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公开(公告)号：CN118593489A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410773549.8
申请日：2024-06-17
申请人： 浙江大学
IPC分类号： A61K31/4418 , A61P31/22
摘要： 本发明公开了一种JH‑RE‑06在制备抑制伪狂犬病病毒DNA合成药物中的应用，跨损伤DNA合成通路抑制剂JH‑RE‑06具有REV1抑制剂的特性，可诱导REV1发生二聚化。REV1介导的TLS通路是猪伪狂犬病病毒DNA合成所必须的，因此JH‑RE‑06可以抑制猪伪狂犬病病毒的增殖。本发明首次发现JH‑RE‑06抑制伪狂犬病病毒增殖的作用机制，首次将该药物用于抗病毒。
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公开(公告)号：CN102286529B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110123583.3
申请日：2011-05-13
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12N15/85
摘要： 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这2种质粒分别与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠piggyBac转座子的转座特性，使绿色荧光蛋白基因和狂犬病病毒糖蛋白基因导入到家蚕的基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制家蚕中部丝腺生物反应器、后部丝腺生物反应器、以及丝腺生物反应器三种生物反应器，育成家蚕中部丝腺细胞、后部丝腺细胞或两部分丝腺细胞能够特异性合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的转基因家蚕新品种。
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公开(公告)号：CN116854783B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311017830.0
申请日：2023-08-14
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种伪狂犬病病毒衣壳蛋白VP5来源的抗原及其应用，涉及免疫化学和分子生物学技术领域。本发明提供了免疫原并高效地制备了VP5抗体，得到同时满足IFA和WB实验需求、特异性强而非特异性弱的抗体，制备获得的抗体可作为PRV内参抗体，亦为VP5功能研究提供了工具。
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公开(公告)号：CN116694666A
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202310830730.3
申请日：2023-07-07
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12N15/67 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种环形RNA高效表达载体，其具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列，包括长度为92bp的上游骨架序列、长度为75bp的下游骨架序列和位于二者间用于插入待环化基因的酶切位点EcoRI，表达框架全长仅为173bp，本发明构建的环形RNA表达载体能够使外源插入序列高效地表达环形RNA，为环形RNA的获得提供了一种高效表达工具，在保证circRNA高效环化的前提下，对其成环所需的上下游侧翼序列的长度进行了高度优化，进一步降低侧翼序列带来的剪接副产物复杂度。
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公开(公告)号：CN108950068B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201810788384.6
申请日：2018-07-18
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明涉及生物检测技术领域，旨在提供一种鸡传染性支气管炎病毒QX型毒株鉴别检测试剂盒。该试剂盒包括两对引物，分别是用于扩增传染性支气管炎病毒的通用引物和用于特异性扩增QX基因型毒株的引物；其中，用于特异性扩增QX基因型毒株的引物的序列如如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。本发明通过设计QX基因型的特异性引物建立有效的RT‑PCR检测方法，仅需通过一次RT‑PCR反应就能达到对QX基因型的IBV进行分型检测的目的。该试剂盒在同一PCR反应条件下，将2对引物加入同一个PCR体系中，既能有效地检测出临床样品或鸡胚尿囊液中的IBV，也能特异性地将QX型基因型的IBV区分出来。该检测方法快速高效、准确，对于指导疫苗的选用以及IB的快速防控都具有很大的意义。
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公开(公告)号：CN108950068A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810788384.6
申请日：2018-07-18
申请人： 浙江大学
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2565/125 , C12Q2521/107
摘要： 本发明涉及生物检测技术领域，旨在提供一种鸡传染性支气管炎病毒QX型毒株鉴别检测试剂盒。该试剂盒包括两对引物，分别是用于扩增传染性支气管炎病毒的通用引物和用于特异性扩增QX基因型毒株的引物；其中，用于特异性扩增QX基因型毒株的引物的序列如如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。本发明通过设计QX基因型的特异性引物建立有效的RT‑PCR检测方法，仅需通过一次RT‑PCR反应就能达到对QX基因型的IBV进行分型检测的目的。该试剂盒在同一PCR反应条件下，将2对引物加入同一个PCR体系中，既能有效地检测出临床样品或鸡胚尿囊液中的IBV，也能特异性地将QX型基因型的IBV区分出来。该检测方法快速高效、准确，对于指导疫苗的选用以及IB的快速防控都具有很大的意义。
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公开(公告)号：CN107653230A
公开(公告)日：2018-02-02
申请号：CN201710776002.3
申请日：2017-08-31
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/245 , A61P31/20 , C12R1/93
CPC分类号： C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/5254 , C12N2710/16721 , C12N2710/16734
摘要： 本发明公开了一种Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用。所述伪狂犬病毒毒株，命名为猪伪狂犬病病毒PRV-DX，保藏号为CGMCC No.14326。本发明猪伪狂犬病毒毒株PRV-DX从经免疫过疫苗的猪场里出现的伪狂犬病病猪身上分离纯化到的一株新的猪伪狂犬病毒，该毒株属于II型伪狂犬病毒，对猪的致病力要远远强于经典的PRV标准强毒株SC株，该病毒在Vero细胞传代后，毒价逐渐升高至第8代后趋于稳定，最高可达109 TCID50/mL。本发明猪伪狂犬病毒毒株PRV-DX对我国猪伪狂犬病毒流行病学调查及新流行强毒株的防控具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN107190022A
公开(公告)日：2017-09-22
申请号：CN201710507429.3
申请日：2017-06-28
申请人： 浙江大学
CPC分类号： C12N15/85 , C12N7/00 , C12N2770/20021 , C12N2770/20052 , C12N2800/204
摘要： 本发明公开了一种快速构建禽传染性支气管炎病毒反向遗传株的方法，属于冠状病毒反向遗传技术领域。所述构建方法包括：以BAC载体为骨架，运用体外同源重组技术，快速完成包含禽传染性支气管炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建，将构建的重组质粒直接转染细胞，在细胞内转录获得具有感染性的转录本，并完成病毒包装，将细胞与培养基的混合液接种SPF鸡胚并传代，获得禽传染性支气管炎病毒反向遗传株。该构建方法操作简单，阳性克隆率高，而且获得的反向遗传株具有传代稳定性，为体外研究病毒的致病机理、开发新型疫苗等提供了有效的工具；本发明利用5’添加的CMV启动子，在细胞内进行转录，利用3’添加的HDVR序列，大大提高了病毒的拯救效率。
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公开(公告)号：CN105785049A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610239101.3
申请日：2016-04-16
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N33/68
CPC分类号： G01N33/68
摘要： 本发明涉及免疫学检测方法领域，旨在提供一种鸡传染性支气管炎病毒nsp5 ELISA抗体检测试剂盒及其应用。该试剂盒包括：由重组表达的IBV非结构蛋白5包被的96孔酶联反应板、用样品稀释液稀释的IgG酶标抗体溶液、封闭液、洗涤液、样品稀释液、阳性对照样品、阴性对照样品、显色液和终止液。本发明以非结构蛋白nsp5作为包被抗原，可提供具有与进口商品化试剂盒高符合率的特性，而且成本大大降低。这是业内首次用IBV非结构蛋白作为抗原组装的ELISA抗体检测试剂盒。本试剂盒的使用具有方便快捷、敏感性高、特异性强等优点，为临床上IBV大规模抗体监测、流行病学调查以及IB的防控提供了一种新的有效的检测手段。
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公开(公告)号：CN118581115A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410830921.4
申请日：2024-06-25
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆的构建方法，将猪丁型冠状病毒的基因组划分为若干个片段，基于酵母同源重组的一步法完成克隆构建，具有高效、快速、稳定等特点。本发明所述感染性cDNA克隆具有良好的稳定性，可直接利用CRISPR/Cas9基因编辑在基因水平上改造猪丁型冠状病毒基因组。本发明提供的感染性cDNA克隆可直接通过转染哺乳动物细胞拯救重组病毒，简化了病毒拯救操作流程。本发明还提供了可表达HiBiT标签蛋白的猪丁型冠状病毒感染性克隆的构建方法，为深入研究猪丁型冠状病毒感染机制提供了良好的技术手段。
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