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公开(公告)号:CN103045645A
公开(公告)日:2013-04-17
申请号:CN201210527989.2
申请日:2012-12-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种在家蚕细胞内表达人源化糖蛋白的转基因转座载体,该载体中包含一个GFP报告基因和/或一个Neomycin抗性筛选基因,还包含以下4个糖基转移酶基因中的至少一个:GnT2、β4GalT、ST3和ST6。本发明还公开了含人源化糖基转移酶基因的家蚕转基因细胞系,将上述载体与Helper质粒按照3:3:1的质量比转染家蚕细胞,通过G418筛选,形成细胞单克隆化的克隆岛,再经传代培养,构成转基因家蚕细胞系。
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公开(公告)号:CN101659953B
公开(公告)日:2012-06-06
申请号:CN200910152603.2
申请日:2009-09-10
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种设计合成抗猪圆环病毒shRNA的方法,包括以下步骤:1)、根据PCV-2型病毒的基因组序列,以Rep基因或Cap基因为目的基因,选取一段19bp长的核酸序列;2)、选取同时满足以下3个条件的核酸序列为候选核酸序列:该核酸序列的GC含量为40%-60%,在15-19的位点中至少有3个A或T核酸残基,检查该19bp核酸序列,保证其不会形成二级结构;3)、将所得的候选核酸序列与猪圆环病毒基因组进行比对;以确定该候选核酸序列是特异性的只针对目的基因。本发明的抗猪圆环病毒shRNA,通过抑制猪圆环病病毒在细胞内的复制,从而发挥抗病毒作用。
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公开(公告)号:CN101659967B
公开(公告)日:2011-09-28
申请号:CN200910152602.8
申请日:2009-09-10
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种用于生产转基因猪的piggyBac转座载体的构建方法,包括以下步骤:将加入了FRT位点的ZsGFP基因连接到转座子PXL-BAC II上形成重组载体PXL-BAC II-ZsGFP;再将加入了FRT位点的Neomycin Resistant基因连接到PXL-BAC II-ZsGFP,得重组通用载体PXL-BAC II-ZsGFP-Neo。该载体具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明的转座载体能满足细胞筛选、鉴定及高效转基因的要求。
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公开(公告)号:CN101659967A
公开(公告)日:2010-03-03
申请号:CN200910152602.8
申请日:2009-09-10
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种用于生产转基因猪的piggyBac转座载体的构建方法,包括以下步骤:将加入了FRT位点的ZsGFP基因连接到转座子PXL-BAC II上形成重组载体PXL-BAC II-ZsGFP;再将加入了FRT位点的Neomycin Resistant基因连接到PXL-BAC II-ZsGFP,得重组通用载体PXL-BAC II-ZsGFP-Neo。该载体具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明的转座载体能满足细胞筛选、鉴定及高效转基因的要求。
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公开(公告)号:CN101659953A
公开(公告)日:2010-03-03
申请号:CN200910152603.2
申请日:2009-09-10
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种设计合成抗猪圆环病毒shRNA的方法,包括以下步骤:1)根据PCV-2型病毒的基因组序列,以Rep基因或Cap基因为目的基因,选取一段19bp长的核酸序列;2)选取同时满足以下3个条件的核酸序列为候选核酸序列:该核酸序列的GC含量为40%-60%,在15-19的位点中至少有3个A或T核酸残基,检查该19bp核酸序列,保证其不会形成二级结构;3)将所得的候选核酸序列与猪圆环病毒基因组进行比对;以确定该候选核酸序列是特异性的只针对目的基因。本发明的抗猪圆环病毒shRNA,通过抑制猪圆环病病毒在细胞内的复制,从而发挥抗病毒作用。
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