公开(公告)号：CN103642870B

公开(公告)日：2014-11-19

申请号：CN201310668982.7

申请日：2013-12-11

申请人： 河北欣港药业有限公司 ,  华东理工大学

发明人： 李海东 ,  刘爱军 ,  王泽建 ,  贾军巧 ,  张鑫 ,  庄英萍 ,  张嗣良 ,  张娅

IPC分类号： C12P17/18 ,  C12R1/01

摘要： 一种基于耗氧速率OUR为控制参数的利福霉素SV的发酵生产方法，是由地中海诺卡氏菌作为出发菌株，经过纯种培养、三级发酵生成利福霉素SV的。在发酵制备工序，通过控制发酵过程中发酵罐的搅拌转速和通气流量来达到不同的供氧水平，具体是在发酵过程前期70~75小时内维持发酵体系高水平的耗氧速率OUR在18~20mmol/L/h之间，使得菌丝快速生长，效价快速升高，发酵过程前期用时70~75小时之后，通过降低发酵罐的搅拌转速和通气流量，将耗氧速率OUR控制在13~15mmol/L/h之间，直到放罐终点。本发明促进了菌体生长和利福霉素SV的合成，提升了转化率，缩短了生产周期，稳定提高了发酵生产水平，使得利福霉素SV的产量得到提高。

公开(公告)号：CN103642870A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310668982.7

申请日：2013-12-11

申请人： 河北欣港药业有限公司 ,  华东理工大学

发明人： 李海东 ,  刘爱军 ,  王泽建 ,  贾军巧 ,  张鑫 ,  庄英萍 ,  张嗣良 ,  张娅

IPC分类号： C12P17/18 ,  C12R1/01

摘要： 一种基于耗氧速率OUR为控制参数的利福霉素SV的发酵生产方法，是由地中海诺卡氏菌作为出发菌株，经过纯种培养、三级发酵生成利福霉素SV的。在发酵制备工序，通过控制发酵过程中发酵罐的搅拌转速和通气流量来达到不同的供氧水平，具体是在发酵过程前期70~75小时内维持发酵体系高水平的耗氧速率OUR在18~20mmol/L/h之间，使得菌丝快速生长，效价快速升高，发酵过程前期用时70~75小时之后，通过降低发酵罐的搅拌转速和通气流量，将耗氧速率OUR控制在13~15mmol/L/h之间，直到放罐终点。本发明促进了菌体生长和利福霉素SV的合成，提升了转化率，缩短了生产周期，稳定提高了发酵生产水平，使得利福霉素SV的产量得到提高。

公开(公告)号：CN114216991A

公开(公告)日：2022-03-22

申请号：CN202111602354.X

申请日：2021-12-24

申请人： 河北欣港药业有限公司 ,  通辽凯源生物有限公司

发明人： 李海东 ,  史守坤 ,  章万志 ,  康翠雪 ,  王香英 ,  刘爱军

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/72 ,  G01N30/06

摘要： 本发明涉及药物分析技术领域，具体公开一种利福平中基因毒性杂质的检测方法。所述检测方法包括配制空白溶液、对照品溶液和供试品溶液，采用顶空进样‑气相色谱‑质谱联用法进行检测。本发明提供的检测方法，实现对利福平原料药中甲醛的定量和定性分析，该方法专属性强，并具有优异的重复性、准确度、灵敏度和线性关系，此外，该方法还具有较低的检测限，甲醛的检测限为0.026μg/mL，定量限为0.077μg/mL，满足利福平原料药中甲醛的检测要求。

公开(公告)号：CN114019062B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN202210002347.4

申请日：2022-01-05

申请人： 河北欣港药业有限公司 ,  通辽凯源生物有限公司

发明人： 李海东 ,  史守坤 ,  章万志 ,  康翠雪 ,  王香英 ,  刘爱军

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/30 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

摘要： 本发明涉及药物分析技术领域，具体公开一种利福平中有关物质的检测方法。所述方法包括：配制供试品溶液和对照品溶液，采用液相色谱‑质谱联用法进行检测，所述液相色谱采用C18色谱柱，以体积浓度为0.8‰~1.2‰的甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱；所述质谱采用ESI离子源，正离子检测，SIM模式。本申请提供的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点，能够快速、准确地对利福平原料药中的杂质N‑甲基哌嗪和1‑氨基‑4‑甲基哌嗪进行检测，整个操作过程可靠、可控，适于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN114019062A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202210002347.4

申请日：2022-01-05

申请人： 河北欣港药业有限公司 ,  通辽凯源生物有限公司

发明人： 李海东 ,  史守坤 ,  章万志 ,  康翠雪 ,  王香英 ,  刘爱军

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/30 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

摘要： 本发明涉及药物分析技术领域，具体公开一种利福平中有关物质的检测方法。所述方法包括：配制供试品溶液和对照品溶液，采用液相色谱‑质谱联用法进行检测，所述液相色谱采用C18色谱柱，以体积浓度为0.8‰~1.2‰的甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱；所述质谱采用ESI离子源，正离子检测，SIM模式。本申请提供的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点，能够快速、准确地对利福平原料药中的杂质N‑甲基哌嗪和1‑氨基‑4‑甲基哌嗪进行检测，整个操作过程可靠、可控，适于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN111979169A

公开(公告)日：2020-11-24

申请号：CN202010918273.X

申请日：2020-09-03

申请人： 河北欣港药业有限公司 ,  通辽凯源生物有限公司

发明人： 史守坤 ,  栗波 ,  李海东 ,  贾军巧 ,  王泽建 ,  王萍 ,  刘爱军

IPC分类号： C12N1/36 ,  C12N13/00 ,  C12N15/01 ,  C12R1/365

摘要： 一种氧胁迫诱变筛选利福霉素SV高产菌株的方法，是基于氧限制模型和低温等离子体诱变处理相结合获得利福霉素SV低氧耐受的高产菌株的高效育种方法，包括：在利福霉素SV的生产菌株地中海诺卡氏放线菌选育过程中，利用氧限制模型平板筛选低氧情况下能够快速生长、菌苔颜色深褐色的菌株；在筛选培养基中添加0.8～1.2g/L的无水亚硫酸钠制备筛选平皿，将低温等离子体诱变处理时间为22～28秒的菌悬液稀释涂布在氧限制平皿培养基上，28℃培养6～7天，挑选生长较快、颜色较深菌株，能够显著提升筛选的正突变率。本发明能筛选到低氧条件下能够快速生长和进行产物合成的高效利福霉素生产菌株，很好地适应生产过程的氧限制环境，并表现出良好的发酵生产能力。