公开(公告)号：CN119506179A

公开(公告)日：2025-02-25

申请号：CN202411617982.9

申请日：2024-11-13

Applicant: 河南省商业科学研究所有限责任公司 ,  河南省科学院

Inventor： 张梦雪 ,  朱海华 ,  王鋆坦 ,  郭碧珊 ,  尚慧毅 ,  刘红伟 ,  王法云

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P17/10 ,  C12P17/16 ,  C07D209/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种大肠杆菌重组工程菌及其应用。所述大肠杆菌重组工程菌为大肠杆菌F10，保存于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2024964；该大肠杆菌F10在发酵的过程中能够产生吲哚‑3‑甲醛和吲哚三聚体代谢产物，可用于制备吲哚‑3‑甲醛和吲哚三聚体。本发明还提供了一种吲哚类化合物的制备方法，具体为：将大肠杆菌F10进行发酵培养，得到发酵液，发酵液经离心后收集上清，向上清中加入乙酸乙酯进行萃取，萃取结束收集上层液，对上层液进行浓缩，得到提取物浸膏；对提取物浸膏进行硅胶柱层析分离，收集硅胶柱层析的洗脱流分；所述洗脱流分经凝胶柱层析、高效液相色谱分离纯化，得到吲哚类化合物。与现有的通过化学工艺制备方法相比，本发明吲哚类化合物的制备方法绿色环保，反应条件简单，副产物少，产物纯度高。

公开(公告)号：CN115725630A

公开(公告)日：2023-03-03

申请号：CN202211016505.8

申请日：2022-08-24

Applicant: 河南省商业科学研究所有限责任公司 ,  河南省科学院

Inventor： 王鋆坦 ,  朱海华 ,  郭碧珊 ,  张梦雪 ,  尚慧毅 ,  葛瑞宏 ,  蒋碧伟 ,  刘红伟 ,  王法云 ,  王慧 ,  郑纯宇

IPC: C12N15/76 ,  C12N15/66 ,  C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12N15/53 ,  C12N15/56 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种链霉菌双启动子诱导型穿梭载体的构建方法及应用，其目的在于为蛋白生产提供理论研究基础，涉及构建方法包括在质粒pSET152中插入Kpn I和Spe I限制性酶切位点，插入组成型强启动子ermE*及诱导型启动子tipA，并引入了Bsa I限制性位点，制备得到双启动子诱导型穿梭载体pSETTK；涉及应用方法是添加信号肽融合目的基因的片段至穿梭载体pSETTK，形成表达质粒；以链霉菌为宿主，最终实现对目的蛋白的诱导表达；本发明优势在于构建的穿梭载体pSETTK具有双启动子，组成型启动子ermE*本身可使得目的蛋白过表达，再加上诱导型启动子tipA的调控作用，为标准化生产和可调控生产提供了理论基础。