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公开(公告)号：CN113174447A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110328676.3
申请日：2021-03-26
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12R1/94
摘要： 本发明公开了一种用于检测CGMMV的金标速测卡及其制备方法，其中金标速测卡包括外壳以及检测卡；壳体上设置有观察窗以及加样孔；检测卡包括底板、样品垫、标记垫以及硝酸纤维素膜；标记垫上涂覆有探针一，探针一由胶体金标记；硝酸纤维素膜上间隔设置有检测线T和质控线C；检测线T上包被有探针二，探针二由巯基标记；质控线C上包被有BSA抗体。该用于检测CGMMV的金标速测卡及其制备方法与现有的PCR检测方法相比，操作简单，不需要专门的仪器设备，不需要进行PCR扩增，可对样本中CGMMV进行快速、灵敏的现场检测。
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公开(公告)号：CN105349572A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510893995.3
申请日：2015-12-04
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N15/82
CPC分类号： C12N15/8205 , C12N15/8207
摘要： 本发明提供了一种简便、高效的葫芦科作物病毒及其病毒衍生物的接种方法，属生物技术领域。该方法适用于所有可通过摩擦接种葫芦科作物的病毒、相应病毒的侵染性克隆和改造过的病毒载体，整个操作仅在穴盘中完成，通过针刺接种，实现病毒有效感染植株的目的。与传统的摩擦接种法相比，该方法具有操作简便、效率高、适用范围广、接种量相对固定、操作周期短等一系列特点，是一种快速简便高效的植物病毒接种方法，可用于大规模的病毒生物学工作、品种抗性筛选与利用、抗病品种选育和以病毒为载体的目标生物活性物质的生产。
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公开(公告)号：CN103103288B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310000432.8
申请日：2013-01-05
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开了一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法，根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物反向引物CWWY-R2为：5′-GGTTCCMGTTATCGTACT-3′。正向引物CW1-F2：5′-GGAAGGGATGCCATACAACT-3′，WY1-F2：5′-ACCCTACAAACAAACTCTGC-3′，植物总RNA为模板，以CWWY-R2为引物，反转录合成cDNA。然后通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系：cDNA1.6μL、引物(10μmol/L)各0.4μL、10×PCR Buffer(不含Mg2+)2μL、dNTPs(10mmol/L each)0.4μL、Taq DNA聚合酶(5U/μL)0.8μL、MgCl2(25mmol)0.8μL、ddH2O 13.2μL合计20μL；PCR反应条件：94℃预变性5min、94℃50s、50℃50s、72℃90s共30个循环，72℃延伸10min。PCR扩增预期目的片段分别为WYMV 508bp、CWMV 918bp。利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测，分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染。
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公开(公告)号：CN116516062A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202211698983.1
申请日：2022-12-28
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明公开了一种检测黄瓜绿斑驳花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的引物组、试剂盒。涉及植物病毒病害检测诊断技术领域。包括：C8F和C8R、Z10F和Z10R’，探针C8P、Z10P’。本发明与其他等温扩增技术相比较，更加简单方便、反应更加快速、准确、能更好的与检测平台结合等优点。与现有常用的的ELISA检测技术相比，具有更高的特异性和灵敏性。与传统RT‑PCR检测相比，操作步骤简单，不需要单独进行反转录步骤，与普通PCR相比，实验时间只有短短十几分钟，且不需要使用PCR仪这样的精密昂贵仪器。在同一条件体系下可以同时检测出是否感染CGMMV和/或ZYMV病毒。
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公开(公告)号：CN109566420A
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201910095750.4
申请日：2019-01-31
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 本发明提供了一种葫芦组培快繁方法，涉及植物组织培养技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：1)将去壳的葫芦种子消毒，接种到无菌苗固体培养基表面进行无菌苗培养，得无菌苗；2)剥离所述无菌苗的子叶节，将所述子叶节接种于丛生芽诱导培养基中进行诱导培养，得丛生芽；3)分离所述丛生芽后接种于生根培养基中进行生根培养，得葫芦组培快繁苗。利用本发明所述方法，2个月内获得大量遗传性状一致的葫芦成苗；同时增殖系数最高达2.27，生根率最高达95％。本发明所述方法为葫芦的细胞工程和转基因改良育种提供了方法基础，同时为规模化生产高品质葫芦砧木苗提供参考。
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公开(公告)号：CN109971823A
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201910254902.0
申请日：2019-03-28
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/18
摘要： 本发明提供了一种穴盘培土法玉米粗缩病人工接种鉴定方法。它包括接种体带毒灰飞虱和一定规模玉米种子的准备，萌芽初期接种对应数量的接种体，一定时间后调查发病率评价抗性水平等步骤。本发明因其独特的水稻黑条矮缩病毒室内活体保存技术，大大满足了室内接种所需灰飞虱量的需求；特殊的接种鉴定条件，不仅克服了自然接种的不稳定性，大大拓宽了品种抗性鉴定的时间，还规范了抗性鉴定试验；另外在接种规模上实现了突破，大大节约了试验成本。这一方法可应用于玉米品种资源的发掘和选育、抗性评价和抗性遗传等众多领域。
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公开(公告)号：CN105724001A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201610058533.4
申请日：2016-01-26
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明提供了一种室内高通量玉米粗缩病人工接种鉴定方法。它包括接种体带毒灰飞虱和一定规模玉米种子的准备，萌芽初期接种对应数量的接种体，一定时间后调查发病率评价抗性水平等步骤。本发明因其独特的水稻黑条矮缩病毒室内活体保存技术，大大满足了室内接种所需灰飞虱量的需求；其精准的试验设计，不仅克服了自然接种的不稳定性，拓宽了品种抗性鉴定时间，还规范了抗性鉴定试验；另外在接种规模上实现了突破，大大节约了试验成本。这一方法可应用于玉米品种资源的发掘和选育、抗性评价和抗性遗传等众多领域。
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公开(公告)号：CN103103288A
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201310000432.8
申请日：2013-01-05
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开了一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法，根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物反向引物CWWY-R2为：5′-GGTTCCMGTTATCGTACT-3′。正向引物CW1-F2：5′-GGAAGGGATGCCATACAACT-3′，WY1-F2：5′-ACCCTACAAACAAACTCTGC-3′，植物总RNA为模板，以CWWY-R2为引物，反转录合成cDNA。然后通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系：cDNA1.6μL、引物(10μmol/L)各0.4μL、10×PCR Buffer(不含Mg2+)2μL、dNTPs(10mmol/L each)0.4μL、Taq DNA聚合酶(5U/μL)0.8μL、MgCl2(25mmol)0.8μL、ddH2O 13.2μL合计20μL；PCR反应条件：94℃预变性5min、94℃50s、50℃50s、72℃90s共30个循环，72℃延伸10min。PCR扩增预期目的片段分别为WYMV 508bp、CWMV 918bp。利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测，分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染。
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