超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株及其应用

    公开(公告)号:CN106754743B

    公开(公告)日:2020-06-02

    申请号:CN201611024568.2

    申请日:2016-11-17

    摘要: 本发明公开了一种超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株,其保藏编号为:CCTCC NO:V201316,以及该超强毒力鸡传染性法氏囊病病毒细胞适应毒株在制备鸡传染性法氏囊病病毒疫苗、诊断用抗原试剂、诊断用阳性血清试剂和治疗用卵黄抗体、抗血清中的应用。本发明的鸡传染性法氏囊病病毒CL40毒株,具有超强流行毒株特性,具有良好的免疫原性,而且适应细胞规模化培养。本发明的鸡传染性法氏囊病病毒CL40毒株的TCID50为10‑9.25/0.1mL,对超强毒株IBDV‑CL的致死性攻击,具有100%的保护率,同时免疫效力稳定、持续时间长,对预防和控制鸡传染性法氏囊超强毒流行具有重要的价值。

    猪α-干扰素复合制剂的制备方法

    公开(公告)号:CN103276010A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310241920.8

    申请日:2013-06-19

    IPC分类号: C12N15/74 C12N1/21 C12R1/245

    摘要: 本发明公开了一种猪α-干扰素复合制剂的制备方法,它的步骤如下:(1)人工合成150bp的短小乳酸杆菌信号肽序列,构建出pUCK-SP载体;(2)构建出pUCK-SP-IFN-α质粒,pUCK-SP-IFN-α质粒经NdeⅠ和EcoRI酶切,回收SP-IFN-α片段;(3)构建干酪乳酸杆菌复制型表达质粒pIAbeta8-plac-SP-IFN-α;(4)通过电转化方法,得到猪α-干扰素复合制剂;本发明拟将猪IFN-α基因导入干酪乳酸杆菌中,从而获得能表达猪IFN-α的干酪乳酸杆菌。这样的菌株集抗病毒、抗菌作用于一身,且可通过口服途径饲喂动物,十分方便。

    PCV2、PRV与SIVH9亚型多重SYBRGreenⅠ实时荧光PCR引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102373299B

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201110221752.7

    申请日:2011-08-04

    摘要: 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,SIV H9亚型引物的序列如下:上游引物P1:5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′;下游引物P2:5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′;PRV引物的序列如下:上游引物P3:5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′;下游引物P4:5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′;PCV2引物的序列如下:上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物,通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV。SIV H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL,207拷贝/μL,193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好,只出现三个特异性的峰值,重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒,有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

    PRRSV、SIVH9亚型与PCV2多重SYBRGreenⅠ实时荧光PCR引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN102373296A

    公开(公告)日:2012-03-14

    申请号:CN201110221712.2

    申请日:2011-08-04

    摘要: 本发明公开了一种PRRSV、SIV H9亚型与PCV2多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR·引物,SIV H9亚型引物的序列如下:上游引物P1:5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′;下游引物P2:5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′;PRRSV引物的序列如下:上游引物P3:5′-AAACCAGTCCAGAGGCAAG-3′;下游引物P4:5′-CCACAGTGTAACTTATCCTC-3′;PCV2引物的序列如下:上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增PRRSV、SIV H9亚型和PCV2的特异性引物,通过三重SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测出PRRSV、SIV H9亚型和PCV2,PRRSV、SIV H9亚型和PCV2同时检出的极限拷贝数分别为187拷贝/μL,191拷贝/μL,203拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好,只出现三个特异性的峰值,重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测PRRSV、SIV H9亚型和PCV23种DNA病毒,有利于这3种病毒的鉴别。

    一种猪圆环病毒Ⅱ型核酸疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN102274523A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201110221729.8

    申请日:2011-08-04

    IPC分类号: A61K48/00 A61K39/12 A61P31/20

    摘要: 本发明的技术方案是:一种猪圆环病毒II型核酸疫苗,在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了猪圆环病毒II型LY株ORF2和猪IL-18基因,所述核酸疫苗共表达猪圆环病毒II型LY株Cap和猪IL-18蛋白。本发明经PCR、双酶切及测序鉴定,证明成功构建了共表达质粒pIRES-ORF2/PIL18。将构建成功的重组质粒pIRES-ORF2/PIL18用脂质体法转染猪肾PK-15细胞,以RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。经RT-PCR检测到两种目的基因的转录;间接免疫荧光试验检测到ORF2蛋白在细胞浆和细胞核中观察到了特异性的亮绿色荧光,证明蛋白得到表达。

    一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物

    公开(公告)号:CN101209258B

    公开(公告)日:2011-06-08

    申请号:CN200610160048.4

    申请日:2006-12-31

    CPC分类号: Y02A40/78

    摘要: 为了更好发挥中药多糖抑制体内、外病毒繁殖,保护细胞免于感染,提高感染动物的存活率的效果,本发明提供一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物。一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物,按重量份包含有效成分黄芪多糖1-9和板蓝根多糖1-9。按重量份由4-30的有效成分和70~96的载体组成。载体是无水葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠中的至少一种。载体是注射用水。所述的任何一种动物用免疫增强剂和抗病毒的组合物的应用,应用于畜禽、宠物的病毒性传染病的防治及免疫力低下。本发明主要从中药黄芪、板蓝根中提取多糖成分,将两种多糖混合使用使得效果好于单独任何一种,既能作为免疫增强剂又能作为抗病毒药物的尚属首次。

    一种制备兽用药物缓释微粒的方法

    公开(公告)号:CN101744772A

    公开(公告)日:2010-06-23

    申请号:CN200810231083.X

    申请日:2008-11-27

    摘要: 一种制备兽用药物缓释微粒的方法,属于药品制备领域。本发明采用水溶性纳米氧化硅作为兽用药物载体制备药物缓释微粒,选取水溶性或非水溶性药物作为药物负载对象,制备了纳米氧化硅负载药物的缓释微粒。其中纳米氧化硅为球形,粒径在15~20nm之间,所制得的缓释微粒粒径在50~700nm左右,载药率可在2%~60%范围内进行调解,得到的产物既可以是水基液体,也可以是药物粉末。体外缓释实验表明,制备的缓释微粒在磷酸盐缓冲溶液中持续释放2~5天以上,可大幅度延长药物在体内的保留和作用时间,从而提高药物的生物利用度。该制备方法简单易行,载药率高,成本低,可实现自动化和规模化生产。

    四元杂交合成肉牛新品系的培育方法

    公开(公告)号:CN1795716A

    公开(公告)日:2006-07-05

    申请号:CN200410060363.0

    申请日:2004-12-28

    IPC分类号: A01H1/02

    摘要: 本发明涉及一种四元杂交合成肉牛新品系的培育方法,按以下步骤培育而成:(1)用德国黄牛和南阳黄牛杂交,再以红安格斯牛为第二父本进行三元杂交,生产出红安格斯牛、德国黄牛、南阳黄牛三元杂种牛,经选优培育后组成父系群体;(2)同时用西门塔尔牛、南阳黄牛杂交,再以红安格斯牛为第二父本进行三元杂交,生产出红安格斯、西门塔尔、南阳黄牛三元杂种牛,经选优培育后组成母系群体;(3)用步骤(1)得到的父系与步骤(2)得到的母系杂交,形成合成系;(4)将步骤(3)得到的合成系经选优固定即可培育出高档肉牛新品系。本发明是在南阳黄牛优良性状的基础上,通过合成育种,吸收了红安格斯等其他亲本的优良特性,达到现代高档肉牛品种的生产性能水平,解决了我国肉牛生产质差、量小、效低的问题。