抗猪圆环病毒病shRNA及其设计合成法和用途

    公开(公告)号:CN101659953B

    公开(公告)日:2012-06-06

    申请号:CN200910152603.2

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种设计合成抗猪圆环病毒shRNA的方法,包括以下步骤:1)、根据PCV-2型病毒的基因组序列,以Rep基因或Cap基因为目的基因,选取一段19bp长的核酸序列;2)、选取同时满足以下3个条件的核酸序列为候选核酸序列:该核酸序列的GC含量为40%-60%,在15-19的位点中至少有3个A或T核酸残基,检查该19bp核酸序列,保证其不会形成二级结构;3)、将所得的候选核酸序列与猪圆环病毒基因组进行比对;以确定该候选核酸序列是特异性的只针对目的基因。本发明的抗猪圆环病毒shRNA,通过抑制猪圆环病病毒在细胞内的复制,从而发挥抗病毒作用。

    用于生产转基因猪的piggyBac转座载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN101659967B

    公开(公告)日:2011-09-28

    申请号:CN200910152602.8

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于生产转基因猪的piggyBac转座载体的构建方法,包括以下步骤:将加入了FRT位点的ZsGFP基因连接到转座子PXL-BAC II上形成重组载体PXL-BAC II-ZsGFP;再将加入了FRT位点的Neomycin Resistant基因连接到PXL-BAC II-ZsGFP,得重组通用载体PXL-BAC II-ZsGFP-Neo。该载体具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明的转座载体能满足细胞筛选、鉴定及高效转基因的要求。

    用于生产转基因猪的piggyBac转座载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN101659967A

    公开(公告)日:2010-03-03

    申请号:CN200910152602.8

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于生产转基因猪的piggyBac转座载体的构建方法,包括以下步骤:将加入了FRT位点的ZsGFP基因连接到转座子PXL-BAC II上形成重组载体PXL-BAC II-ZsGFP;再将加入了FRT位点的Neomycin Resistant基因连接到PXL-BAC II-ZsGFP,得重组通用载体PXL-BAC II-ZsGFP-Neo。该载体具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明的转座载体能满足细胞筛选、鉴定及高效转基因的要求。

    抗猪圆环病毒病shRNA及其设计合成法和用途

    公开(公告)号:CN101659953A

    公开(公告)日:2010-03-03

    申请号:CN200910152603.2

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种设计合成抗猪圆环病毒shRNA的方法,包括以下步骤:1)根据PCV-2型病毒的基因组序列,以Rep基因或Cap基因为目的基因,选取一段19bp长的核酸序列;2)选取同时满足以下3个条件的核酸序列为候选核酸序列:该核酸序列的GC含量为40%-60%,在15-19的位点中至少有3个A或T核酸残基,检查该19bp核酸序列,保证其不会形成二级结构;3)将所得的候选核酸序列与猪圆环病毒基因组进行比对;以确定该候选核酸序列是特异性的只针对目的基因。本发明的抗猪圆环病毒shRNA,通过抑制猪圆环病病毒在细胞内的复制,从而发挥抗病毒作用。

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