一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行检测的液相色谱法

    公开(公告)号:CN111118120A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010082179.5

    申请日:2020-02-07

    IPC分类号: C12Q1/6834

    摘要: 本发明公开了一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行高灵敏度检测的液相色谱法,该检测方法包括:根据待检测的目标microRNA,设计荧光基团修饰的单链DNA,然后将其装载至磁珠表面作为检测探针;在上述检测探针中加入待检测的目标microRNA样品和DSN,充分混合,孵育;孵育后,将磁珠和未反应的DNA探针完全去除,得分离液;将分离液注入到液相色谱系统进行分离和定量。相对于现有技术,本发明方法利用液相色谱实现了对多种miRNA的同时检测,以miRNA-155和miRNA-21为例,该法对两者的检测限分别为0.33fM和0.24fM,线性范围均为1.0fM至10pM。所建立的方法能够成功应用于检测红斑狼疮、宫颈癌、卵巢癌患者和健康人血清样本中的miRNA-155和miRNA-21,以及更多种microRNA样品的检测。

    一种高分散性氧化锡锑高分子薄膜及其制备方法

    公开(公告)号:CN111960690A

    公开(公告)日:2020-11-20

    申请号:CN202010660801.6

    申请日:2020-07-10

    IPC分类号: C03C17/32 C01G30/00 B82Y40/00

    摘要: 本发明公开了一种高分散性氧化锡锑高分子薄膜及其制备方法,该薄膜包括聚乙烯醇高分子薄膜和均匀分散在薄膜中的氧化锡锑纳米颗粒,该薄膜的制备方法包括以下步骤:(1)合成氧化锡锑粉末,并分散在水中,得得到氧化锡锑分散液;(2)取聚乙烯醇粉末加入水中,加热至完全溶解,得到聚乙烯醇溶液;(3)将氧化锡锑分散液加入到聚乙烯醇溶液中,混合均匀后涂覆在衬底上,即得到氧化锡锑高分子薄膜。该薄膜具有高透光性和高分散性,对可见光透过性高,对紫外光的吸收率,对红外光反射率高,因此能够作为镀膜应用在Low-E玻璃上,其制备方法简单产率高以及重复性好,不产生二次污染。

    DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法

    公开(公告)号:CN112359094A

    公开(公告)日:2021-02-12

    申请号:CN202010729287.7

    申请日:2020-07-27

    IPC分类号: C12Q1/682

    摘要: 本发明公开了一种DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法,包括以下步骤:(1)制备Fe3O4纳米片;(2)在Fe3O4纳米片上修饰单链DNA得到Fe3O4/ssDNA;(3)制备超支化DNA结构样品,将超支化DNA结构样品与Fe3O4/ssDNA混合反应,得到DNA/Fe3O4网状结构;(4)将DNA/Fe3O4网状结构所在体系作为水相,和有机相混合,将带有萃取液滴的磁性棒浸入有机相,萃取DNA/Fe3O4网状结构后取出,利用紫外‑可见光谱仪对发生催化显色反应的液滴进行监测,分析紫外‑可见光谱数据即得待测样品中目标核酸的含量。该方法大大降低了核酸的检出限,实用性高,对于microRNA‑122的检出限低至0.147aM,对H‑DNA的检出限低至0.34aM,线性范围分别为0.5aM至1pM以及1aM至1pM(r2>0.995),利用单滴微萃取技术,检测效率高,操作简单,成本低。

    DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法

    公开(公告)号:CN112359094B

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202010729287.7

    申请日:2020-07-27

    IPC分类号: C12Q1/682

    摘要: 本发明公开了一种DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法,包括以下步骤:(1)制备Fe3O4纳米片;(2)在Fe3O4纳米片上修饰单链DNA得到Fe3O4/ssDNA;(3)制备超支化DNA结构样品,将超支化DNA结构样品与Fe3O4/ssDNA混合反应,得到DNA/Fe3O4网状结构;(4)将DNA/Fe3O4网状结构所在体系作为水相,和有机相混合,将带有萃取液滴的磁性棒浸入有机相,萃取DNA/Fe3O4网状结构后取出,利用紫外‑可见光谱仪对发生催化显色反应的液滴进行监测,分析紫外‑可见光谱数据即得待测样品中目标核酸的含量。该方法大大降低了核酸的检出限,实用性高,对于microRNA‑122的检出限低至0.147aM,对H‑DNA的检出限低至0.34aM,线性范围分别为0.5aM至1pM以及1aM至1pM(r2>0.995),利用单滴微萃取技术,检测效率高,操作简单,成本低。

    一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行检测的液相色谱法

    公开(公告)号:CN111118120B

    公开(公告)日:2022-09-23

    申请号:CN202010082179.5

    申请日:2020-02-07

    IPC分类号: C12Q1/6834

    摘要: 本发明公开了一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行高灵敏度检测的液相色谱法,该检测方法包括:根据待检测的目标microRNA,设计荧光基团修饰的单链DNA,然后将其装载至磁珠表面作为检测探针;在上述检测探针中加入待检测的目标microRNA样品和DSN,充分混合,孵育;孵育后,将磁珠和未反应的DNA探针完全去除,得分离液;将分离液注入到液相色谱系统进行分离和定量。相对于现有技术,本发明方法利用液相色谱实现了对多种miRNA的同时检测,以miRNA‑155和miRNA‑21为例,该法对两者的检测限分别为0.33fM和0.24fM,线性范围均为1.0fM至10pM。所建立的方法能够成功应用于检测红斑狼疮、宫颈癌、卵巢癌患者和健康人血清样本中的miRNA‑155和miRNA‑21,以及更多种microRNA样品的检测。