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公开(公告)号：CN107354208A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710564738.4
申请日：2017-07-12
申请人： 济南大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6837 , C12Q2521/301 , C12Q2521/319 , C12Q2525/207 , C12Q2563/107 , C12Q2563/137
摘要： 本发明公开了一种基于三螺旋DNA结构检测microRNA的方法，涉及荧光microRNA检测技术领域。通过三种探针之间在微流控纸芯片表面的杂交反应形成了一种新的三螺旋DNA结构，在内切酶和外切酶的作用下将三螺旋DNA结构剪切成两部分，一部分能循环参与反应中实现信号放大，另一部分和目标microRNA反应生成DNA-RNA双链，将形成的DNA-RNA双链转移到另一个修饰MnO2纳米片的纸芯片表面并加入DSN对microRNA检测。本方法较传统方法有更高的灵敏度、操作简单、耗时少，大大促进了一个简单，快速的检测系统的发展，有助于我们对microRNA进行定量分析以及生物体的生理病理机制的理解，并最终为疾病的诊断和治疗提供新的思路和理论基础。
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公开(公告)号：CN106011274A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610551469.3
申请日：2016-07-14
申请人： 济南大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6844 , C12Q2525/301 , C12Q2563/107 , C12Q2525/207
摘要： 本专利公开了一种基于等温指数扩增法快速检测miRNA的方法，涉及荧光探针检测技术领域。通过microRNA与模板DNA特异性结合，在聚合酶和内切酶的作用下实现目标物以指数的形式放大，较传统方法有更高的灵敏度。本方法包括探针预变性‑等温指数扩增反应‑荧光检测三个步骤，反应时间短，能够较好的区分单核苷酸的差异性，此外，等温条件和简单的荧光测量，将大大促进一个简单，快速，低成本的检测系统的发展，有助于我们对microRNA进行定量分析以及生物体的生理病理机制的理解，并最终为疾病的诊断和治疗提供新的思路和理论基础。
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公开(公告)号：CN105784658A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610184950.3
申请日：2016-03-29
申请人： 济南大学
IPC分类号： G01N21/64
CPC分类号： G01N21/6428 , G01N2021/6432
摘要： 本发明公开了一种快速检测肿瘤相关小肽MUC1的方法，涉及荧光探针检测技术领域。利用适配体与目标小肽特异性识别的特点，设计特殊适配体序列，从而达到目标物特异性识别的目的；通过结合两种发卡结构探针的杂交反应完成信号放大的策略，从而实现目标小肽的灵敏检测。本方法包括探针预变性?混合反应?背景猝灭?荧光检测等四个步骤，操作简便快速，省时省力，为肿瘤相关小肽MUC1的检测提供一种新的方法。
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公开(公告)号：CN106198662B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201610769134.9
申请日：2016-08-31
申请人： 济南大学
IPC分类号： G01N27/26 , G01N27/327
摘要： 本专利公开了一种同时检测两种肿瘤标志物的电化学方法，涉及电化学检测技术领域。利用目标物与适配体特异性结合的作用力大于适配体与其DNA互补序列之间的作用力这一特点，使得两种目标物分别与电极上的捕获探针竞争结合各自的适配体，从而达到目标物特异性识别以及检测目标物转化的目的；通过将两种金属离子示踪物引入到检测体系中结合电化学检测方法，实现两种目标物信号的差别输出。本方法响应速度快、检测灵敏度高。
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公开(公告)号：CN107142332A
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201710581787.9
申请日：2017-07-17
申请人： 济南大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q2563/107 , C12Q2531/119 , C12Q2521/345 , C12Q2525/301 , C12Q2525/207
摘要： 本专利为分析microRNA (miRNA)的浓度荧光构建了一个通过依赖锌离子连接作为扩增生物催化剂的脱氧核酶的传感平台。该平台是基于目标miRNA诱导连接两亚基底物并且通过连接产物打开信标发夹探针，打开发夹激发荧光基团，通过检测荧光信号的强弱来确定目标物的浓度。本方法包括测定荧光光谱溶液的制备—形成再生脱氧核酶—第一扩增步骤—第二扩增步骤—目标物含量的测定五个步骤。本方法通过引入辅助核酸与剪切酶大大提高了荧光强度，从而降低了系统的检测限而且检测成本低、灵敏度高。miRNA的检测对生物功能的研究及以疾病诊断都有重要意义。
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公开(公告)号：CN106198662A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610769134.9
申请日：2016-08-31
申请人： 济南大学
IPC分类号： G01N27/26 , G01N27/327
CPC分类号： G01N27/26 , G01N27/3275
摘要： 本专利公开了一种同时检测两种肿瘤标志物的电化学方法，涉及电化学检测技术领域。利用目标物与适配体特异性结合的作用力大于适配体与其DNA互补序列之间的作用力这一特点，使得两种目标物分别与电极上的捕获探针竞争结合各自的适配体，从而达到目标物特异性识别以及检测目标物转化的目的；通过将两种金属离子示踪物引入到检测体系中结合电化学检测方法，实现两种目标物信号的差别输出。本方法响应速度快、检测灵敏度高。
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公开(公告)号：CN107541545A
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201610807456.8
申请日：2016-09-08
申请人： 济南大学
摘要： 本发明公开了一种基于纸芯片检测肺癌病人唾液中EGFR突变的方法。我们首先建立了一个微流控纸芯片电化学DNA生物传感器，通过分析纸电极表面DNA杂交反应可以检测非小细胞肺癌患者是否发生EGFR突变。电化学聚合的聚吡咯带正电荷，溶液中DNA的磷酸基团带负电荷，单链DNA与聚吡咯膜之间通过静电作用吸附到金电极表面，采用微分脉冲伏安法通过辣根过氧化物酶催化过氧化氢和亚甲基蓝的氧化还原反应。这项工作探讨了一种无创的电化学DNA检测方法，并为肺癌肿瘤标志物的检测提供了潜在的应用。
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