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公开(公告)号：CN117362399A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311240579.4
申请日：2023-09-25
IPC分类号： C07K14/00 , C07K16/06 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12Q1/6886 , G01N33/68 , G01N33/574 , A61K45/00 , A61P35/00
摘要： 本发明公开了一种由长链非编码RNA GHET1编码的蛋白多肽与应用。长链非编码RNA GHET1中包含的GHET1‑ORF区域，能够编码表达一种小肽GOMP。本发明首次提出并确认LncRNA GHET1翻译编码小肽GOMP，并且准确定位于细胞线粒体上，确认了其在胃癌细胞能量应激状态下起到保护胃癌细胞能量产生的作用，能够促进胃癌细胞的增殖与迁移能力，刷新了癌细胞中LncRNA通过编码小肽形成功能的范畴，GOMP小肽可以作为诊疗胃癌的新的分子分型标记和药物靶点，可在制备诊疗胃癌的分子标记物中的应用。
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公开(公告)号：CN117679434A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311681021.X
申请日：2023-12-08
申请人： 浙江大学
IPC分类号： A61K31/7088 , A61K31/337 , A61P35/00 , A61P1/16
摘要： 本发明提供siRNA与紫杉醇组合物在制备治疗肝细胞癌药物中的应用，所述组合物由siCYP1B1和siP‑gp与紫杉醇按1:1:1的比例组合而成。本发明在低氧下肝细胞癌中CYP1B1和P‑gp蛋白表达增加以及低氧下肝细胞癌对紫杉醇的药物敏感性降低的研究基础上，寻找可以靶向敲低CYP1B1和P‑gp的siRNA。本发明通过siRNA靶向性敲低CYP1B1和P‑gp，从而降低CYP1B1和P‑gp的表达量，逆转肝细胞癌对紫杉醇的耐药性，增强紫杉醇所介导的细胞周期阻滞作用。
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公开(公告)号：CN113324960A
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110591616.0
申请日：2021-05-28
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N21/64 , G01N33/533
摘要： 本发明公开了一种抗体荧光探针及制备方法和在可视化细胞检测中的应用，所述抗体荧光探针是将抗体标记物与单克隆抗体偶联，再将偶联单克隆抗体后的抗体标记物与自淬灭荧光基团偶联制得；所述抗体标记物是与单克隆抗体氨基末端特异性偶联的分子；所述自淬灭荧光基团在二聚体状态处于淬灭状态。本发明所提供的膜蛋白的检测方法以修饰的抗体为基础，所使用的仪器为实验室常规的共聚焦荧光显微镜，检测过程操作简单，且可以实现对膜蛋白的动态、半定量特异性监测，可以直观地标记活细胞中的膜蛋白且不改变蛋白本身的功能特点，因此在膜蛋白结构功能的研究、以膜蛋白为检测对象的疾病诊疗中发挥辅助作用。
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公开(公告)号：CN113324960B
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202110591616.0
申请日：2021-05-28
申请人： 浙江大学
IPC分类号： G01N21/64 , G01N33/533
摘要： 本发明公开了一种抗体荧光探针及制备方法和在可视化细胞检测中的应用，所述抗体荧光探针是将抗体标记物与单克隆抗体偶联，再将偶联单克隆抗体后的抗体标记物与自淬灭荧光基团偶联制得；所述抗体标记物是与单克隆抗体氨基末端特异性偶联的分子；所述自淬灭荧光基团在二聚体状态处于淬灭状态。本发明所提供的膜蛋白的检测方法以修饰的抗体为基础，所使用的仪器为实验室常规的共聚焦荧光显微镜，检测过程操作简单，且可以实现对膜蛋白的动态、半定量特异性监测，可以直观地标记活细胞中的膜蛋白且不改变蛋白本身的功能特点，因此在膜蛋白结构功能的研究、以膜蛋白为检测对象的疾病诊疗中发挥辅助作用。
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公开(公告)号：CN102586191A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210006590.X
申请日：2012-01-10
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供一种共转染CYP3A4和MDR1细胞模型的构建，是先将P-gp的基因克隆到pcDNA3.1(+)上，转染MDCK细胞，经过G418筛选出单克隆细胞，得到MDCK-MDR1细胞株，然后将CYP3A4克隆到带有潮霉素B筛选标记的载体pcDNA3.1(+)/Hygro上，转染MDCK-MDR1细胞，经过潮霉素B筛选，得到共转染CYP3A4和MDR1细胞。MDCK-MDR1/CYP3A4被中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为：CCTCCC2011119，保藏日期：2011年12月15日。本发明构建的模型，可用于模拟药物载肠道的吸收和代谢过程，进而筛选P-gp和CYP3A4共同底物。
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公开(公告)号：CN103881977B
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201410066266.6
申请日：2014-02-26
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供一种共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建，以人基因OAT1 cDNA为模板，扩增获得人OAT1基因片段，连接到载体pcDNA3.1(+)，获得质粒pcDNA3.1(+)/OAT1，转染MDCK细胞，经筛选得到高表达OAT1的MDCK-hOAT1细胞；然后将人CYP1A2基因片度连接到载体pcDNA3.1/Hygro(+)，获得质粒pcDNA3.1/Hygro(+)/CYP1A2，转染MDCK-hOAT1细胞，经潮霉素B筛选，得到共表达OAT1和CYP1A2细胞，再对细胞进行mRNA验证并通过经典底物及抑制剂进行功能验证。本发明的细胞模型可在基于OAT1和CYP1A2的药物毒性作用在细胞水平上筛选中的应用，可预测这两种蛋白对药物处置过程中的协同作用，为
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公开(公告)号：CN103881977A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410066266.6
申请日：2014-02-26
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供一种共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建，以人基因OAT1cDNA为模板，扩增获得人OAT1基因片段，连接到载体pcDNA3.1(+)，获得质粒pcDNA3.1(+)/OAT1，转染MDCK细胞，经筛选得到高表达OAT1的MDCK-hOAT1细胞；然后将人CYP1A2基因片度连接到载体pcDNA3.1/Hygro(+)，获得质粒pcDNA3.1/Hygro(+)/CYP1A2，转染MDCK-hOAT1细胞，经潮霉素B筛选，得到共表达OAT1和CYP1A2细胞，再对细胞进行mRNA验证并通过经典底物及抑制剂进行功能验证。本发明的细胞模型可在基于OAT1和CYP1A2的药物毒性作用在细胞水平上筛选中的应用，可预测这两种蛋白对药物处置过程中的协同作用，为临床合理用药提供依据。本发明设计合理，重复性强。
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公开(公告)号：CN102586325A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210017177.3
申请日：2012-01-19
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供抑制CYP3A4的shRNA表达质粒，根据干扰片段设计原则和CYP3A4的序列，通过Blast软件排除与基因组其他基因具有同源性的序列，获得三个符合要求的shRNA模板序列，将合成的上述shRNA模板分别克隆，通过氨苄抗性筛选和测序，成功获得三种shRNA表达质粒。在不同的细胞模型中，shRNA单独或混合表达质粒均能够较好地抑制CYP3A4mRNA表达(55％)和蛋白表达(50％)，且无脱靶效应，具有良好的专属性。因此，本发明提供的三种shRNA表达质粒可以作为CYP3A4的特异性抑制剂，用于CYP3A4底物和诱导剂的筛选和确证。
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