一种鉴定中华鳖广西群体和松阳群体种质资源的引物对和试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN117721210A

    公开(公告)日:2024-03-19

    申请号:CN202310967430.X

    申请日:2023-08-02

    摘要: 本发明公开了一种用于中华鳖广西群体和松阳群体种质资源鉴别的引物对和试剂盒及方法,具体属于中华鳖不同地理群体种质资源鉴别的技术领域。上述方法包括以下步骤:对不同的待鉴定个体分别提取DNA;以提取到的DNA为模板,利用筛选出的引物对进行荧光定量PCR扩增;不同群体的反应在仪器上进行,反应结束后对熔解曲线进行分析并记录Tm值,根据不同样本的Tm值差异对中华鳖不同群体进行鉴别。为验证检测结果的准确性,在不告知样本来源的情况下,对不同原良种场的中华鳖进行种质鉴定,结果准确度可达100%。上述方法允许在早期进行中华鳖不同群体的混养,解决了形态特征作为鉴别中华鳖不同群体的局限性,具有成本低、操作简单、准确率高的优点。

    一种鳖科动物使用的微创血液抽取方法及染色体制片方法

    公开(公告)号:CN115046808B

    公开(公告)日:2023-09-01

    申请号:CN202210855492.7

    申请日:2022-07-20

    IPC分类号: G01N1/14 G01N1/30

    摘要: 本发明公开了一种鳖科动物使用的微创血液抽取方法及染色体制片方法,属于细胞遗传学技术领域,该方法包括如下步骤:S01、将待检动物置于30℃的水族系统中暂养≥10天。S02、采用腹腔注射法对待检动物进行PHA注射。S03、抽取待检样本的血液。S04、将抗凝血与秋水仙素溶液混合,得到混合物A。S05、将混合物A与淋巴细胞分离剂混合,得到混合物B。S06、在混合物B中,吸取淋巴细胞上清液,并加入生理盐水,混匀后离心,得到淋巴细胞沉淀。S07、用0.5%KCl低渗溶液重悬淋巴细胞沉淀,37℃低渗50min,离心收集细胞。使用卡诺固定液固定2次后进行制片。该染色体制片方法具有操作步骤简单以及不会使待检动物致死的优点。

    一种大口黑鲈脊髓组织细胞系及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN117511849A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311599990.0

    申请日:2023-11-28

    IPC分类号: C12N5/071 C12N7/00 C12R1/93

    摘要: 本发明公开了一种大口黑鲈脊髓组织细胞系及其构建方法与应用。一种大口黑鲈脊髓组织细胞系,于2023年6月10日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C202359,命名为:大口黑鲈脊髓组织细胞系MSC(Micropterus salmoides cell MSC)。本发明所建立的细胞系对蛙虹彩病毒、传染性脾肾坏死病毒、弹状病毒均敏感,可很好地进行大口黑鲈病毒分离、培养、检测及疫苗研究。本发明大口黑鲈脊髓组织细胞系的构建方法以大口黑鲈脊髓组织为对象,采用胰酶消化法成功建立。大口黑鲈脊髓组织细胞对多种病毒敏感,可为分离、鉴定鱼类病毒提供重要的工具,为研发安全、高效和价廉的病毒疫苗奠定基础。同时,本发明的方法也可以应用于其它鱼类细胞的建立。