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公开(公告)号：CN107515302A
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201710695549.0
申请日：2017-08-10
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： G01N33/569
CPC分类号： G01N33/56983 , G01N2333/08
摘要： 本发明提供一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的双抗夹心ELISA检测试剂盒。利用抗黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体JSCG-A3和抗黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体JSCG-A8-H，经辣根过氧化物酶标记与配对，建立了检测该病毒的双抗夹心ELISA试剂盒。该试剂盒及其检测方法具有特异性好、灵敏度高、准确稳定、操作简便等特点，可适用于田间葫芦科作物上CGMMV的大规模检测和诊断，为黄瓜绿斑驳花叶病毒病的预报预警提供了物质和技术支持。
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公开(公告)号：CN105349572A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510893995.3
申请日：2015-12-04
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N15/82
CPC分类号： C12N15/8205 , C12N15/8207
摘要： 本发明提供了一种简便、高效的葫芦科作物病毒及其病毒衍生物的接种方法，属生物技术领域。该方法适用于所有可通过摩擦接种葫芦科作物的病毒、相应病毒的侵染性克隆和改造过的病毒载体，整个操作仅在穴盘中完成，通过针刺接种，实现病毒有效感染植株的目的。与传统的摩擦接种法相比，该方法具有操作简便、效率高、适用范围广、接种量相对固定、操作周期短等一系列特点，是一种快速简便高效的植物病毒接种方法，可用于大规模的病毒生物学工作、品种抗性筛选与利用、抗病品种选育和以病毒为载体的目标生物活性物质的生产。
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公开(公告)号：CN103103288B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310000432.8
申请日：2013-01-05
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开了一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法，根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物反向引物CWWY-R2为：5′-GGTTCCMGTTATCGTACT-3′。正向引物CW1-F2：5′-GGAAGGGATGCCATACAACT-3′，WY1-F2：5′-ACCCTACAAACAAACTCTGC-3′，植物总RNA为模板，以CWWY-R2为引物，反转录合成cDNA。然后通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系：cDNA1.6μL、引物(10μmol/L)各0.4μL、10×PCR Buffer(不含Mg2+)2μL、dNTPs(10mmol/L each)0.4μL、Taq DNA聚合酶(5U/μL)0.8μL、MgCl2(25mmol)0.8μL、ddH2O 13.2μL合计20μL；PCR反应条件：94℃预变性5min、94℃50s、50℃50s、72℃90s共30个循环，72℃延伸10min。PCR扩增预期目的片段分别为WYMV 508bp、CWMV 918bp。利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测，分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染。
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公开(公告)号：CN104357580A
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201410532939.2
申请日：2014-10-09
申请人： 江苏省农业科学院
CPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143
摘要： 本发明涉及一种两步法检测葫芦科作物上6种病毒的多重RT-PCR方法及其专用引物，属植物保护领域。该方法包括第一步在一次PCR反应中检测葫芦科作物4种主要病毒(WMV、ZYMV、CMV、CGMMV)，第二步再在一次PCR反应中检测2种次要病毒(TMV和PRSV)。首先人工筛选合成适用于两步多重PCR的特异性引物；分析获得6种病毒单独侵染的病样，提取植株的总RNA；随机引物进行反转录，再分别整合4重和2重PCR的反应体系和条件，建立两步反应能够检测葫芦科作物上6种病毒的多重RT-PCR方法。本方法具有操作简便、省时省力、节约成本、结果可靠等优点，对葫芦科作物病毒病的监测监控具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN104012476A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410298198.6
申请日：2014-06-25
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： A01K67/033
摘要： 本发明提供了一种室内大量饲养灰飞虱的方法，属于昆虫饲养技术领域。它包括水稻苗的培育、三批不同龄次灰飞虱的饲养、换苗等步骤。本发明采用玻璃烧杯加细土培育水稻苗，培育不受场地、时间、环境等自然条件限制；三批不同龄次灰飞虱同时饲养，可以随时提供实验用龄次标准试虫，严格控制三批虫的饲养密度，保证了水稻苗的充分利用和灰飞虱所需营养的获得，不仅减少了换苗次数，而且大大提高了灰飞虱的繁殖力；换苗在独立换苗间进行，使用可使灰飞虱驱光的黑布遮挡，可以有效避免灰飞虱不同种群的混杂，保证了灰飞虱种群的纯一性。本发明具有操作简便、灵活，虫龄整齐、丰富，繁殖量大，饲养稳定等优点，可以为试验提供充足的标准试虫。
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公开(公告)号：CN113174447A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110328676.3
申请日：2021-03-26
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12R1/94
摘要： 本发明公开了一种用于检测CGMMV的金标速测卡及其制备方法，其中金标速测卡包括外壳以及检测卡；壳体上设置有观察窗以及加样孔；检测卡包括底板、样品垫、标记垫以及硝酸纤维素膜；标记垫上涂覆有探针一，探针一由胶体金标记；硝酸纤维素膜上间隔设置有检测线T和质控线C；检测线T上包被有探针二，探针二由巯基标记；质控线C上包被有BSA抗体。该用于检测CGMMV的金标速测卡及其制备方法与现有的PCR检测方法相比，操作简单，不需要专门的仪器设备，不需要进行PCR扩增，可对样本中CGMMV进行快速、灵敏的现场检测。
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公开(公告)号：CN105137074A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510522332.0
申请日：2015-08-20
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： G01N33/569
CPC分类号： G01N33/56983
摘要： 本发明公开了一种小麦黄花叶病毒双抗夹心生物素-亲和素ELISA检测方法及应用。结合生物素-亲和素系统的高度放大作用和抗原-抗体识别的特异性，建立了一种用于检测小麦黄花叶病毒的新的检测方法。该检测方法检测小麦黄花叶病毒的灵敏度高于ELISA，与RT-PCR比较灵敏度略低，但特异性一致，因此可有效地应用于田间小麦黄花叶病毒的早期诊断和监测。该方法因高度的灵敏度和特异性而减少抗体的用量，大大节约了检测成本；生物素-亲和素的偶联放大作用，大大提高了特异和准确性；另可操作性强适用于推广应用，从而为小麦病毒病的诊断、检测及科学防控提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN101580847A
公开(公告)日：2009-11-18
申请号：CN200910032718.8
申请日：2009-06-26
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开了一种利用2－5A合成酶和RNase L基因转化水稻获得对水稻条纹叶枯病抗性提高的品种的新方法。本发明的实质是根据2－5A合成酶和RNase L向应于病毒dsRNA，进而降解病毒RNA以限制寄主体内病毒增殖的原理，将两基因全长序列导入水稻中表达来提高转基因品种(系)对水稻条纹叶枯病的抗性水平。鉴于现有抗病品种存在抗性丧失的风险，本方法可以为水稻条纹叶枯病的可持续综合防控提供材料上的储备。
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公开(公告)号：CN115505650A
公开(公告)日：2022-12-23
申请号：CN202211290271.6
申请日：2022-10-20
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12R1/94
摘要： 针对目前植物病毒检测中核酸提取步骤冗繁的问题，本发明建立了一种基于低温预冷无水乙醇快速沉降病毒粒子检测植物病毒的方法。充分研磨获得的植物组织上清液中加入等体积预冷无水乙醇，冰浴后12000rpm离心沉降病毒粒子，70％乙醇洗涤后，加入无核酶去离子水溶解沉淀，100℃水浴后立即冰浴，即获得病毒基因组溶液，作为模板直接用于PCR、RT‑PCR和荧光定量PCR反应检测病毒。使用本方法可以快速从植物样品中检测多种植物病毒，包括DNA和RNA病毒。本发明方法不需要冗繁步骤来分离提取待检测样品的DNA或RNA，能在较短时间内获得满足PCR反应的病毒基因组作为模板，简便快捷、广谱性高、无需使用有毒化学试剂，节省了成本，降低了对实验人员的伤害和环境的污染，大大提高了植物病毒检测的效率和准确性，对于大规模快速检测植物病毒具有重要意义。这一方法可应用于植物病毒的诊断鉴定、流行监测以及植物病毒侵染寄主机制研究工作。
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公开(公告)号：CN104012476B
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201410298198.6
申请日：2014-06-25
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： A01K67/033
摘要： 本发明提供了一种室内大量饲养灰飞虱的方法，属于昆虫饲养技术领域。它包括水稻苗的培育、三批不同龄次灰飞虱的饲养、换苗等步骤。本发明采用玻璃烧杯加细土培育水稻苗，培育不受场地、时间、环境等自然条件限制；三批不同龄次灰飞虱同时饲养，可以随时提供实验用龄次标准试虫，严格控制三批虫的饲养密度，保证了水稻苗的充分利用和灰飞虱所需营养的获得，不仅减少了换苗次数，而且大大提高了灰飞虱的繁殖力；换苗在独立换苗间进行，使用可使灰飞虱驱光的黑布遮挡，可以有效避免灰飞虱不同种群的混杂，保证了灰飞虱种群的纯一性。本发明具有操作简便、灵活，虫龄整齐、丰富，繁殖量大，饲养稳定等优点，可以为试验提供充足的标准试虫。
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