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公开(公告)号：CN112813090B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202011640263.0
申请日：2020-12-31
Applicant: 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
Abstract: 本发明涉及一种磷脂酶D的异源表达重组质粒，其构建方法包括步骤一，人工合成质粒pUC57‑STR_ORI，步骤二，人工合成质粒pUC57‑STR_PLD，步骤三，重组质粒的构建，最终得到包括Kasop*组成型强启动子，肉桂链霉菌的信号肽，链霉菌来源的磷脂酶D合成基因和ApmR抗性筛选基因的重组质粒。本发明中所得重组质粒能够在链霉菌中成功表达，启动子具有强启动作用，信号肽能够使引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的效果良好，磷脂酶D合成基因段能够使得磷脂酶D成功表达。本发明中通过质粒合成方法合成基因的表达元件，进而形成完整的重组质粒，且质粒结构稳定，并且便于向链霉菌宿主内转移，并保证在链霉菌宿主内成功表达。
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公开(公告)号：CN112813090A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202011640263.0
申请日：2020-12-31
Applicant: 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
Abstract: 本发明涉及一种磷脂酶D的异源表达重组质粒，其构建方法包括步骤一，人工合成质粒pUC57‑STR_ORI，步骤二，人工合成质粒pUC57‑STR_PLD，步骤三，重组质粒的构建，最终得到包括Kasop*组成型强启动子，肉桂链霉菌的信号肽，链霉菌来源的磷脂酶D合成基因和ApmR抗性筛选基因的重组质粒。本发明中所得重组质粒能够在链霉菌中成功表达，启动子具有强启动作用，信号肽能够使引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的效果良好，磷脂酶D合成基因段能够使得磷脂酶D成功表达。本发明中通过质粒合成方法合成基因的表达元件，进而形成完整的重组质粒，且质粒结构稳定，并且便于向链霉菌宿主内转移，并保证在链霉菌宿主内成功表达。
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公开(公告)号：CN115725630A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211016505.8
申请日：2022-08-24
Applicant: 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种链霉菌双启动子诱导型穿梭载体的构建方法及应用，其目的在于为蛋白生产提供理论研究基础，涉及构建方法包括在质粒pSET152中插入Kpn I和Spe I限制性酶切位点，插入组成型强启动子ermE*及诱导型启动子tipA，并引入了Bsa I限制性位点，制备得到双启动子诱导型穿梭载体pSETTK；涉及应用方法是添加信号肽融合目的基因的片段至穿梭载体pSETTK，形成表达质粒；以链霉菌为宿主，最终实现对目的蛋白的诱导表达；本发明优势在于构建的穿梭载体pSETTK具有双启动子，组成型启动子ermE*本身可使得目的蛋白过表达，再加上诱导型启动子tipA的调控作用，为标准化生产和可调控生产提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN110731502A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911105502.X
申请日：2019-11-13
Applicant: 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 上海交通大学医学院
IPC: A23L33/00
Abstract: 本发明涉及一种酵素的生产工艺，特别涉及一种果蔬酵素的制备方法，包括如下步骤，(1)可溶性物质提取：打浆、酶解、灭酶杀菌、过滤，提取可溶性提取液；(2)发酵：接种菌、37-42℃发酵3-7天，发酵液经杀菌、过滤、离心、微米过滤，即为果蔬发酵液；(3)喷雾干燥：将果蔬发酵液真空浓缩至可溶性固形物含量30％以上，静置，进行喷雾干燥，得到果蔬酵素粉；(4)真空干燥：将果蔬酵素粉在干燥器中静置5小时以上，再进行真空干燥，干燥温度为75-85℃，干燥时间为20-40min，得到果蔬酵素结晶粉。本发明制备的酵素结晶粉感官评价良好，溶解性、流动性较酵素粉均得到提高。
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