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公开(公告)号：CN101209345A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610128462.7
申请日：2006-12-26
申请人： 河南农业大学
CPC分类号： Y02A50/473
摘要： 一种动物基因工程干扰素复合制剂及其生产方法和临床应用。该动物基因工程干扰素复合制剂通过提取动物外周血或脾淋巴细胞，经培养和体外诱导剂诱导，Trizol提取细胞总RNA，设计特异性引物，通过RT－PCR技术克隆干扰素基因，通过T－A策略将其连接到pGEM－T载体；重新设计引物，两端加入不同的酶切序列和起始密码子ATG、终止密码子TAA，并去除前导肽序列，以重组T载体为模板进行PCR扩增，获取动物干扰素基因表达片段；将表达片段进行稀有密码子突变，经双酶切后，胶回收目的片段，连接到经同样双酶切的载体pFastBacTMDual上；将动物interferon－α克隆到Polyhedrin promoter控制下的多克隆位点，将同一种属动物interferon－γ克隆到p10 promoter控制下的多克隆位点；将构建好的载体pFastBacTMDual+interferon α+interferon γ转染到DH10BacTME.coli进行重组；经蓝白斑筛选，PCR鉴定后，将构建好的recombinant bacmid提取纯化，通过脂质体法转染SF9昆虫细胞；表达产物鉴定、纯化；动物基因工程干扰素复合制剂抗病毒活性检测和临床应用效果评价。该动物基因工程干扰素在昆虫细胞共表达的生产方法和临床应用。
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公开(公告)号：CN116338183A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310412111.2
申请日：2023-04-18
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , C12N15/34 , C12N15/70 , C07K14/01
摘要： 本发明公开了一种基于ASFV p72保护性抗原的间接ELISA方法的建立，属于生物工程技术领域，该ASFV p72保护性抗原的间接ELISA方法包括下列步骤：构建重组质粒pET‑28a‑p72Δ原核表达载体；重组蛋白的表达和纯化；重组蛋白的反应原性鉴定；间接ELISA方法的建立。本发明建立了一种基于ASFV p72保护性抗原的间接ELISA方法，可以被用作检测ASFV感染所诱导产生的晚期保护性抗体，该方法能够用来辅助诊断猪群的感染阶段，对于监测非瘟疫情的流行特征具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118604336A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410828923.X
申请日：2024-06-25
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , C07K19/00 , C12N15/70 , C12R1/19
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及检测ASFV感染早、晚期抗体水平的间接ELISA试剂盒及检测方法。本发明提供的间接ELISA试剂盒，包括：包被酶标板、酶标二抗；所述包被酶标板以p72Δ‑p30融合蛋白作为包被抗原；所述p72Δ‑p30融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的试剂盒，采用p72Δ‑p30融合蛋白作为包被抗原，基于该融合蛋白建立ELISA方法，具有快速、特异、灵敏的特点，能够有效检测ASFV感染早、晚期抗体水平，用于临床诊断后可精准判断猪群的病毒持续感染情况，能够为ASFV诊断试剂的开发以及ASF疫病防治措施制定提供科学依据。
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公开(公告)号：CN101209345B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200610128462.7
申请日：2006-12-26
申请人： 河南农业大学
CPC分类号： Y02A50/473
摘要： 一种动物基因工程干扰素复合制剂及其生产方法和临床应用。该动物基因工程干扰素复合制剂通过提取动物外周血或脾淋巴细胞，经培养和体外诱导剂诱导，Trizol提取细胞总RNA，设计特异性引物，通过RT-PCR技术克隆干扰素基因，通过T-A策略将其连接到pGEM-T载体；重新设计引物，两端加入不同的酶切序列和起始密码子ATG、终止密码子TAA，并去除前导肽序列，以重组T载体为模板进行PCR扩增，获取动物干扰素基因表达片段；将表达片段进行稀有密码子突变，经双酶切后，胶回收目的片段，连接到经同样双酶切的载体pFastBacTM Dual上；将动物interferon-α克隆到Polyhedrin promoter控制下的多克隆位点，将同一种属动物interferon-γ克隆到p10 promoter控制下的多克隆位点；将构建好的载体pFastBacTM Dual+interferonα+interferonγ转染到DH10BacTM E.coli进行重组；经蓝白斑筛选，PCR鉴定后，将构建好的recombinant bacmid提取纯化，通过脂质体法转染SF9昆虫细胞；表达产物鉴定、纯化；动物基因工程干扰素复合制剂抗病毒活性检测和临床应用效果评价。该动物基因工程干扰素在昆虫细胞共表达的生产方法和临床应用。
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公开(公告)号：CN101210210A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160049.9
申请日：2006-12-31
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： C11B9/00
摘要： 本发明的目的在于，提供一种超临界CO2萃取留兰香精油工艺，为留兰香的综合开发和高效无毒利用奠定了基础。一种留兰香精油的提取方法，包括下列步骤：1)将干燥留兰香茎叶粉碎后，2)投入萃取釜中，当萃取釜的温度达到40－50℃，3)打开CO2贮气罐，对萃取釜进行加压，4)当萃取釜压力达到18－22MPa时，保持温度和压力，萃取3－4h，5)打开收集阀收集留兰香精油。超临界CO2分离作为一种高新技术，具有操作温度低、溶解能力强、无毒、无污染、无溶剂残留及产品易分离等优点，特别适合于生物活性物质和热敏性物质的分离提取。此外利用超临界CO2萃取能力易调节的特性，通过改变CO2的萃取能力可望达到较高的分离提纯效果。
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公开(公告)号：CN101209280A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160051.6
申请日：2006-12-31
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： A61K36/534 , A61K9/08 , A61P17/04 , A61K127/00 , A61K135/00
摘要： 一种天然高效无毒消炎止痒液，是从留兰香中提取的复合物，包含植物留兰香新鲜茎叶植物提取原液的活性成分。所述的天然高效无毒消炎止痒液，其特征在于：加入去离子水，提取原液的活性成分与去离子水所占百分比的范围是：提取原液的活性成分40％≤～＜100％，去离子水0＜～≤60％。所述的天然高效无毒消炎止痒液的制备方法：用植物留兰香新鲜茎叶植物提取原液的活性成分和去离子水配制，提取原液的活性成分与去离子水所占百分比的范围是：提取原液的活性成分40％≤～＜100％，去离子水0＜～≤60％，二者混合后经细菌滤器过滤。本发明的消炎止痒液具有祛痒消炎的作用，特别是可有效阻止蚊虫叮咬后产生的骚痒和红肿发生。特别适用于婴幼儿。
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公开(公告)号：CN101209258A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160048.4
申请日：2006-12-31
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： A61K31/715 , A61K36/481 , A61P37/04 , A61P31/12
CPC分类号： Y02A40/78
摘要： 为了更好发挥中药多糖抑制体内、外病毒繁殖，保护细胞免于感染，提高感染动物的存活率的效果，本发明提供一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物。一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物，按重量份包含有效成分黄芪多糖1－9和板蓝根多糖1－9。按重量份由4－30的有效成分和70～96的载体组成。载体是无水葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠中的至少一种。载体是注射用水。所述的任何一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物的应用，应用于畜禽、宠物的病毒性传染病的防治及免疫力低下。本发明主要从中药黄芪、板蓝根中提取多糖成分，将两种多糖混合使用使得效果好于单独任何一种，既能作为免疫增强剂又能作为抗病毒药物的尚属首次。
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公开(公告)号：CN114292874A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202210027139.X
申请日：2022-01-11
申请人： 河南农业大学
摘要： 本发明公开了一种ASFV单基因嵌合重组PRRSV活载体疫苗的制备方法，属于生物工程技术领域，该ASFV单基因嵌合重组PRRSV活载体疫苗的制备方法包括下列步骤：ASFV P72中和抗体表位区cDNA的扩增；融合PCR引物的设计与合成；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV病毒的构建；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV的拯救；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV的生物学特性检测；ASFV P72短片段嵌合重组PRRSV的免疫攻毒试验，检测重组病毒的免疫保护力；本发明建立了一种ASFV单基因嵌合重组PRRSV活载体疫苗毒的制备方法，该方法能够同时对PRRSV和ASFV产生一定的免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN101209258B
公开(公告)日：2011-06-08
申请号：CN200610160048.4
申请日：2006-12-31
申请人： 河南农业大学
IPC分类号： A61K31/715 , A61K36/481 , A61P37/04 , A61P31/12
CPC分类号： Y02A40/78
摘要： 为了更好发挥中药多糖抑制体内、外病毒繁殖，保护细胞免于感染，提高感染动物的存活率的效果，本发明提供一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物。一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物，按重量份包含有效成分黄芪多糖1-9和板蓝根多糖1-9。按重量份由4-30的有效成分和70～96的载体组成。载体是无水葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠中的至少一种。载体是注射用水。所述的任何一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物的应用，应用于畜禽、宠物的病毒性传染病的防治及免疫力低下。本发明主要从中药黄芪、板蓝根中提取多糖成分，将两种多糖混合使用使得效果好于单独任何一种，既能作为免疫增强剂又能作为抗病毒药物的尚属首次。
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公开(公告)号：CN113663064A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202111041684.6
申请日：2021-09-07
申请人： 河南农业大学
摘要： 本发明公开了一种ASFV双基因重组PRRSV活载体疫苗的制备方法，属于生物工程技术领域，该ASFV双基因重组PRRSV活载体疫苗的制备方法包括下列步骤：ASFV P30和P72 cDNA的扩增；融合PCR引物的设计与合成；ASFV P30和P72重组PRRSV嵌合病毒的构建；ASFV P30和P72双基因重组PRRSV的拯救；ASFV P30和P72双基因重组PRRSV的生物学特性检测；ASFV P30和P72双基因重组PRRSV的免疫攻毒试验，检测重组病毒的免疫保护力；本发明建立了一种ASFV双基因重组PRRSV活载体疫苗毒的制备方法，该方法能够同时对PRRSV和ASFV产生一定的免疫保护作用。
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