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公开(公告)号：CN117821431A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311607042.7
申请日：2023-11-28
申请人： 浙江工业大学 , 浙江绿创生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种酪氨酸解氨酶突变体及其应用，通过对酪氨酸解氨酶的第458位的氨基酸进行突变，获得了能够提高和生产性能的酪氨酸解氨酶突变体，将得到的突变体在大肠杆菌中表达并进行发酵生产，能够使得咖啡酸含量较亲本的501.0mg/L提高至604.4mg/L，提高了20.6％，进一步的在15L发酵罐中放大生产，最终获得了产量为6.36g/L，时空产率为0.18g/L/h的咖啡酸。因而本发明获得的酪氨酸解氨酶突变体具备广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117187283A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310966982.9
申请日：2023-08-02
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一株合成绿原酸的工程菌及其构建方法，通过构建重组菌生物合成绿原酸，所述重组菌同时表达11种酶，分别为羟基肉桂酰辅酶A奎尼酸转移酶突变体，4‑香豆酸辅酶A连接酶，酪氨酸解氨酶，抗反馈抑制突变体3‑脱氧‑D‑阿拉伯庚酮酸‑7‑磷酸合成酶，抗反馈抑制突变体分支酸变位酶/预苯酸脱氢酶，4‑羟基苯乳酸‑3‑羟化酶，酪氨酸转氨酶，奎尼酸/莽草酸脱氢酶，脱氢奎尼酸合成酶，转酮醇酶和3‑脱氧‑7‑磷酸庚酮酸合成酶，重组菌还敲除了预苯酸脱水酶基因和酪氨酸转录调控基因。本发明所述工程菌以葡萄糖或甘油为碳源，可以实现绿原酸的从头合成，摇瓶中发酵产量为331.9mg/L。本发明实现了绿原酸的发酵法合成，有效提升了产量。
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公开(公告)号：CN117187224A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310964536.4
申请日：2023-08-02
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种高活性酪氨酸解氨酶及其突变体和应用。以pET24a为表达载体，以大肠杆菌BL21(DE3)为表达宿主，以左旋多巴为底物，通过筛选获得高活性酪氨酸解氨酶，通过对酪氨酸解氨酶进行突变，获得了能够提高催化和生产性能的酪氨酸解氨酶突变体。结合共过表达抗反馈抑制突变体3‑脱氧‑D‑阿拉伯庚酮酸‑7‑磷酸合成酶、抗反馈抑制突变体分支酸变位酶/预苯酸脱氢酶和4‑羟基苯乳酸‑3‑羟化酶，在大肠杆菌中发酵生产咖啡酸，使得咖啡酸在摇瓶中的产量从原始菌的92mg/L提高至215mg/L。本发明获得的酪氨酸解氨酶及其突变体具备良好的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN118421735A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410560408.8
申请日：2024-05-08
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种遗传霉素的发酵方法，依次通过母瓶和子瓶种瓶扩大培养，并在发酵罐上进行三级发酵，发酵液经过酸化、过滤后，分离得到离子交换树脂，取树脂，进行洗脱得到G418待检测溶液，采用液相检测对所述的G418待检测溶液进行含量检测。本发明利用生物发酵制备遗传霉素的产量为690mg/L，与摇瓶效价相比，其产量提高了150%，大幅度提升了遗传霉素的产量。
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