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公开(公告)号:CN118531031A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410753434.2
申请日:2024-06-12
IPC分类号: C12N15/70 , C12N15/90 , C07K14/195 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/31 , C12R1/19
摘要: 本发明属于生物技术领域,涉及体外基因编辑的方法,特别是指单链DNA结合蛋白介导的体外CRISPR/Cas9基因编辑方法及其应用。本申请将靶向质粒中大肠杆菌lacZ基因的CRISPR‑Cas9核蛋白(Ribonucleoproteins,RNP)和大肠杆菌SSB与质粒一起孵育,添加或不添加同源重组片段,采用定量PCR检测发生同源重组和非同源重组基因编辑的质粒数量,检测大肠杆菌SSB能否在体外催化同源重组和非同源重组修复RNP介导的DSB,实现体外基因编辑。