K14/47 ,  C07K16/1278 ,  C07K2317/21 ,  C07K2317/622 ,  C07K2317/73 ,  C12N15/63 ,  C12N15/8286 ,  Y02A40/162

摘要： 本发明公开一种人源杀虫基因及其编码杀虫肽与应用，所述人源杀虫基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该基因编码的杀虫肽氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，该杀虫肽可经原核系统表达，初级培养物具有与稻纵卷叶螟中肠围食膜特异性受体BBMV的结合活性，其不经动物免疫获得，制备周期短，氨基酸序列小，适合体外大规模生产，可降低现有Bt毒素广泛使用存在的各类安全风险乃至以后可能替代Bt用于农业害虫的生物防治，减少杀虫剂的使用具有重要的科学及现实意义。

公开(公告)号：CN118930646A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202411182418.9

申请日：2024-08-27

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 徐重新 ,  沈建兴 ,  陈蔚 ,  谢雅晶 ,  沈成 ,  刘媛 ,  张霄 ,  刘贤金

IPC分类号： C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  A01N63/50 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04 ,  G01N33/543 ,  G01N33/68 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供一种具备靶向模拟Bt Cry1C毒素结构和杀虫功能的人源基因工程抗体及其高活性突变体，该人源基因工程抗体核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ IN NO.1、SEQ IN NO.2所示，其突变体的核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ IN NO.3和SEQ IN NO.4所示；该抗体和突变体经原核表达后，相应蛋白对小菜蛾幼虫的LD50分别达到原Bt Cry1C毒素的38.9%和46.8%，对棉铃虫幼虫的LD50分别达到原Bt Cry1C毒素的32.9%和37.4%；二者还可以分别作为IC‑ELISA检测法中的包被抗原，对Bt Cry1C毒素进行高灵敏检测；该抗体及其突变体可以作为替代Bt Cry1C毒素结构的抗原类似物材料，不仅可以作为新型蛋白类抗虫材料在农业害虫绿色防治上具有潜在应用价值，也可用于环境和食品样品中Bt Cry1C毒素残留检测，具有广谱的应用价值。

公开(公告)号：CN116178512A

公开(公告)日：2023-05-30

申请号：CN202310192513.6

申请日：2023-03-02

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 徐重新 ,  刘媛 ,  金嘉凤 ,  沈成 ,  陈蔚 ,  胡晓丹 ,  谢雅晶 ,  张霄 ,  朱庆

IPC分类号： C07K14/325 ,  C12N15/32 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A01N47/44 ,  A01P7/04 ,  C07K16/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供一种具备模拟Bt Cry毒素抗虫蛋白共性结构的多肽及其编码基因与应用，该多肽核苷酸序列、氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；该多肽能与Bt Cry毒素靶标害虫棉铃虫钙黏蛋白受体特异性结合，且经原核表达后的多肽蛋白对供试的棉铃虫具有良好的杀虫活性，以其为免疫原免疫小鼠获得的血清能同时识别6种Bt Cry毒素；本申请提供的具备模拟Bt Cry毒素共性结构和功能的多肽在替代Bt Cry毒素抗虫蛋白用于靶标农业害虫绿色防治和作为免疫原用于高效制备Bt Cry毒素检测用广谱抗体方面具有重要的科学意义和广阔的应用价值。

公开(公告)号：CN110467677B

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN201910770828.8

申请日：2019-08-20

申请人： 江苏省农业科学院

发明人： 刘媛 ,  张霄 ,  徐重新 ,  胡晓丹 ,  林曼曼 ,  谢雅晶 ,  张存政 ,  刘贤金

IPC分类号： C07K16/44 ,  G01N33/53

摘要： 本发明涉及一种拟除虫菊酯类农药代谢物的广谱特异性识别单链抗体及其应用，该单链抗体基因是以一株抗3‑苯氧基苯甲酸杂交瘤细胞株为模板，分别扩增其重链和轻链可变区基因进行构建，并在大肠杆菌中进行了可溶性表达，该单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；该单链抗体对多种拟除虫菊酯农药的代谢/降解产物，即3‑苯氧基苯甲酸、3‑苯氧基苯甲醛和3‑苯氧基苯甲醇具有广谱识别能力，在拟除虫菊酯类农药代谢物广谱筛查检测中具有良好的应用前景，亦可以用于单种代谢物的快速筛查检测。