对目标基因组区域边扩增边连接的公用接头及连接方法

    公开(公告)号:CN101532014A

    公开(公告)日:2009-09-16

    申请号:CN200810218333.6

    申请日:2008-12-12

    IPC分类号: C12N15/11 C12N15/10 C40B50/06

    摘要: 本发明提供了一种对目标基因组区域边扩增边连接的公用接头,该公用接头具有两对,其中,每对接头都由一对反向互补的寡居核苷酸以5’→3’方向和以3’→5’方向碱基相互配对组合而成,所述寡核苷酸序列的结构特征为:1)每对接头其中一条寡核苷酸序列的3'端多一个碱基“T”;2)在多核苷酸扩增和连接退火温度下不与目标基因组结合;3)序列长度至少为18个碱基。本发明还涉及对目标基因组区域边扩增边连接的连接方法,以及对目标基因组区域建立重测序随机DNA文库的方法。本发明的方法提高了边扩增边连接的效率,降低了实验成本,且具有高的实验通量。

    对目标基因组区域边扩增边连接的公用接头及连接方法

    公开(公告)号:CN101532014B

    公开(公告)日:2010-12-22

    申请号:CN200810218333.6

    申请日:2008-12-12

    IPC分类号: C12N15/11 C12N15/10 C40B50/06

    摘要: 本发明提供了一种对目标基因组区域边扩增边连接的公用接头,该公用接头具有两对,其中,每对接头都由一对反向互补的寡居核苷酸以5’→3’方向和以3’→5’方向碱基相互配对组合而成,所述寡核苷酸序列的结构特征为:1)每对接头其中一条寡核苷酸序列的3’端多一个碱基“T”;2)在多核苷酸扩增和连接退火温度下不与目标基因组结合;3)序列长度至少为18个碱基。本发明还涉及对目标基因组区域边扩增边连接的连接方法,以及对目标基因组区域建立重测序随机DNA文库的方法。本发明的方法提高了边扩增边连接的效率,降低了实验成本,且具有高的实验通量。