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公开(公告)号：CN108588237A
公开(公告)日：2018-09-28
申请号：CN201810550685.5
申请日：2018-05-31
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一组中华鳖性别鉴定的特异性引物及鉴别方法。本发明性别鉴定引物体系中的两对引物分别为一对雌性特异引物及一对利用雌雄基因组DNA均可扩增出的阳性参考引物。其中，雌性特异引物仅可在雌性基因组DNA中稳定扩增出一条196bp的条带，在雄性基因组DNA中无法扩增出条带；而阳性参考引物在雌雄基因组DNA中均可扩增出一条482bp条带。由此，在该PCR反应体系中，雌性基因组DNA能够扩增出196bp及482bp两条条带，而雄性仅可扩增出482bp一条条带。利用本发明的引物有利于正确进行中华鳖的性别鉴定，尤其是肉眼难以区分性别的胚胎期中华鳖的性别鉴定。为中华鳖的研究奠定了基础，也为中华鳖的养殖与人工选育提供了重要工具。
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公开(公告)号：CN104897906A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510364747.X
申请日：2015-06-25
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/558 , G01N33/533
CPC分类号： G01N33/6803 , G01N33/533 , G01N33/558 , G01N2333/31 , G01N2333/32 , G01N2333/33
摘要： 本发明涉及免疫层析技术，旨在提供一种双重定量蛋白毒素量子点荧光免疫层析试纸条及制备方法。该试纸条在聚氯乙烯背板表面依次布置样品垫、量子点抗体标记物固定垫、硝酸纤维素膜和吸收垫；在硝酸纤维素膜上设有两条检测线和一条质控线；在固定垫上固定有蛋白类毒素特异性单克隆抗体与羧基修饰水溶性量子点标记复合物；质控线由山羊抗鼠多克隆抗体喷涂形成，检测线由待检蛋白类毒素多克隆抗体喷涂形成，两条检测线所含蛋白类毒素多克隆抗体是不同的。本发明采用夹心法原理对蛋白类毒素进行定性检测和定量分析，可同时对两种蛋白类毒素进行定量检测，所制备的层析试纸条具有良好的灵敏度和稳定性，且操作简便快捷，特别适用于现场的快速诊断。
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公开(公告)号：CN105158458A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510400407.8
申请日：2015-07-06
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N33/535 , G01N33/577
CPC分类号： G01N33/535 , G01N33/577
摘要： 本发明涉及生物工程领域，旨在提供一种生物素链霉亲和素与电化学联用检测霉菌毒素的方法。该方法是在常规间接竞争ELISA反应的基础上，选用生物素标记的霉菌毒素单克隆抗体，并用碱性磷酸酶标记的链霉亲和素代替传统的酶标抗体，借助生物素链霉亲和素信号放大系统提高检测的灵敏度；并选用硝基苯磷酸作为碱性磷酸酶的催化底物，利用其产物硝基苯酚具有与硝基苯磷酸不同的电化学性质，通过电化学方法采集反应的最终信号；数据处理时，根据标准曲线计算实际样本中待检霉菌毒素的含量。本发明对待检测物质的检测灵敏度可以达到皮克-纳克水平；本发明成本低，易获取，并可实现高通量检测。具有简单，经济，高灵敏度，易操作，痕量检测等优点。
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公开(公告)号：CN104914084A
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201510364429.3
申请日：2015-06-25
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明属于生物工程领域，旨在提供一种量子点阳离子交换信号放大技术检测蛋白类毒素的方法。该方法是利用羧基修饰的水溶性硒化镉/硫化锌量子点对蛋白类毒素多克隆抗体进行标记，使量子点上的羧基与抗体氨基在偶联剂的作用下形成稳定的形成量子点-多克隆抗体偶联物；然后以夹心ELISA模式对蛋白类毒素进行检测，采用阳离子交换信号放大技术对结果进行分析，实现蛋白类毒素的定性检测和定量分析。本发明在提高检测灵敏度和稳定性的同时，缩短了检测的时间；对待检的蛋白类毒素的检测灵敏度可以达到皮克水平；本发明中使用的量子点合成方便，成本低。具有高效、快捷、灵敏度高、检测信号稳定等优点。
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公开(公告)号：CN108588237B
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201810550685.5
申请日：2018-05-31
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一组中华鳖性别鉴定的特异性引物及鉴别方法。本发明性别鉴定引物体系中的两对引物分别为一对雌性特异引物及一对利用雌雄基因组DNA均可扩增出的阳性参考引物。其中，雌性特异引物仅可在雌性基因组DNA中稳定扩增出一条196bp的条带，在雄性基因组DNA中无法扩增出条带；而阳性参考引物在雌雄基因组DNA中均可扩增出一条482bp条带。由此，在该PCR反应体系中，雌性基因组DNA能够扩增出196bp及482bp两条条带，而雄性仅可扩增出482bp一条条带。利用本发明的引物有利于正确进行中华鳖的性别鉴定，尤其是肉眼难以区分性别的胚胎期中华鳖的性别鉴定。为中华鳖的研究奠定了基础，也为中华鳖的养殖与人工选育提供了重要工具。
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公开(公告)号：CN105017411A
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201510400707.6
申请日：2015-07-06
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C07K14/765 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07K1/14 , C07K1/10
CPC分类号： C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795
摘要： 本发明涉及人工抗原合成技术，旨在提供一种黄曲霉毒素B1-载体蛋白人工偶联抗原的合成方法。该方法分两步，首先通过与羧甲基羟胺半盐酸盐作用，使其形成具有活性基团的黄曲霉毒素B1肟化物，然后通过碳二亚胺合成法制备黄曲霉毒素B1与载体蛋白的人工抗原偶联物，黄曲霉毒素B1肟化物与载体蛋白进行共价偶联，最后产物通过透析、冷冻干燥得到黄曲霉毒素B1人工偶联抗原。本发明反应条件温并且简单可行，偶联耗时短，成本低，容易规模化生产和推广应用；合成产物稳定性好，偶联比适宜，长期保存不易降解；合成产物具备较好的免疫原性，可制备特异性识别黄曲霉毒素B1的单克隆或多克隆抗体，对于建立黄曲霉毒素B1相关免疫学检测方法具有重要意义。
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公开(公告)号：CN105044346A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510359684.9
申请日：2015-06-25
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N33/58 , G01N33/533
CPC分类号： G01N33/588 , G01N33/533
摘要： 本发明涉及免疫层析技术，旨在提供一种双重定量真菌毒素量子点荧光免疫层析试纸条及制备方法。该试纸条在聚氯乙烯背板表面依次布置样品垫、量子点抗体标记物固定垫、硝酸纤维素膜和吸收垫；在硝酸纤维素膜上设有两条检测线和一条质控线；在固定垫上固定有真菌毒素单克隆抗体与羧基水溶性量子点的标记复合物；质控线由山羊抗鼠多克隆抗体喷涂形成，检测线由待检真菌毒素偶联抗原喷涂形成，两条检测线所含真菌毒素偶联抗原是不同的。本发明采用竞争法原理对真菌毒素进行定性检测和定量分析，可同时对两种真菌毒素进行检测，所制备的层析试纸条具有良好的灵敏度和稳定性，且操作简便快捷，特别适用于现场的快速诊断。
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公开(公告)号：CN104991070A
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201510366461.5
申请日：2015-06-25
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N33/58
CPC分类号： G01N33/588
摘要： 本发明属于生物工程领域，旨在提供一种量子点阳离子交换信号放大技术检测真菌毒素的方法。该方法是利用羧基修饰的水溶性硒化镉/硫化锌量子点对真菌毒素单克隆抗体进行标记，使量子点上的羧基与抗体氨基在偶联剂的作用下形成稳定的形成量子点标记的真菌毒素单克隆抗体；然后以竞争ELISA模式对真菌毒素进行检测，并采用阳离子交换信号放大技术，最终对反应后的荧光信号进行分析，实现真菌毒素的快速定性检测和定量分析。本发明在提高检测灵敏度和稳定性的同时，缩短了检测的时间，检测真菌毒素时仅需45min。对待检的真菌毒素的检测灵敏度可以达到皮克水平；本发明中使用的量子点合成方便，成本低。具有高效、快捷、灵敏度高、检测信号稳定等优点。
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